罗非鱼源无乳链球菌ZQ0910转录调控因子rovS基因的克隆及表达研究

为了对罗非鱼源无乳链球菌ZQ0910株毒力相关转录调控因子rovS进行克隆及表达研究,实验根据GenBank上登录的相关基因设计引物,采用PCR方法扩增该株细菌的rovS基因,然后将该基因定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果显示,该基因有849个碱基,编码282个氨基酸;同源基因序列比对显示,无乳链球菌ZQ0910株与无乳链球菌2603 V与ATCC13813的rovS基因的同源性最高;经IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为34 ku;用亲和层析后的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,经ELISA检测效价达到1∶512000.研究结果表明,实验成功克隆与表达了rovS基因,为深入探讨RovS调节因子在调节细菌的代谢、生长和毒力等多种生命活动中的作用提供了理论依据.     

鱼诺卡氏菌培养条件及培养基的优化

对鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolea)ZJ0503的增菌培养基和生长条件进行优化。研究了温度、盐度、初始pH对鱼诺卡氏菌生长的影响,并通过单因素试验对培养基的碳源、氮源和无机盐成分进行了筛选,采用正交试验法对培养基各主要成分的添加量进行了优化。结果表明,鱼诺卡氏菌最适宜生长条件为温度25℃、盐度5、pH 6.5±0.2;经筛选,鱼诺卡氏菌培养基中最佳碳源是葡萄糖,最佳氮源是酵母粉,促生长作用最强的2种无机盐是磷酸氢二钾(K2HPO4)和氯化钙(CaCl2);确立了培养基优化配方为葡萄糖20 g·L-1,酵母粉15 g·L-1,K2HPO40.75 g·L-1,CaCl20.2 g·L-1(单独灭菌),氯化钠(NaCl)5 g·L-1,pH 6.5±0.2。     

家蝇幼虫血淋巴粗提物的抑菌活性分析

试验对家蝇幼虫血淋巴的抑菌活性进行了测定。结果显示,家蝇幼虫血淋巴对革兰阴性菌大肠杆菌、沙门菌和革兰阳性菌金黄色葡萄球菌均有抑杀作用,对于革兰阴性菌的抑杀作用大于革兰阳性菌,0.8mg/mL的血淋巴粗提物可达到约50%的抑杀率。     

复方中草药对杂色鲍幼鲍血淋巴中几种酶活力的影响

将12种中草药按其不同的药理作用和药效进行配伍,形成5组复方中草药,分别编号为中草药1～5号。将以上中草药添加到杂色鲍幼鲍的人工配合饲料中,连续喂饲幼鲍,饲养47d后,测定幼鲍无细胞血淋巴中超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶茵酶(LSZ)活力。结果显示,所有添加中草药的sOD活力均比对照组降低,中草药1、5号可提高幼鲍血淋巴的ACP和LSZ活力,而对AKP则起到降低的作用;中草药3、4号可提高幼鲍血淋巴的LSZ活力,却降低幼鲍血淋巴的ACP和AKP活力,中草药2号对ACP、AKP和LSZ活力均有提高作用,具有较突出的促进杂色鲍幼鲍免疫酶活力的功能。     

慕课时代水产动物疾病学教学改革

分析了水产动物疾病学教学中存在的问题,以提高教学效果和培养综合素质高的人才为理念,围绕教师、学生、教学内容、教学方式、实验和实践等方面进行了教学改革探讨,旨在与时俱进地顺应社会需求,提升水产学的人才培养质量。     

野生和人工养殖胭脂鱼肌肉营养成分的比较

对野生(体重(447.5±20.5)g)及人工养殖((484.3±19.6)g)的胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)肌肉营养成分进行了分析比较.结果表明:野生胭脂鱼肌肉中水分、粗灰分、粗蛋白含量均显著高于人工养殖胭脂鱼(P＜0.05),而含肉率和粗脂肪含量却显著低于人工养殖胭脂鱼(P＜0.05).野...     

十二烷基苯磺酸钠对奥尼罗非鱼免疫毒性的研究

用5种浓度的十二烷基苯磺酸钠（sodium dodeeyl benzene sulfonic，SDBS）浸泡刺激奥尼罗非鱼（Tilapianilotica♀×raurea♂）8周，每2周采血样1次，测定免疫指标。0．05和0．10mg·L^-1组对奥尼罗非鱼的氯化硝基四氮唑兰（nitro blue tetrazolium，NBT）阳性细胞和IgM含量无影响。0．40mg·L^-1组在第8周时，IgM含量显著下降，而NBT阳性细胞突然急剧下降，与对照组相比差异极显著。0．70mg·L^-1组从第4周起，NBT阳性细胞和IgM含量开始减少，第6周时差异显著。1．00mg·L^-1组NBT阳性细胞数在第2周时量就已经有减少，但与对照组相比差异不显著，到第4周时差异极其显著；在第4周时IgM含量有显著差异，第6周后差异极显著。攻毒试验表明，0．40、0．70和1．00mg·L^-1组的死亡率均高于对照组。以上结果表明，当SDBS浓度大于0．40mg·L^-1时，奥尼罗非鱼免疫功能不同程度受到抑制，对NBT阳性细胞和IgM的影响存在着时间与剂量效应。     

长江流域棉区几种立体高效种植模式

在市场经济条件下,单一的种植模式难以实现棉田的高产高效.为提高复种指数,增加植棉效益,近年出现了多种立体种植模式.现将在长江流域棉区的立体多熟的7种种植模式介绍如下:     

红笛鲷SR-BI基因的原核表达及条件优化

根据GenBank上登录的红笛鲷SR-BI基因设计引物,采用RT-PCR方法扩增该基因胞外段序列,然后将该基因胞外段序列定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,将重组质粒转入大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达,并对重组表达菌株的表达条件进行优化.结果显示,成功构建了原核表达载体pET28a-SR-BI,并能在大肠杆菌BL21中表达,表达的融合蛋白分子量为50.0ku.融合蛋白的最佳诱导表达温度、IPTG浓度和时间分别为16℃、0.05mmol/L和8h.研究结果为进一步研究SR-BI的功能奠定了基础.     

卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)热休克蛋白HSP30基因的克隆与组织表达

[目的]获得卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)HSP30基因并探讨其组织表达.[方法]采用RACE的方法从卵形鲳鲹脾组织克隆HSP30基因的cDNA全序列,并用荧光定量PCR分析在健康鱼及哈维氏弧菌感染后HSP30基因的组织表达.[结果]HSP30基因cDNA序列全长913 bp,包含5′非编码区(5′UTR)89 bp、3′非编码区(3′UTR)188 bp,开放阅读框(ORF)636 bp,编码211个氨基酸.预测其氨基酸序列成熟肽的蛋白分子质量为24.1 kD,理论等电点为5.62.HSP30包括N-末端序列(NTS)、α-晶状体蛋白结构域(ACD)、C-末端序列(CTS)和C-末端延伸(CTE).系统进化分析结果显示卵形鲳鲹HSP30与高体鰤(Seriola dumerili)HSP30聚为一支.卵形鲳鲹HSP30基因在各组织中均有不同程度的表达,其中肝组织中表达量最高,其次为皮肤、肌肉、脾、心、肾,其他组织的表达量较低.哈维弧菌侵染卵形鲳鲹后,肝、脾和肾组织中HSP30基因mRNA表达量均升高,肝组织中变化最显著.[结论]成功克隆了卵形鲳鲹HSP30基因,为进一步揭示卵形鲳鲹HSP30的抗菌免疫应答机制提供了理论依据.