围产期母猪的管理要点

母猪的饲养是养猪生产中的一个重要环节,母猪分娩前后的护理则是保持仔猪成活数量的关键,而每窝仔猪的成活数量对养猪的综合效益有很大的     

猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株ORF5基因在E.coli中表达的初步研究

根据已测定的猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株序列设计1对引物,应用PCR方法从重组质粒PMD-ORF5扩增得到缺失信号肽序列的基因片段dORF5,将dORF5克隆至原核表达载体PBAD/Myc-His B上,成功地构建了重组表达质粒PBAD/Myc-His B-dORF5,转化大肠埃希菌TOP10感受态细胞,经阿拉伯糖诱导表达,SDS-PAGE可检测到分子质量约为19.4 ku的目的蛋白,经蛋白质分析软件Bandscan分析,其表达量可达17.1%。Western blotting分析结果表明,该重组蛋白可被兔抗PRRSV血清所识别,这为进一步研究GP5蛋白的结构、功能和开发新型诊断试剂盒、新型疫苗提供了理论与物质基础。     

一起猪链球菌引起成年种猪急性死亡的诊治报告

2010年3月中旬,四川省某集约化养殖场有50余头种猪出现急性死亡病例,发病猪主要为成年种公猪,发病率为5%,死亡率为50%;且经统计发现,杜洛克猪发病率明显高于长白和大约克两个品种。患病猪初期体温升高达41℃～43℃，食欲废绝，站立困难。病猪均出现四肢肿大，关节、肩胛部肌肉等处出现化脓性病灶，且部分内脏器官如肝、肺等也出现脓包：全身淋巴结充血、腹股沟淋巴结肿大出血；心包积液，且有纤维素性渗出液；     

沙门菌nirB基因启动子区域分子克隆及序列分析

为了给构建含沙门菌内源性诱导启动子基因疫苗表达载体奠定物质基础,试验从活化培养的 猪霍乱沙门菌C500中提取细菌基因组DNA,运用PCR技术扩增nirB基因启动子区域,回收、纯化,将TA克隆到pUCX-T载体上,对阳性克隆进行测序和生物信息学分析.结果表明:成功扩增出nirB基因启动子区域,长约760 bp;成功构建了...     

对PRRSV快速分型的多重RT-PCR方法的建立与应用

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)欧洲株、美洲经典株与高致病性Nsp2变异株的Nsp2基因间的差异,设计3对特异性扩增引物,建立快速检测PRRSV欧洲株、美洲经典株和高致病性Nsp2变异株的多重RT-PCR方法。利用PRRSV欧洲株、经典株和高致病性Nsp2变异株及其他相关病毒株进行敏感度和特异性试验。结果显示,所建立的多重RT-PCR对欧洲株、美洲经典株与高致病性Nsp2变异株的RNA最小检出量分别为0.050 2、0.055 4、0.056 4ng,与CSFV、TGEV、JEV、SIV的核酸均无交叉反应。用该方法检测病料76份,结果PRRSV欧洲株、美洲经典株和高致病性Nsp2变异株的阳性率分别为0、7.89%和53.9%,未发现3型病毒间有混合感染的情况。检测结果与单一RT-PCR及RT-PCR检测试剂盒检测结果一致,高于病毒分离。     

猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研究进展

猪传染性胸膜肺炎是由猪胸膜肺炎放线杆菌引起以急性出血性纤维素性胸膜炎和出血性肺炎为主要特征猪的呼吸道疾病,给世界养猪业造成了巨大的经济损失.近年来,伴随着分子生物学技术的快速发展与应用,猪传染性胸膜肺炎疫苗研究取得了长足进展,积累了丰富的资料.文章中扼要阐述猪传染性胸膜肺炎疫苗研究概况.     

猪前胸腺素的分子克隆与原核表达初步研究

应用RT-PCR技术从猪肾脏中扩增到猪前胸腺素基因,测序结果表明,猪前胸腺素完整开放阅读框(ORF)共333 bp,编码109 aa,与已公布的2个猪前胸腺素基因核苷酸同源性均为99.4%.构建了重组质粒pET-32-mProTα,并转化大肠杆菌(E.coli)Rosetta 2(DE3).SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析显示,表达产物约占菌体总蛋白的40%,相对分子质量约为12.07 ku.MTT法试验证实,表达产物初步纯化、透析复性后,可明显增强淋巴细胞的增殖.     

猪伪狂犬病病毒gD核酸疫苗构建及IL-15基因佐剂对其免疫增强试验

运用PCR技术扩增出伪狂犬病病毒糖蛋白gD基因,将该基因定向克隆于真核表达载体pcDNA3.1+、pCI-neo中,命名重组质粒为pcD-gD、pCI-gD.以小鼠为动物模型,对构建的基因疫苗进行免疫原性的初步评价.为了证明细胞因子是否能增强基因疫苗的免疫效力,本试验用IL-15的表达质粒联合pcD-gD、pCI-gD免疫.结果表明,重组质粒组主要提高细胞免疫水平,特别是联合组中的CD8~+相对其他组别较高.重组质粒在体液免疫方面没有表现出优势,抗体滴度达不到阳性对照组的水平,但是整个抗体水平相对稳定,提示DNA疫苗诱导的抗体维持时间较长.     

运用RT-PCR/酶切技术快速检测猪传染性胃肠炎病毒

猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的猪的一种急性高度接触性传染病,临床特征为严重腹泻、呕吐和脱水,不同年龄和品种的猪都易感,15日龄以内的仔猪病死率很高,尤其是10龄以内的仔猪死亡率可达100%[1].本试验的目的在于建立快速检测TGEV的RT-PCR/酶切方法,为该病的诊断、检测和流行病学调查研究提供更为敏感和可靠的手段.     

猪传染性胃肠炎病毒检测技术研究进展

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)是引起猪病毒性腹泻的一种重要病原微生物,给世界养猪业造成巨大经济损失。近年来,伴随着分子生物学技术的快速发展与应用,TGEV的检测技术取得了长足进展,积累了丰富的资料。本文扼要阐述TGEV检测技术研究概况。