发酵乳杆菌对LTA诱导的牛子宫内膜细胞炎性损伤干预作用的研究

旨在研究发酵乳杆菌能否通过抑制NF-kB信号通路的激活,调控下游炎性细胞因子,进而对脂磷壁酸(LTA)所诱导的牛子宫内膜细胞(BEND)炎性损伤发挥保护作用,并通过体外试验对其作用机制进一步研究,为解决牛子宫内膜炎的治疗难题提供方向。以牛子宫内膜细胞为研究对象,LTA和发酵乳杆菌分别作为毒药与解药来建立体外细胞试验模型,测定细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的分泌量和炎性相关基因TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、TLR2、MyD88、NF-kB p65 mRNA的表达量。结果表明:LTA组、LTA+Lf组、Lf组炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的蛋白表达水平均高于对照组。LTA组与对照组比较差异极显著(p0.01);Lf组与对照组比较,TNF-α、IL-6细胞因子差异不显著(p0.05),IL-1β、IL-8细胞因子差异显著(p0.05);LTA+Lf组与LTA组比较,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的蛋白表达量显著降低(p0.05)。LTA组、LTA+Lf组、Lf组的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、TLR2、MyD88、NF-kB p65基因mRNA的表达量均高于对照组。LTA组与对照组相比,7种基因m RNA的表达量极显著增加(p0.01);Lf组与对照组相比,TNF-α、IL-6基因mRNA的表达量增加不显著(p0.05),IL-8基因mRNA的表达量增加显著(p0.05),IL-1β、TLR2、MyD88、NF-kB p65基因mRNA的表达量极显著增加(p0.01);LTA+Lf组与LTA组相比,7种基因mRNA的表达量均极显著降低(p0.01)。发酵乳杆菌能够抑制NF-kB信号传导通路,调控炎性细胞因子的表达与释放,抑制炎性反应的发生,缓解LTA的细胞毒性,对LTA诱导的牛子宫内膜细胞炎性损伤起干预作用。     

牛HSF1和HSBP1基因多态性分析

利用DNA测序技术对牛HSF1和HSBP1进行SNPs位点扫描,共发现4个新SNPs,包括HSF1 1451(G/T)位点、HSBP1第二内含子324(G/C)、589(C/T)和651(C/G) 位点。利用CRS-PCR和PCR-RFLP技术对867头荷斯坦牛、85头鲁西黄牛和28头渤海黑牛进行基因多态性分析。χ2检验表明,HSF1 1451(G/T)位点和HSBP1 589(C/T)位点在荷斯坦牛和鲁西黄牛群体中已达到Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0.05),而HSBP1 324(G/C)和651(C/G)位点的突变在荷斯坦牛群中均未达到Hardy-Weinberg平衡状态(P＜0.05)。HSF1 1451位点(G/T)AA基因型频率最高,优势等位基因为A,而HSBP1 3个SNPs频率最高的基因型分别为AB、AA和BB, 589(C/T)位点的优势等位基因为A,而324(G/C)和651(C/G)位点均为B。HSBP1 651(C/G)位点不同基因型的分布在三个牛品种中存在差异,在荷斯坦牛中AA型频率最低,而在鲁西黄牛和渤海黑牛中AA型频率最高,推测该基因型与耐热性有关。该结果将为奶牛耐热分子育种提供理论参考。     

重组牛IFN-τ的纯化及其抗病毒活性的鉴定

为测定重组牛IFN-τ(rbIFN-τ)的抗病毒活性,以含有rbIFN-τ重组表达质粒pGEX-IFN-τ的BL21(DE3)菌株为材料,使用自动诱导方法进行重组蛋白的诱导表达,表达包涵体经洗涤溶解后进行了切胶纯化,纯化蛋白透析复性后用细胞病变抑制法测定了其抗病毒活性。结果获得了纯度较高的rbIFN-τ,透析复性后其抗病毒活性为1.5×105 U/mg蛋白。这为进一步研究和应用rbIFN-τ奠定了基础。     

