甜菜夜蛾优良球孢白僵菌菌株的筛选

测定初筛获得的6个球孢白僵菌菌株的毒力、产孢量、萌发率、胞外蛋白酶活性及菌株生长速度等多个生物、生态学指标,从专业角度构建最优序列,经灰色分析和不同菌株毒力效价显著性比较,筛选出了两株具有较大生产潜力的优良菌株BD-B015和BD-B038,对甜菜夜蛾的校正死亡率分别为88.33%和86.70%,僵虫率分别为86.67%和85.27%。     

美国白蛾氨肽酶N的基因克隆表达及与苏云金杆菌3种毒素蛋白的结合特性分析

美国白蛾(Hyphantria cunea)是桑树的重要害虫。为明确苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白对该虫的作用机制,利用已知昆虫氨肽酶N基因序列设计引物,以美国白蛾中肠cDNA为模板,利用RACE-PCR技术获得美国白蛾中肠氨肽酶N基因hcapn1全长序列(GenBank登录号:KP053647)。该基因开放阅读框为3 000 bp,编码999个氨基酸,预测蛋白质的分子质量和等电点分别为113.14 kD和4.85。设计去信号肽引物PCR扩增获得hcapn1基因序列,构建原核重组表达载体pET30a-hcapn1,诱导表达的HcAPN1重组蛋白约110 kD。将苏云金杆菌Cry1Ac、Cry2Ab33和Cry9Ea6原毒素经胰蛋白酶消化后与HcAPN1重组蛋白分别进行体外配体印迹试验,发现HcAPN1重组蛋白与Cry9Ea6结合,而不与Cry2Ab33、Cry1Ac发生特异结合,推测HcAPN1可能为Cry9Ea6在美国白蛾中肠的受体蛋白。分别设计引物扩增HcAPN1蛋白2个结构域Asp₃₄～Asp_( 527)和Leu₅₆₃～Gln₉₂₅的编码序列,在大肠埃希菌中表达获得62 kD和48 kD 2种重组蛋白,体外结合试验显示Cry9Ea6与HcAPN1的结合发生在Leu₅₆₃～Gln₉₂₅之间。研究结果为深入理解苏云金杆菌Cry9Ea6蛋白对美国白蛾的杀虫机制提供了基础数据。     

紫玉兰的组织培养

以成年紫玉兰带芽茎段为外植体,采用不同种类的基本培养基和激素配比对紫玉兰组培技术进行了研究,培育出了紫玉兰组培苗.适宜紫玉兰增殖的培养基为:MS+NAA 0.1 mg/L+BA 1 mg/L;采用二步生根法,将继代无菌苗接入MS+NAA 2 mg/L+BA 0.1 mg/L培养基暗培养20 d后,转入不加任何激素的1/2MS培养基中,15 d左右可出根.     

昆虫学实践教学昆虫标本建设探索

结合专业特点,积极改进昆虫标本的制作和保存方法,并将活体标本引入实验教学中,探索了构建适合昆虫学实践教学的新体系。     

秸秆还田土壤中高效纤维素分解菌的筛选及其特性

采用纤维素-刚果红染色法,从河北省山前平原秸秆还田土壤中分离筛选出3株高效纤维索菌(B1、B2、B3),并进一步研究了其显微特性和酶活性.结果表明,B1、B2为芽孢杆菌,B3为无芽孢杆菌.培养12h时B1和B3菌株的CMC酶活力接近峰值,分别为31.2、24.4U;培养18h时B2菌株的CMC酶活力最高,为36.3U.培养12h时B1菌株的FPA酶活力达高峰,为34.1U;培养8h时B2、B3菌株的FPA酶活力最大,分别为39.2、163.6U.     

