用套式PCR方法对几种猪用冻干疫苗的PCV2检测

参照Genbank已发表的猪圆环病毒2型的基因序列,取其比较保守的基因片段ORF2,利用引物设计软件Oli-go5.0设计两对PCV2型特异的引物,其中第一对引物扩增跨度为ORF2全基因片段,长度为702 bp,第二对引物扩增ORF2中间的一个小片段,跨度大小为494 bp.首先用第一对引物扩增阳性DNA,阳性DNA的浓度从10-1稀释到10-11,然后以第一次PCR产物为模板,用第二对引物进行PCR,发现这种套式PCR的方法比用普通PCR灵敏度提高102倍.同这种套式PCR方法对广东省市场上出售的几种猪用弱毒疫苗进行猪圆环病毒2型检测,结果发现这几种疫苗全部为阴性,本实验说明目前广东市场上出售的弱毒疫苗在制作过程中没有受到PCV2的污染,解除了广大猪场主的顾虑.     

Effects of M. vaccae on eosinophil apoptosis and Bcl-2 protein expression in lung tissues of asthmatic guinea pigs

AIM: To study the effects of M. vaccae on eosinophil apoptosis and Bcl-2 protein expression in lung tissues of asthmatic guinea pigs. METHODS: 30 guinea pigs were divided into normal saline (NS) group, asthma group and M. vaccae treatment group at random, every group included 10 guinea pigs. Guinea pigs in M. vaccae treatment group were injected intramuscularly with 22.5 μg M. vaccae 10 days before OVA immunization. TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) technique was used to investigate the apoptosis of eosinophils and immunohistochemistry method was used to study the expression of Bcl-2 protein in lung tissues. RESULTS: The apoptosis index (AI) of eosinophils in lung tissues in M. vaccae treatment group was significant higher than that in asthma group ［(23.78±5.42)% vs (4.56±0.68)%, P<0.01］. The mean optical density value of Bcl-2 protein in lung tissues of M. vaccae treatment group was significant lower than that of asthma group ［(1 556.3±492.4) vs (2 321.9±751.2), P<0.05］. CONCLUSION: The apoptosis of eosinophils induced by M. vaccae in lung tissues of asthmatic guinea pigs may be due to the inhibition of Bcl-2 protein expression.     

不同刈割方式对苇状羊茅混播草地生产性能的影响

采用不同刈割高度和不同留茬高度处理对优良混播组合“苇状羊茅 +多年生黑麦草 +扁穗雀麦+白三叶”人工草地进行了刈割利用试验 ,结果表明 :该混播组合人工草地刈割利用时以草层高度40cm、留茬高度 5cm效果最好 ,可最大限度地发挥该草的生产性能和延长利用期     

利用BrdU在CEF(TK~ )细胞中筛选TK~-重组鸡痘病毒

将新城疫病毒 (NDV)四平株 HN基因 ,插入不含报告基因、以 TK为侧翼的鸡痘病毒表达载体 p UTA- 2中的复合启动子下游 ,获得重组表达质粒 p UTA- 2 HN。将重组表达质粒转染鸡痘病毒 (FPV)感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,培养、收获病毒后 ,用含 40 m g/ L 5 -溴 - 2 -脱氧尿嘧啶 (Brd U )的培养液 ,在 CEF(TK )细胞中筛选培养 2代 ,然后用不含 Brd U的培养液进行病毒蚀斑纯化 ,成功筛选出表达 NDV HN蛋白的 TK-重组鸡痘病毒     

猪带绦虫不同发育阶段的cDNA合成及含量测定

本文以猪带绦虫成熟虫卵、孵化激活的六钩蚴以及人工感染的囊尾蚴为原始材料，采用Promega试剂盒法分别分离提取总RNA和mRNA，反转录合成cDNA，并用a-^32P CTP掺入法放射测定其含量。实验表明：合成的猪带绦虫虫卵、六钩蚴和囊尾蚴的cDNA含量高，均可达2500ng，片段大小在300bp以上，可满足构建不同发育阶段cDNA基因文库的需要。     

哺乳类精原干细胞体外培养影响因素

精原干细胞为体内天然干细胞，如能体外培养建系或建立其长期培养系统，将会极大地促进精原干细胞移植，转基因等技术的实际应用，也会给体外研究细胞的发育分化提供很好的材料，影响精原干细胞外存活，增殖的因素很多，该文主要综述了基本培养基的选择、血清和添加剂，激素和维生素的应用及SCF、LIF、bFGF等生长因子的作用等，以期促进精原干细胞的研究。     

甲基红褪色光度法测定数量溴酸根离子

研究了盐酸介质中 ,在氯化纳的催化作用下 ,溴酸根离子氧化甲基红褪色的最佳条件 .吸收波长为 5 18nm .表观摩尔吸光系数为 7.2×10 4 L· m ol- 1 · cm- 1 ,溴酸根离子在 3.0～ 18μg/2 5 m L范围内符合比尔定律 .方法用于化学试剂中微量溴酸根的测定 ,结果令人满意 .     

浙江农业科研单位知识产权保护现状与对策建议

总结分析了浙江省农业科研单位实施知识产权保护的现状和存在的问题,提出了加强宣传、健全制度、选择优先实施领域、建立激励机制和注重产权保护、信息收集、人才培养、国际交流等11项实施知识产权战略,推进农业科技自主创新的对策措施.     

隐喻能力与词汇习得的关联性刍议

隐喻是人类理解与把握世界的认知方式。隐喻能力的熟练掌握是学习者学习词汇的重要标志。隐喻能力与词汇习得彼此之间是相互制约、相互促进的。隐喻能力越强，词汇的习得就越容易；反之，词汇的习得就越困难。     

保健-激励理论对涉农政策的启示

在以人为本的科学发展观的理论前提下,将保健-激励理论应用于"三农"研究.该理论对政府农业经济管理的基本启示是:要调动和维持农民的积极性,首先要注意保健因素,以防止农民不满情绪的产生;同时也要利用激励因素去激发农民的劳动热忱,从而创造出农村经济繁荣的大好局面.针对农民生活和农业生产,笔者认为保健因素包括农耕条件、家庭生活水平、人际关系、社会治安、社会保障;激励因素包括农业大政方针、家庭收入、成就和培训,并针对每一因素,给出了相应的政策启示.