奶牛子宫内膜炎的诊治

子宫内膜炎（puerperal endometritis）为子宫内膜的急性炎症，是奶牛生殖疾病的常见病，发病率高达20％～40％，占不孕症的70％左右。奶牛患子宫内膜炎使受精卵不能着床或胚胎早期死亡，延长了产犊间隔，严重地影响了奶牛的繁殖力和生产性能，降低了奶牛养殖业的经济效益，阻碍了奶牛业的发展。     

犊牛腹泻病原菌的分离鉴定及敏感药物筛选

犊牛腹泻严重影响着犊牛的生长发育和成年后的生产性能,可导致奶牛业不容忽视的经济损失.为寻找大连某奶牛场犊牛腹泻的原因,在排除饲养、管理等因素条件下,对该场犊牛腹泻的粪便进行病原菌的分离、鉴定和药敏试验,以期对该奶牛场犊牛腹泻的防治有一定的指导作用.     

奶牛瓣胃阻塞的诊疗

奶牛瓣胃阻塞,又称百叶干,主要是由于前胃弛缓,瓣胃收缩力减弱,内容物充满,致使瓣胃扩张、坚硬、疼痛,发生消化性不良现象。临床上以前胃弛缓,瓣胃听诊蠕动音减弱或消失,触诊疼痛,排粪干少色暗为特征。现将本病的具体诊疗情况介绍一下。1病因1.1原发性瓣胃阻塞奶牛多因饲养粗放     

镉对鸡卵巢发育及卵巢组织ATP酶活性的影响

【研究目的】为了探讨镉对性未成熟鸡卵巢发育的毒性机制，从分子水平阐述镉中毒的发病机理，增强人类环境保护意识，避免畜、禽镉中毒的发生。【方法】在饲料中加入140mg/kgCdCl2 、210mg/kgCdCl2建立亚慢性镉中毒模型，分别在试验20d、40d、60d取卵巢称重，进行Na+-K+-ATPase，Mg2+-ATPase和Ca2+-ATPase活性检测。【结果】对照组卵巢组织内Na+-K+-ATPase，Mg2+-ATPase和Ca2+-ATPase活性随日龄增加呈上升趋势，各时间点酶活性比较差异不显著；加镉组卵巢组织内Na+-K+-ATPase，Mg2+-ATPase和Ca2+-ATPase活性随日龄增加呈降低趋势，与对照组比较差异显著或极限著，且呈一定的时间-剂量效应。【结论】镉能够抑制性未成熟鸡卵巢发育，降低卵巢组织ATPase活性，二者存在一定相关性。     

1个新的牛干扰素-τ基因的克隆与分析

[目的]克隆和分析沈阳地区黄牛中1个新的IFN-τ基因。[方法]根据NCBI上发表的的牛IFN-τ基因序列(AY665673),设计并合成1对特异性引物。从黄牛的肾脏组织中提取基因组DNA作为模板,进行PCR扩增。将扩增产物回收后,与pUCm-T载体连接并转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞。通过PCR和双酶切对获得的质粒进行鉴定后,进行测序和序列分析。[结果]经PCR扩增,获得1条约600 bp的特异性条带。牛IFN-τ基因成功重组到载体中,获得阳性克隆。序列分析结果表明,该克隆片段大小为586 bp,其在376 bp处出现了终止密码子,导致翻译终止。该片段与AY665673基因序列的核苷酸同源性为93.3%,氨基酸同源性为88.1%。[结论]该克隆片段可能为1个新的牛IFN-τ基因。     

奶牛乳房炎防治措施的研究进展

奶牛乳房炎是危害奶牛养殖的常见疾病之一。全世界约有奶牛2．2亿头,其中约有1／3的奶牛患各种类型的乳房炎。据卜仕金(1999)报道,美国每年因奶牛乳房炎造成的损失达 20亿美元。我国奶牛乳房炎的发病率还高于世界平均水平, 其中临床型乳房炎仅占乳房炎发病率的很小一部分,只有 1％-2％,而绝大部分是乳汁和乳房无明显变化的,只能从乳