家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化

从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2～ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0～ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m g左右     

大肠杆菌新型菌毛(F1987)的基因定位

对动物产肠毒素性大肠杆菌 (ETEC)的一种新型菌毛 (F1987)进行了相应基因的定位研究 ,通过对表达该新型菌毛 (F1987)相应 ETEC菌株的培养、质粒提取、对大肠杆菌受体菌株 DH5α的转化及阳性转化子筛选与相应菌毛表达的检定等 ,初步表明该新型菌毛 (F1987)的基因定位于质粒上     

一起未经检疫调运牲畜引发疫情的调查处理

1案情2003年3月23日锡盟正镶白旗改良站从通辽市科左后旗查金台牧场购入26头西门塔尔牛 (其中3头种公牛 ) ,用汽车从科尔沁区运抵锡盟正镶白旗羊场 ,并与2002年11月从通辽科左后旗查金台牧场购入的10头牛混群饲养。24日下午起 ,新购进牛陆续发病 ,至31日病牛已达26头 (新购和原购的牛都有 ) ,旗兽医站接到疫情报告后即派兽医人员到羊场调查情况 ,并采取了相应措施。兽医人员初步诊断为某一类病 ,于是向旗、盟畜牧局和政府上报疫情。并采取病料送自治区兽医站检验诊断 ,确诊为某一类传染病。2处罚经自治区动物防疫监督检验所调查取证 ,这是一…     

猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素的研究

从五指山猪(WSZP)近交系第8～13代培育群中，先后选用21头5～10月龄青年母猪，分别于授精后25～30d采集胎儿106个，进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究。以DMEM F10(1:1)为基础培养液，按添加或不添加生长因子，将培养液分为A、B、C3种，并以STO细胞作饲养层，在38℃、5.0％CO2和湿润的气相中进行培养建系。结果获得胚胎生殖嵴细胞(EG)细胞系6个细胞株，其中1个EG细胞株传至11代、2个传至5代、1个传至4代、2个传至3代冻存。并进行了AKP染色、体外分化、冷冻-解冻复苏和嵌合体制作等鉴定研究。研究发现：不同胚龄对EG细胞建系具有一定影响，不同培养液对EG细胞建系效果不同，STO细胞饲养层的质量是建株、传代、冷冻-解冻复苏的关键因素之一。EG细胞系的初步建立，为今后筛选进入种系的EG细胞系、实施体外基因操作提供了可能。     

微卫星DNA在动物亲子鉴定中的应用及研究进展

本文概述了微卫星DNA进行亲子鉴定的基本原理与方法,将其用于亲子鉴定的优点以及研究进展,最后对未来的应用进行了展望。     

金华地区牧草引种试验研究初报

对从国外和北京引进的13个牧草品种在金衢盆地进行了栽培及品比试验。结果表明：籽粒苋、苏丹草、俄罗斯饲料菜、甜高梁等鲜草产量高；紫花苜蓿、白三叶、鲁梅克斯、欧洲菊苣、籽粒苋等牧草粗蛋白含量较高，在20％以上；冬牧70黑麦草出苗后可在严寒的冬季生长，且产量高；特早熟二倍体和意大利四倍体黑麦草生育期长，可延长黑麦草利用期1个月左右。     

庆祝中国饲料工业协会成立20周年暨第五次全国会员代表大会在北京人民大会堂隆重举行借来东风促发展回良玉同志发来贺信李蒙杨汝岱同志出席开幕式

[本刊讯]深秋的北京,天高云淡,阳光融融.11月5日,北京人民大会堂热气腾腾,喜气洋洋.由中国饲料工业协会举办的“庆祝中国饲料工业协会成立20周年暨第五次全国会员代表大会”在这里隆重召开.……     

小肽对鲤鱼免疫力的影响

选用1 80尾体质量相近、健康的成鲤作饲养试验,随机分成4组,设对照组1个,试验组3个(日粮中分别添加0 .3 %、0 .6 %、1 .0 %的小肽)。试验结束后,观察在基础日粮中添加不同量的小肽对成鲤血液生理生化指标及脏体器官的影响,以探讨小肽对鲤鱼免疫力的影响。结果表明,1 )试验组成鲤血清中的免疫球蛋白(IgM)和补体(C4)的浓度均高于对照组(P <0 .0 5) ,其中1 .0 %小肽组的IgM和C4分别为450 .81mg/L和1 7.69mg/L ,比对照组提高1 4 .6 %和95 .7%,补体(C3 )差异不显著(P >0 .0 5) ;尿素氮(BUN)含量比对照组低(P <0 .0 5) ,尤其是1 .0 %小肽组比对照组降低2 7.9%;2 )试验组成鲤的内脏比、肝体比和脾体比均比对照组提高,但差异不显著(P >0 .0 5) ,随着饵料中小肽用量的增加肾体比也逐渐提高,1 .0 %小肽组的肾体比比对照组提高56.3 %(P <0 .0 5)。     

荷斯坦奶牛隐性乳房炎与乳用特征的相关性分析

随机抽取荷斯坦奶牛 472头 (1～ 11胎 )进行奶牛隐性乳房炎的检测 ,乳用特征性状 (楞角性、尻宽、尻角度、后肢侧视、蹄角度 )的线性评定 ,以及隐性乳房炎与乳用特征的相关性分析。结果表明 :奶牛隐性乳房炎的乳区阳性率与楞角性、尻宽、尻角度、后肢侧视、蹄角度的相关系数分别为 0 1171、0 10 3 0、0 0 681、0 0 180、-0 12 65 ,其中与楞角性、尻宽分别达到显著水平 (P <0 0 5 )的正相关 ,与蹄角度达极显著 (P <0 0 1)的负相关。奶牛阳性率与楞角性、尻宽、尻角度、后肢侧视、蹄角度的相关系数分别为 0 0 967、0 0 5 61、0 0 2 82、0 0 12 7和 -0 0 670 ,其中除与楞角性为显著水平 (P <0 0 5 )的正相关 (0 0 967)外 ,其余均不显著 (P >0 0 5 )。     

不同锌源对断奶仔猪免疫和抗氧化作用的影响

选用 1 4 4头断奶仔猪 ,随机分成 4组 :一组为对照 ,饲喂添加氧化锌 1 0 0 mg/kg的日粮 ,另 3组分别饲喂添加氧化锌 30 0 0 m g/kg、蛋氨酸锌 1 0 0 m g/kg和纳米氧化锌 30 0 m g/kg的日粮 ,进行为期 5 2 d的饲养试验 ,以研究不同锌源对断奶仔猪消化和免疫功能的影响。结果表明 :高剂量氧化锌可提高血清中 Ig A的含量 5 .0 7%(P<0 .0 5 ) ,高剂量氧化锌和纳米氧化锌可使血清中免疫球蛋白 Ig M含量分别提高 2 .97%(P<0 .0 5 )和 5 .6 7%(P<0 .0 1 ) ;蛋氨酸锌可使血清中SOD活性比对照组提高 1 .36倍 (P<0 .0 1 ) ,高剂量氧化锌和蛋氨酸锌可分别使肝脏中 SOD活性提高 2 8.2 0 %(P<0 .0 5 )和 2 9.33%(P<0 .0 5 ) ;高剂量氧化锌、蛋氨酸锌和纳米氧化锌均可提高肝脏组织中金属硫蛋白 (MT)含量