大米发泡蛋白酶法制备工艺

以大米浓缩蛋白为原料制备大米发泡蛋白。采用响应面分析法对大米发泡蛋白的酶解法制备工艺条件进行优化,并测定大米发泡蛋白的蛋白质得率、氮溶解指数、起泡性及起泡稳定性。优化的工艺条件是碱性蛋白酶/底物 0.01943 U/g、反应时间57 min、料液比1︰7.27、温度60℃、pH 7.5。在此条件下获得的大米发泡蛋白发泡力为131 mL,起泡性为162%,起泡稳定性在30 min内保持100%,大米发泡蛋白的得率为34%,蛋白质纯度为88.05%,在pH 2～12范围内氮溶解指数均高于90%。     

利用废酵母生产高蛋白饲料的研究

本试验旨在开发新型环保型高蛋白饲料,主要以饲用产β-甘露聚糖酶酵母发酵后剩下的废酵母泥为原料,利用其蛋白含量高的特点,采用自溶方式增加其溶出蛋白,并添加豆粕作为膨化干燥剂制备高蛋白饲料。采用响应面法分析法对自溶时间、温度以及加水量进行优化,同时获得该酵母的最佳自溶时间23 h、自溶温度49℃,加水量59%,该条件下,考马斯亮蓝法测定该废酵母自溶产生的溶出蛋白质含量可达0.431 mg/mL,溶出蛋白占酵母泥干物质的质量分数为13.70%。自溶后的酵母泥再添加不同比例的豆粕进行干燥的实验。结果表明:添加质量分数100%的豆粕,在25℃下烘箱干燥,产品风味、色泽和硬度最佳,最终饲料产品的总蛋白质含量为49.10%,酵母溶出蛋白量为3.10%,含水量为5.70%,本文提供了一种有效的可工业化生产的高蛋白饲料生产方法。     

怎样区分赌博与娱乐

赌博罪是指以营利为目的,聚众赌博,开设赌场或者以赌博为业的行为.如何区分赌博与娱乐的界限?2005年1月公安部做出四点解释.一是从主观方面看,是否以营利为目的,它是构成赌博罪的主观要件,而群众娱乐是以休闲消遣为目的.     

用蜂毒溶血肽和表皮生长因子构建膜毒性免疫毒素

表皮生长因子受体由于在许多种肿瘤细胞表面过度表达而成为特异杀伤肿瘤细胞的理想靶位;正电性抗菌肽有独特的膜毒性细胞毒机制.研究以小鼠(Mus musculus)表皮生长因子(mouse epidermal growth factor,MEOF)为导向部分,以蜂毒溶血肽(melittin,Mel)为毒性部分,构建特异杀伤肿瘤细胞的膜毒性免疫毒素MEGFMEL嵌合蛋白.该嵌合蛋白以大肠杆菌(Eschedchia coil)BL21为表达宿主,以pET30a为表达载体,采用低温诱导表达和无破胞程序的冻融法进行纯化,最终浓度为63.45μg/Ml、纯度为68%.体外活性检测表明,MEGFMEL嵌合蛋白对表面过度表达EGFR的肝癌A431细胞表现出显著杀伤力,其LD50为52.6μg/Ml.结果显示以正电性抗菌肽为毒性部分构建针对表皮生长因子受体的新型膜毒性免疫毒素(im-munotoxin,IT)是可行的.     

人β-防御素-3与植物甜蛋白Brazzein嵌合基因的合成及其在大肠杆菌中的表达

根据人β-防御素-3(hBD3)和植物甜蛋白Brazzein(Bra)的成熟区氨基酸序列，按照细菌密码子的偏爱人工合成了7对末端具粘合位点的核苷酸序列。经连接和PCR扩增，使人β-防御素-3与植物甜蛋白Brazzein的编码序列通过一段序列（含凝血酶切割位点涟接成为嵌合DNA。将其插入到pET30a的T7启动子之下，构建成了防御素和甜蛋白双价基因的表达载体pET30a-hBDs-Bra，在大肠杆菌(Eschenchia coli)BL21中诱导表达后，得到了与预计分子量相同的蛋白，约占总蛋白的30．5％，产量约为1．4～2．8mg/mL。     

一种新的农用抗生素初筛方法

在农用抗生素筛选方面,过去的筛选模型主要有两种[1～3]:一是室内筛选,采用平皿拮抗测定模型,该模型与盆栽植株测定相关性太低,更不能反映内吸、植物体内运输等生态效应,往往造成漏筛;二是盆栽(或田间小区)植株防效测定模型,盆栽植株测定虽然比较接近田间防效,但工作量太大,筛选工作效率太低.     

外来有害生物入侵现状及防控对策

生物多样性是人类赖以生存和发展的物质基础,地球上的生物多样性每年为人类创造约33兆,美元的价值。然而,近年来,生物多样性受到了严重威胁,物种灭绝速度不断加快,遗传多样性急剧贫乏,生态系统严重退化,这些都加剧了人类面临的资源、环境、粮食和能源危机。而外来物种对生态环境的入侵已经成为生物多样性丧失的主要原因之一。     

人β防御素3和植物des-pGlu1-Brazzein融合蛋白的纯化、活性分析及其乳糖诱导表达条件优化

对乳糖诱导工程菌株BL-pET-hBD3-Bra表达的人β防御素3和植物des-pGlu1-Brazzein融合蛋白进行了纯化和活性分析。并对工程菌株的乳糖诱导表达条件进行了优化。对目的蛋白的活性分析表明,hBD3-Bra融合蛋白有一定的甜味,但是杀菌活性很弱,经凝血酶切割后,重组hBD3有明显的抑菌活性,des-pGlu1-Brazzein的甜度大约为蔗糖甜度的600倍。乳糖浓度、诱导时间和诱导温度对菌株生长和目的蛋白表达的试验结果显示：高浓度乳糖对菌株生长有抑制作用（P<0.01）,对目的蛋白的表达无显著影响(P>0.05);时间延长对于菌株生长有利（P<0.01）,对目的蛋白的表达无显著影响（P>0.05);温度对菌株生长和目的蛋白的表达均有显著影响（P<0.01）。进一步的研究表明,菌株在30℃-32℃生长,在30℃诱导最优,乳糖和IPTG的诱导结果无显著差异（P>0.05)。