黄瓜倍性材料创制及染色体组成的FISH鉴定

【目的】黄瓜（Cucumis sativus L.）遗传基础狭窄,种质资源多样性较为有限,遗传育种研究相对落后。本试验旨在创制整倍体和非整倍体黄瓜种质材料,建立其准确的染色体组成鉴定方法,为进一步选育黄瓜各种染色体系、目标性状的染色体定位及遗传育种研究奠定基础。【方法】以华北生态型黄瓜‘长春密刺’的高代自交系为材料,0.4％秋水仙素溶液处理萌动种子,诱导染色体数目加倍。为获得同源三倍体材料,以诱导获得的同源四倍体为母本,二倍体为父本进行杂交,授粉35-45 d后采收成熟果实进行胚拯救。采用染色体计数,结合形态学、叶片气孔电镜观察,对诱导株及杂交后代的倍性进行鉴定。利用染色体特异的探针进行荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）,通过观察特异探针在染色体上杂交信号的数目、强弱及位置,结合黄瓜的染色体形态参数,对诱导株的染色体组成进行鉴定。【结果】对经秋水仙素处理的‘长春密刺’材料进行有丝分裂中期染色体计数观察,结果显示诱导获得8株四倍体（2n=28）,3株非整倍体（2n=16,19,27）材料。将四倍体与二倍体杂交获得了三倍体材料（2n=21）。经荧光原位杂交分析,根据黄瓜着丝粒探针Type III和核糖体45S rDNA两类信号在染色体上的信号特征可以看出,与二倍体相比,三倍体与四倍体上杂交信号为倍性变化关系,进一步验证创制出的整倍性材料为三倍体与四倍体。不同倍性‘长春密刺’植株的形态学特征存在一定差异,四倍体植株的形态指标与二倍体差异显著;三倍体植株与二倍体在形态学上差异不显著;非整倍体植株与二倍体在形态学上差异也不显著,但其长势较二倍体弱,且花期推迟,雌雄花花期不遇,坐果率明显低于二倍体。经叶片气孔电镜观察,‘长春密刺’二倍体、三倍体与四倍体植株叶片气孔的大小与密度均存在差异,随着倍性提高,气孔的长度和宽度增加,而气孔密度则下降,说明形态学筛选和叶片气孔电镜观察可以作为鉴定黄瓜倍性的辅助方法。以上述两类黄瓜重复序列（Type III和45S rDNA）和染色体特异的单拷贝基因Csa006700为探针,对染色体数目为16的一株非整倍体诱导株进行染色体组成鉴定。重复序列的荧光原位杂交结果显示,额外的两条染色体为1号或2号染色体。进一步利用黄瓜2号染色体端部的基因Csa006700探针检测,发现该基因只在其中一对染色体上有信号,由此明确该材料为附加两条1号染色体的四体材料（2n=14+2）。研究表明秋水仙素不仅可直接诱导出同源多倍体,同时可诱导各种非整倍体植株。【结论】利用秋水仙素处理黄瓜萌动种子,诱导染色体倍性的变化,结合染色体特异探针的荧光原位杂交鉴定,可快速创制并筛选出各种染色体组成的特异新种质。     

最具发展潜力的晚熟梨--晚秀

20世纪90年代中后期在全国各梨产区掀起了"水晶梨"热,由此带动了日韩梨品种的大量引进和发展,尤其以褐皮品种倍受国际国内市场的青睐,价格一路攀升,果农纷纷大面积栽植和改接.由于引进、发展的多数是中早熟品种如黄金梨、圆黄梨等,不耐贮藏,货架期短,且与其它果品同时上市,经济效益并不好.2001年第三届烟台世博会时,我市引进晚熟梨新品种"晚秀"接穗,高接在冀州市大寨村10年生鸭梨树上,计2.66 hm2,平均每株改接40个头.第2年产量达1 000kg/666.7m2,纯收入5 000元;第3年产量3000 kg/666.7 m2,纯收入1.2万元.其效益是当地主栽品种鸭梨的4倍.     

老山楂园丰产栽培技术

山楂(C.Pinnatifida Bge.)是我国特有的温带落叶果树,在20世纪70年代及80年代前期在辽宁省曾大面积发展.铁岭市是辽宁省的几个重要产区之一.但在80年代后期及90年代初,由于销售渠道及加工能力有限而出现供大于求的局面,从而导致山楂价格下降,许多地区出现毁园刨树,或放任不管.近年来由于山楂供应量减少及加工能力提高,价格又有所回升.为了发掘现有山楂资源,增加农民收入,我们从1998年开始对放任多年的成龄低产山楂园进行改造试验,效益可观,现总结如下.     

