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FANG Tian-ling MIN Jun DENG Xiao-geng QIAN Shi-kun CHU Zhong-hua CHEN Ya-jin SHAO Jing WEI Jing CHEN Ji-sheng 《园艺学报》2004,20(7):1167-1170
AIM: To explore a new method of hepatocyte growth factor (HGF) inducing bone marrow mesenchymal stem cells (MSC) to differentiate into cardiomyocytes. METHODS: Bone marrow MSC was cultured with DMEM media (10% fetal calf serum) 4-6 passages, and induced by HGF (10 μg/L) for 30 d. Automatical beating of the differentiated cells was observed daily with transverse microscopy, or under condition of 0.1% isoproterenol or cal-cium-deprived incubation. Specific cardiac myosin in the cells was indentified by immunochemistry. RESULTS: At 14-20 d of differentiation, bone marrow mesenchymal stem cells formed clones, in 10%-50% of which spontaneous beating cell-mass had come to continuously exist. Isoproterenol increased the beating rate and calcium-deprived media inhibited the beating. The cells were identified to be cardiomyocytes by expression of cardiac myosin heavy chain. CONCLUSION: HGF may induce bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocytes with high efficiency, but the differentiating pathway of stem cells remains to be further studied. 相似文献
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家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化 总被引:4,自引:0,他引:4
从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2~ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0~ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m g左右 相似文献
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华北农牧交错带退化草地土壤种子库动态变化 总被引:4,自引:4,他引:4
对华北农牧交错带不同退化演替阶段土壤种子库的数量和物种组成及与地上植被的关系进行了初步的研究,结果表明:农牧交错带草地在刈割和放牧等干扰下,发生逆行演替,土壤种子库中植物种类及种子数量呈递减的趋势,轻度退化类型土壤种子库物种组成最高,有23种植物,种子数量最多,有4 303粒,禾本科所占比例较大,为32.3%;而极度退化草地物种组成最低,有14种植物,种子数量仅有1 156粒,禾本科只占8.4%.草地逆行演替过程中植被与土壤种子库在物种组成上存在一定差别,中度退化阶段差别最大,有18种植物未在种子库中出现,极度退化阶段差别最小,有2种未在种子库中出现. 相似文献
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种公猪精液中猪瘟和蓝耳病病毒混合感染的快速检测 总被引:2,自引:3,他引:2
参考GenBank公布的猪蓝耳病病毒(PRRSV)VL2332株、LV株以及猪瘟兔化弱毒(CSFV)C株的基因序列,各设计合成了一对引物,建立了在相同PCR扩增条件下能同时检测PRRSV和CSFV的RT-PCR方法。对2003~2004年期间江苏、浙江、安徽、福建、上海等省市的17个大中型猪场送检的186份种公猪精液进行了检测,结果18份呈PRRSV阳性,24份呈CSFV阳性,其中有11份为PRRSV和CSFV的混合感染,约占送检精液样品的5.91%。试验结果表明,所建立的RT-PCR方法可用于精液中这2种野毒感染的快速鉴定和分子流行病学调查。 相似文献
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对 2 2 4只云岭黑山羊及其杂交羊在夏季用CIDR孕酮栓 PMSG法进行同期发情处理 ,结果表明 :①总体发情率为64 73 % ,移植率为 47 3 2 % ,其中发情羊在撤栓后 48小时内 10 0 %发情 ,同期化程度高 ;②楚雄羊 (n =44只 )、师宗羊 (n =96只 )、文山羊 (n =71只 )和杂交羊 (n =9只 ) ,发情率分别为 :5 2 2 7%、65 63 %、66 2 0 %和 10 0 0 0 % ,以杂交羊的同期发情率和移植率高于楚雄山羊 (P <0 0 1)、师宗山羊和文山山羊 (P <0 0 5 ) ,但三个地方的云岭黑山羊的发情率和移植率均无显著差异 (P >0 0 5 ) ;③ 1~ 2 5岁受体羊的发情率比 3~ 5岁羊高 17 74个百分点 (P <0 0 5 ) ,移植率高 11 0 6个百分点(P >0 0 5 ) ;④ 2 0~ 2 9kg羊的发情率分别比 3 0~ 3 9kg和 40~ 5 1kg的羊群高 19 2 3个百分点 (P <0 0 5 )和 2 6 0 1个百分点(P <0 0 1) ;移植率分别高 13 0 7和 14 83个百分点 (P >0 0 5 ) ;⑤青年羊的掉栓率显著低于经产羊 (P <0 0 5 ) ,而掉栓羊群和持栓羊群的发情率和移植率分别比较 ,差异不显著 (P >0 0 5 ) ;⑥处理羊在第 16天撤栓和第 17天撤栓的同期发情率差异不显著 (P >0 0 5 )。 相似文献
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Effects of oral administration of different dosages of carvacrol essential oils on intestinal barrier function in broilers 下载免费PDF全文
ShuDong Liu MinHo Song Won Yun JiHwan Lee ChangHee Lee WooGi Kwak NamSoo Han HyeunBum Kim JinHo Cho 《Journal of animal physiology and animal nutrition》2018,102(5):1257-1265
Essential oils are widely used in the pharmaceutical, food and cosmetic industries, and many plant essential oils have shown that they have positive effects on broilers nutrition. This experiment was conducted to study the effects of orally administered different dosages of carvacrol essential oils on intestinal barrier function in broiler chickens. A total of eighty 28‐day‐old (1.28 ± 0.15 kg) ROSS 308 broilers were randomly allocated to four groups of 20 replicates each, with one chicken per replicate per cage, and all were fed with the same diet. Four experimental groups were orally administered 0, 200, 300 or 400 μl carvacrol essential oils at 18:00 hr every day during the 2‐week experimental period. As a result of which, the gene expression of the occludin, claudin‐1, claudin‐5, ZO‐1 and ZO‐2 in intestinal mucosa of small intestine (p < 0.05) and the goblet cell content in small intestine epithelium (p < 0.05) were significantly increased; test subjects with 300 or 400 μl carvacrol essential oils reduced the microbial counts of Salmonella spp. and Escherichia coli in the intestines (p < 0.05); Essential oils administration also significantly increased activity of the sucrase (p < 0.05) and lactase (p < 0.05) in intestinal mucosa. In conclusion, the carvacrol essential oils have positive effects on growth performance and intestinal barriers function of broilers; those effects may be related to the dosage, as administration of 300 or 400 μl was more effective than that of 200 μl. 相似文献