2010—2011年广西狂犬病监测及免疫效果分析

为了解当前广西家犬狂犬病流行情况,评价防控效果,采集免疫过狂犬病疫苗的犬血清2 972份进行抗体检测。结果:抗体阳性的有2 620份,阳性率为88.16%。另外,采集交易市场或屠宰场表观健康犬的脑组织样品800份,疑似发病犬脑组织样品25份,分别通过RT-PCR方法和小鼠接种试验检测狂犬病病原,结果表观健康犬有11份样品呈阳性,阳性率1.38%,疑似狂犬病犬有5份样品呈阳性,阳性率20%。实施狂犬病疫苗免疫后,广西家犬总体免疫抗体水平良好,表观健康犬携带狂犬病病毒比率显著降低。提示应继续加强农村犬的免疫和管理,有效降低狂犬病的发生。     

鸭痘病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

为建立检测鸭痘病毒的TaqMan荧光定量PCR方法,本试验克隆了鸭痘病毒P4b基因,构建重组质粒pMD-DPV-P4b,并将其作为标准阳性模板。参照GenBank收录的禽痘病毒P4b基因设计合成1对特异性引物及与该引物相匹配的特异探针。以定量的10倍系列稀释的质粒pMD-DPV-P4b为标准品,通过对反应条件进行优化,建立了一种检测鸭痘病毒的TaqMan荧光定量PCR方法。结果显示,该方法与禽流感病毒、鸭黄病毒、鸭肝炎病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒和小鹅瘟病毒等其他水禽病毒,以及山羊痘病毒和鸡痘病毒等其他痘病毒均无交叉反应,特异性好。该方法最低检测限为1.29×10²拷贝/μL,比普通PCR检测方法高100倍。组内和组间变异系数均小于2%。结果表明,本试验所建立方法具有灵敏、特异、安全、快速的特点,适用于鸭痘病毒的检测。     

超高效液相色谱-质谱法同时检测龟鹿补肾丸中龟甲胶、鹿角胶成分

建立检测龟鹿补肾丸中龟甲胶、鹿角胶成分的超高效液相色谱-质谱方法。恒温酶解样品中的胶类特征性肽段，采用超高效液相色谱-质谱识别技术分别对龟甲胶和鹿角胶进行鉴别，ESI+电离模式进行多响应监测。结果表明，本方法重复性好，精密度和稳定性考察RSD均小于6.0%，龟甲胶及鹿角胶检出限分别为0.02 mg/mL和0.01 mg/mL。用建立的检测方法测定6批次龟鹿补肾丸样品，均检测出了龟甲胶及鹿角胶特征性成分。说明该方法简便准确，灵敏度高，适用性强，可为龟鹿补肾丸中胶类成分的质量管控提供依据。