Constitutive Expression of α-galactosidase Mel1 Gene in Pichia pastoris

用PCR方法从酵母(Saccharomyces cerevisiae ) AH109中扩增出α-半乳糖苷酶的Mel1基因，将其克隆至整合型载体pGAPZαA中构建成组成型分泌表达酶产物的重组质粒pGAPZα-Mel1。将线性化的重组质粒pGAPZα-Mel1电击转化至毕赤酵母(Pichia pastoris ) KM71，在含有100 mg/mL zeocin和预先涂布有X-α-gal的YPDS平板上选择蓝色阳性菌落。发酵培养酵母的上清经SDS-PAGE分析，在53 kD处有特异带；经非变性PAGE凝胶电泳，与显色底物的反应，检测到α-半乳糖苷酶活性带。重组菌pGAPZα-Mel1 /KM71摇瓶发酵6 d后，培养液α-半乳糖苷酶粗酶活性为12 U/mL。     

人工饲养棘胸蛙蝌蚪变态发育的研究

棘胸蛙从人工孵化到变态需80～90d，变态后体长、体重均较变态前有所减少，变态期间摄食减少，动物性饵料能加速蝌蚪的变态发育，植物性饵料则能延缓蝌蚪的变态。     

高温对产蛋鸡的血液生化反应

应用化学和放射免疫分析法,试验研究了420—450日龄星杂579母鸡在高温环境下血液生化指标及某些内分泌激素的变化。结果表明在高温时,血清肌酸磷酸激酶的活性、血钠和血浆醛固酮的含量分别升高220.1 ％、18.6％和46.1％,而血糖、血脂、总蛋白、血钙、血浆皮质醇和雌二醇的含量分别降低60％、41.9％、24.8％、40.2％、27.7％和63.5％。提示了热应激对鸡体的物质代谢和水盐代谢的影响很大,而且气温越高对鸡体的危害越大。     

草鱼肠道组织差异表达基因消减文库的构建

以致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)人工感染的1龄草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道组织为材料,应用抑制性差减杂交技术,构建了肠道组织的消减cDNA文库.以草鱼管家基因β-actin作为差减指标检测文库差减效率达2~(10)倍,表明感染细菌后某些差异表达基因得到了相应倍数的富集.将获得的cDNA片段连接到A/T载体,并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞.     

转Hu-IFN-a基因草鱼的雌核发育及生理转雄性研究

为快速获得转Hu-IFN-a基因抗病草鱼纯系,从转Hu-IFN-a基因草鱼中,挑选9尾高表达水平的雌鱼作为亲本,经人工雌核发育,得到子一代水花89尾,与普通草鱼的雌核发育结果相比,两者孵化率差异不显著,但畸形率前者比后者高.从雌核发育子一代鱼苗中随机选取45尾鱼苗投喂含甲基睾丸素的饲料,进行生理转雄性试验,获得生理转雄性鱼苗21尾.     

天然产物活性成分提取分离研究进展

从动物、植物、微生物体内分离得到的某些天然成分,具有结构的多样性和生物活性的多样性,在新药和药物先导化合物的开发中起着重要作用。传统分离技术分离效率低而成本高,新技术的出现将有效改善这一不利局面。为给天然产物活性成分的开发应用提供参考依据,综述了近年来国内外天然产物活性成分提取分离技术的研究进展,并对天然产物活性成分提取分离中存在的问题进行了探讨,还对天然产物活性成分的利用前景进行了展望。     

量子点在植物分子荧光标记中的应用

半导体量子点具有独特的荧光性能,其研究内容涉及物理、化学、材料、生物等多学科,已成为多学科交叉研究的一个亮点.在植物学研究领域,量子点作为一种新型的荧光探针已逐渐显现了它的优势,可以取代传统有机荧光法.成为细胞和分子荧光标记的更理想选择.在阐述量子点的特性、制备方法及生物功能化修饰的基础上,系统综述量子点在植物分子荧光标记中的应用,并对量子点在植物细胞和分子生物学中的发展趋势和应用前景进行展望.     

樟树叶化学成分的GC/MS分析

樟树为亚热带地区重要的材用和特种经济树种,在我国大面积栽培。樟树叶是可再生的生物资源,但具有高附加值开发潜力的化学组分还未被深入研究,阻碍了樟树的综合开发利用。首次采用GC/MS联用技术研究樟树叶的高品位综合利用前景及途径。新鲜樟树叶经微波干燥除水,粉碎后于苯/醇溶液中进行提取处理,提取物滤液经浓缩后,取0.2μL样品进行GC/MS联机分析,采用色谱峰面积归一化法计算各组分的相对含量。分析结果表明,樟树叶的苯/醇提取物中富含名贵生物医药、名贵香料、以及大宗化工成分,首次发现樟树叶中富含总含量达13.06%的烯类物质,具有很好的高品位综合开发利用前景。