鸭疫里默氏杆菌贵州流行株蜂胶灭活疫苗制备

【目的】制备鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)贵州流行株蜂胶灭活疫苗。【方法】选取RA血清2型贵州流行株(RA-SS-8株)为基础菌株,依次利用分光光度法和平板计数法测定细菌生长曲线,再进行灭活条件筛选,以蜂胶为佐剂制备RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,并进行无菌检验、安全性检验及免疫鸭攻毒保护性试验。【结果】分光光度法测定RA-SS-8株菌液D_{600 nm}值随培养时间变化显示,细菌在0~3 h时增殖缓慢,在3~10 h时增殖趋势明显加快,在10 h以后增殖逐渐趋于平缓,随着培养时间的延长,细菌最终进入衰亡期;平板计数法结果显示,RA-SS-8株D_{600 nm}值为0.1~0.8时,该菌处于对数生长期,且D_{600 nm}值与活菌数呈现良好的线性关系;RA-SS-8株最佳灭活条件为0.2%甲醛溶液、37 ℃灭活12 h;蜂胶灭活疫苗含菌量为3.8×10⁹ CFU/mL,蜂胶干物质含量为10 mg/mL;无菌检验巧克力琼脂培养基上未见菌落生长;安全性检验以2倍免疫剂量接种雏鸭在观察期内未表现出不良反应,大体病变观察未见明显病变;免疫鸭攻毒保护性试验显示,蜂胶灭活疫苗免疫组鸭对RA-SS-8株的攻击后保护率为70%,蜂胶灭活疫苗对试验鸭心脏、肝脏组织均具有良好的保护效果。【结论】本研究成功制备了RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,为蜂胶灭活疫苗制备和动物免疫试验奠定基础。     

GPX4失活通过JNK通路缓解LPS诱导巨噬细胞炎症反应

【目的】 研究硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidases 4,GPX4）失活如何参与调控脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应及其潜在的分子机制。【方法】 体外培养RAW264.7巨噬细胞,以DMSO为对照,使用0.1~5.0 μmol/L GPX4抑制剂FIN56处理,通过CCK-8法检测细胞活力和Western blotting检测GPX4蛋白表达水平,确定抑制剂最适浓度。将RAW264.7巨噬细胞分为4组：对照组,添加DMSO培养24 h;FIN56（GPX4抑制剂）组,添加0.5 μmol/L FIN56培养24 h;DMSO-LPS组,DMSO培养24 h后使用LPS （100 ng/mL）刺激3 h;FIN56-LPS组,FIN56培养24 h后使用LPS刺激3 h。各组细胞经培养后,利用荧光探针2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（2',7'-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate,H₂DCFDA）检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,使用试剂盒法检测细胞内丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平,分别使用ELISA和荧光定量PCR检测促炎细胞因子白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的分泌水平和基因表达量,使用Western blotting法检测Toll样受体4（toll like receptor 4,TLR4）信号通路相关蛋白表达水平。【结果】 与DMSO处理相比,0.5 μmol/L FIN56处理巨噬细胞24 h对细胞活性无显著影响（P>0.05）,且显著降低GPX4蛋白表达水平（P<0.05）,故选用0.5 μmol/L FIN56用于后续实验。与对照组相比,FIN56和LPS均显著增加了ROS积累（P<0.05）,而与DMSO-LPS组相比,FIN56-LPS组ROS水平显著升高（P<0.05）。与对照组相比,LPS可显著增加小鼠巨噬细胞IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达量和IL-6含量,以及c-Jun氨基末端蛋白激酶（c-Jun N-terminal protein kinase,JNK）和c-Jun磷酸化水平（P<0.05）,而FIN56可显著下调LPS诱导的IL-6的mRNA表达量和含量及JNK和c-Jun磷酸化水平（P<0.05）,但对p38蛋白（p38 MAPK,p38）、细胞外调节蛋白激酶（phosphorylate extracellular regulated protein kinases1/2,Erk1/2）蛋白表达水平无显著影响（P>0.05）。【结论】 GPX4失活可有效阻断JNK和c-Jun磷酸化,从而特异性抑制LPS诱导的巨噬细胞的炎症反应。该结果可为以GPX4为靶点研发抗炎治疗策略提供理论依据。     

华盖木组织培养中褐化控制研究

以木兰科濒危植物华盖木顶芽为试材,对其组织培养过程中褐化的发生及防止措施作了系统研究,结果表明:选取华盖木下部枝条顶芽为外植体,选用1/2MS为基本培养基并附加O．1～1．5 mg/L BA和0．1～1．0mg/L IBA,适当提高培养基硬度,培养初期适宜的低温处理是褐化控制的有效措施;聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、二硫苏糖醇(DTT)、抗坏血酸(VC)3种防褐化剂对褐化的抑制作用较为明显,其效果PVP>DTF>vC。     

美国葡萄柚营养成分分析与评价

对西双版纳普文林场引种的葡萄柚品种进行外观性状及化学成分分析,并对其营养品质进行了综合分析。结果表明,不同品种的单果质量、可食率、可溶性固形物含量、柠檬酸含量、总糖含量、和维生素C含量的差异明显,其变化幅度依次为350~550 g,70%~75%,7%~11%,0.9%~1.7%,3.49%~6.03%,20~30 m g/(100 g)。不同品种的果形指数差异较小。由此得出哈路比、亨路比、里德马叙、里约红、星路比的综合营养品质较好,矮化、火焰的综合营养品质较差。以期为开展葡萄柚品种区划及制定分级标准提供必要的参考和依据。     

城镇生态绿地建设与发展思路

论述了城镇绿地的作用与生态功能,分析了浙江省城镇绿化发展现状,提出城市生态绿地、小城镇和城郊结合部生态绿地、村庄及平原生态绿地的发展思路.     

威雷微胶囊水悬剂喷干法防治栗山天牛试验初报

针对栗山天牛幼虫在干材里危害、隐藏性强、一般药物很难触及、防治非常困难等特点，在栗山天牛成虫羽化期，用触杀式威雷微胶囊水悬剂喷干灭虫，收到了明显的防治效果。     

广西八角良种研究综述

八角主产广西,是南亚热带重要的香料树种。广西的八角良种研究始于20世纪80年代初,经过全区品种资源普查,划定了17个农家品种,确定4个类型为优良类型,然后继续优良个体的选择,突破了无性繁殖技术的关键,初步选出了优良单株,并有3个无性系通过区级良种认定。     

梣天牛危害损失调查初报

梣天牛幼虫危害椴树主干,成虫危害椴树叶柄,在3年内使树体从上向下干枯死亡,材质腐化,平均枯死木蓄积占林木蓄积的18．12％。发生林分直接经济损失16 110元·hm-2,生态效益损失在96 660 -322 200元。     

不同绿地类型对城市小气候的影响

通过HOBO便携式气象站测定了城市林荫道、草坪、广场3种绿地类型的气温、相对湿度和辐射强度。分析了不同绿地类型上的温度、湿度及太阳辐射变化情况,比较了不同绿地类型对城市小气候的影响。结果表明,随着辐射强度的增强,林荫道有较好的降温保湿效果,并且林荫道与广场的最高温差可达2.76℃,相对湿度的最高差值可达12.5%。在晴朗无风的条件下,随着辐射强度的变化林荫道上温度和相对湿度变化比较缓慢,所以随着辐射强度的增强,林荫道上的气温低于草坪,相对湿度则高于草坪,当辐射强度逐渐减弱时,林荫道上的气温逐渐高于草坪,相对湿度则低于草坪。