苏云金杆菌与高效氯氰菊酯对美国白蛾的协同作用

为了明确苏云金杆菌 Bacillus thuringiensis (Bt)和高效氯氰菊酯的协同作用,采用Bt预处理及直接混用2种方式施药,室内饲毒法测定了2种药剂对美国白蛾 Hyphantria cunea (Drury) 2龄幼虫的活性,同时研究了高效氯氰菊酯对Bt生长曲线的影响。结果表明:试虫先用每mL含1×106个孢子的Bt S19菌悬液预处理,1 d后再用系列浓度的高效氯氰菊酯处理,其48 h的LC50值为0.76 mg/L,而未经预处理,仅用高效氯氰菊酯处理48 h的LC50值为1.28 mg/L;2种处理在高效氯氰菊酯质量浓度为2.25 mg/L时对试虫的半致死时间(LT50值)分别为9.2 h和34.7 h,两者间增效作用明显。对于直接混用,采用1×106个/mL的Bt S19与6 mg /L的高效氯氰菊酯混剂处理,增效作用明显,72 h的共毒系数为122.5,此后再增加高效氯氰菊酯的浓度则表现出轻微的拮抗作用。高效氯氰菊酯处理可使Bt生长对数期延迟,且浓度越高影响越大,说明高效氯氰菊酯可影响Bt芽孢萌发,使菌体增殖延迟。研究表明,先用Bt预处理后再使用高效氯氰菊酯对美国白蛾的作用效果优于二者直接混用。     

防止欧洲七叶树组织培养中外植体褐变研究

外植体发生褐变现象是欧洲七叶树组织培养过程中的主要障碍。以侧芽为实验材料作不同处理,探讨其控制褐变的有效程度。结果表明:培养基添加琼脂8g/L,选择1/2MS为基本培养基,接种前用4%PVP处理外植体,在培养基中添加2000mg/L的PVP可有效抑制褐变的发生。黑暗培养不能减轻外植体褐变。     

胶质芽孢杆菌菌剂对四种蔬菜种子发芽及幼苗生长的影响

以胶质芽孢杆菌菌剂为研究对象,研究了其对黄瓜、番茄、茄子及辣椒4种蔬菜种子发芽率及幼苗生长的影响。结果表明:该菌剂处理的黄瓜、番茄、茄子和辣椒种子发芽率均高于对照组,依次是对照的1.10、1.10、1.07、1.07倍;处理组幼苗根长分别比对照增加3.76%、32.82%、1.50%和15.70%;处理组幼苗干质量分别比对照增加36.36%、-12.82%、3.13%、16.67%,G值、根冠比与对照无显著差异。综上所述,胶质芽孢杆菌菌剂能够提高4种蔬菜种子的发芽率,但对蔬菜幼苗根生长的影响因蔬菜种类不同而异。     

两种杀菌剂与胶质芽孢杆菌对番茄发芽及生长的影响

为明确杀菌剂甲霜灵和恶霉灵与胶质类芽孢杆菌对番茄种子发芽及幼苗生长的影响,通过平板对峙试验、种子发芽试验、穴盘试验研究了3种材料对番茄种子发芽及幼苗生长的影响效果。结果表明:甲霜灵和恶霉灵对胶质芽孢杆菌生长无不良影响;胶质芽孢杆菌浓度为1.63×105 cfu·mL~(-1)时,处理番茄种子发芽率为75.2%,高于对照7.14%;当甲霜灵药液浓度为100.0、50.0、25.0、12.5mg·mL~(-1)时对番茄种子发芽率均有促进作用,浓度为100mg·mL~(-1)时发芽率最高为62.5%;恶霉灵在推荐浓度下对番茄种子发芽率有抑制作用;胶质芽孢杆菌、甲霜灵+恶霉灵、胶质芽孢杆菌+甲霜灵+恶霉灵混合液处理番茄幼苗根长分别高于对照3.88%、4.87%、11.56%,株高分别高于对照1.27%、3.80%、7.13%,地上部干质量分别是对照的2.3、1.3、3.5倍。说明胶质芽孢杆菌、甲霜灵对番茄种子发芽势具有促进作用,胶质芽孢杆菌、甲霜灵与恶霉灵3种混用对番茄根的发育有抑制作用。     

一株对马铃薯瓢虫幼虫具有高活性的苏云金杆菌新菌株

从河北省土壤中分离了一株苏云金杆菌WZ 9,通过对其生物学特性和杀虫活性的研究发现,该菌株对马铃薯瓢虫幼虫具有特异性高效杀虫活性,LC50为2.95×107细胞/mL;而对鳞翅目的菜青虫、棉铃虫、玉米螟、甜菜夜蛾、黄粉虫等几种重要害虫均无效。