蟹田稻病虫发生特点及防治技术

蟹田稻由于播种、移栽期、栽培方式、水肥管理、生态环境等与常规稻相差较大,病虫发生以条纹叶枯病、三化螟较重,其他病虫均轻于常规稻。根据2a试验,提出了秧田期狠压病虫基数,中、后期主攻纹枯病、三化螟和稻飞虱的策略,并提出相应的施药时间和方法。     

巨峰葡萄测土配方施肥研究

测土配方施肥在大田作物和蔬菜上应用较多,技术也较完善,但在葡萄上应用较少。葡萄栽培方式不同于大田作物和蔬菜,土壤利用系数不合理使得测土配方施肥的有些理论指标需要修正。对于葡萄土壤利用系数研究在国内外尚未见有报道,本研究确定了葡萄测土配方施肥土壤利用系数并进行验证,为科学施肥提供理论依据。     

公猪精液PRRSV变异株检测及NSP2、ORF5基因序列分析

用荧光RT-PCR方法从某猪场精液中检测到猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)变异株(NSP2 1 594～1 680 bp缺失)核酸阳性.提取1份阳性样品病毒核酸测定和分析其NSP2和OBF5全基因序列,结果表明NSP2基因由950个氨基酸组成,与CH-1a、VR-2332等经典PRRSV相比481位缺失1个氨基酸、532～560位连续缺失29个氨基酸,与JXA1、HUN4等毒株具有相同的缺失特性;ORF5基因第13、151位为具有强毒特性的精氨酸(R),存在4个潜在的糖基化位点,分别位于30～32、35～37、44～46和51～53位氨基酸.遗传进化分析表明,测定序列与JX-A1、HUN4等毒株关系最近,与CH-1a、NVSL等同属一个大分支,而与BJ-4、P129、RespPRRS MLV、VR-2332等处于不同分支.研究证实公猪精液可携带PRRSV变异株,因此猪场(群)在人工授精和引进精液时必须强化检疫和生物安全措施.     

凸轮轴载荷谱研究

本文介绍了载荷谱的基本理论,通过AVL tycoon软件建立发动机配气机构一维动力学仿真模型,对凸轮轴进行一维动力学仿真,并基于计算结果利用ncode designlife软件建立疲劳分析历程图完成栽荷谱的编制.     

不同浓度的NaCl溶液对虹鳟精子活力的影响

为了延长虹鳟精子快速运动的时间和寿命,提高人工繁殖过程中的受精率,通过显微镜观察精子的快速运动时间和寿命,研究了不同NaCl浓度的变化对3、4龄虹鳟精子的活力的影响。结果表明：随着NaCl浓度的增加,4龄虹鳟精子激烈运动时间与寿命都逐渐减少,3龄虹鳟精子激烈运动时间与寿命都呈现抛物线状分布,且NaCl浓度在0.8%时精子激烈运动时间与寿命都达到最长,分别为(25.20±3.04) s、(75.91±9.87) s。在低于0.2%浓度的氯化钠溶液中,4龄虹鳟精子激烈运动时间与寿命都明显高于3龄虹鳟精子。     

黄瓜-酸黄瓜染色体片段导入系群体的构建及果实相关数量性状基因的定位

【目的】以栽培黄瓜（Cucumis sativus L. , 2n = 14)‘北京截头’为受体亲本,以野生酸黄瓜( C. hystrix Chakr, 2n = 24）为供体亲本,采用SSR标记辅助选择法构建黄瓜-酸黄瓜染色体片段导入系群体。初步定位控制黄瓜果实外形的数量性状基因。【方法】首先通过种间杂交-回交-自交获得大量的染色体片段导入系株系。然后选择均匀分布在黄瓜染色体组上的298对SSR标记对亲本进行多态性检测,使用检测出的亲本间差异引物对染色体片段导入系株系进行检测,筛选含有野生酸黄瓜染色体片段的植株。对该群体果实外形进行初步调查,利用t测验与轮回亲本比较,鉴定QTL。【结果】本研究构建了由50个株系组成的染色体片段导入系群体。在该群体中共检测到149个染色体导入片段,包含61个不同的导入片段,不同导入片段的总长度为259.95 cM,基因组覆盖率为45.37%。导入片段的长度在1.65-15.4 cM,平均长度为5.41 cM,分布于黄瓜的7条染色体上。利用该导入系群体初步定位了控制黄瓜果型的13个QTL。【结论】构建了一套以栽培黄瓜为背景,野生酸黄瓜为前景的染色体片段导入系群体,并利用该导入系初步定位了控制黄瓜果型的QTL,为开发利用野生酸黄瓜的优良基因提供了新的种质资源,也为今后定位黄瓜的数量性状遗传位点奠定了材料基础。     

白斑狗鱼工厂化养殖试验

白斑狗鱼（Esox lucius）隶属鲑形目,狗鱼亚目,狗鱼科,狗鱼属。在新疆阿勒泰地区俗称狗鱼。白斑狗鱼自然分布于亚洲、欧洲以及北美北部的冷水水域。我国仅产于新疆额尔齐斯河流域。白斑狗鱼喜栖于有支流的河道中,通常生活于水草丛生的沿岸地带,