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旨在分析布鲁菌(Brucella)转录调节因子HFQ诱导机体产生的免疫反应。以热灭活牛种布鲁菌S2308为模板,根据GenBank登录的S2308 hfq基因序列(BAB1_1134)设计引物,PCR扩增hfq基因片段后,将其克隆至原核表达载体pET-32a,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,诱导HFQ蛋白表达;利用SDS-PAGE电泳以及Western blot对重组HFQ蛋白(rHFQ)进行分析;pET-32a空载体、rHFQ和疫苗株M5-90刺激小鼠巨噬细胞RAW 264.7,利用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ和IL-4的表达水平;将pET-32a、rHFQ和M5-90免疫小鼠后,检测小鼠脾细胞中IFN-γ和IL-4的水平,以及小鼠血清中IgG抗体水平。结果显示,hfq基因大小为237 bp,编码79个氨基酸,rHFQ大约在25.8 ku处出现蛋白条带,纯化后为单一条带。Western blot结果显示,rHFQ具有较好的反应原性。rHFQ刺激RAW 264.7后,诱导IFN-γ和IL-4的水平与M5-90组相似,显著高于PBS组和pET-32a空载体组,且随着刺激时间的延长而升高。rHFQ免疫小鼠后,诱导脾细胞产生IFN-γ和IL-4的水平,小鼠血清中IgG的水平与M5-90组相似,显著高于PBS组和pET-32a空载体组。布鲁菌HFQ蛋白具有较好的反应原性,并能诱导机体产生较高的细胞免疫和体液免疫水平,是布鲁菌亚单位疫苗研制较理想的候选抗原。 相似文献
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采用RT-PCR法从假禾谷镰孢菌(Fusarium pseudograminearum)弱毒菌株FC136-2A的菌丝中扩增出假禾谷镰孢菌巨型双链RNA病毒1(Fusarium pseudograminearum megabirnavirus 1,FpgMBV1)的P3蛋白编码序列。测序结果显示,FpgMBV1-P3蛋白的编码序列长2 700 bp,编码901个氨基酸残基。构建原核表达载体pET28a-FpgMBV1-P3并转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,在25℃以0.5 mmol·L-1 IPTG诱导表达重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为90 kDa,与预期分子量大小相符。将该重组蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,获得抗血清,采用间接ELISA测定其效价达1∶128 000,能够特异性检测到假禾谷镰孢菌菌丝中的FpgMBV1-P3蛋白。研究结果可为探究FpgMBV1-P3的结构和功能,以及进一步探讨FpgMBV1在假禾谷镰孢菌弱毒菌株FC136-2A中的作用机制奠定基础。 相似文献
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国有林场作为我国林业整体事业的重要组成部分,在新中国建立以来,为我国的整个林业建设做出了重要的贡献,是我国林业发展与建设的中坚力量。占据林业建设事业的重要战略地位。然而随着时代的进步,新型社会对于国有林场提出了新的要求,因此,在新形势下需要对我国的国有林场进行改革,针对国有林场在发展中所存在的各种问题与困难,从精准定位林场性质以及深化林场的分类经营改革方面入手,可以国有林场进行事业化改革。本文就国有林场在进行事业化改革后,应走的发展路径以及相应的应对对策进行了研究。 相似文献
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中国部分马铃薯产区马铃薯Y病毒(PVY)的株系分化与鉴定 总被引:5,自引:0,他引:5
分别克隆了黑龙江、山西、贵州等3省内的4个马铃薯产区的PVY p1基因和cp基因,通过系统地基因序列分析对各分离物的株系种类进行了鉴定.结果表明中国马铃薯产区PVY株系分化现象明显,其中黑龙江省克山农场分离为PVYNTN株系;贵州省贵阳市分离物、威宁自治县分离物、山西省临县分离物为PVYN:O株系.PVYN:O株系分布普遍,可能已经成为中国部分马铃薯产区PVY的主要流行株系. 相似文献
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引起玉米粗缩病的水稻黑条矮缩病毒河南分离物的分子特征 总被引:1,自引:0,他引:1
<正>目前已报道的造成玉米粗缩病的病原有3种,分别是玉米粗缩病毒(Maize rough dwarf virus,M RDV),水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)和南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)[1]。我国于1954年在新疆和甘肃发现该病,上世纪60年代曾在中东部夏玉米区流行,至70年代以来各玉米产区已陆续发生[2],近年来在黄淮海夏玉米区特别是套播或晚春播、早夏播玉米田发生危害严重。 相似文献
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[目的]提高小麦产量。[方法]在冬小麦田间设置随机区组试验,测定不同浓度3.6%阔世玛水分散粒剂对野燕麦、猪殃殃、荠菜、野油菜的防除效果和对小麦的药害情况。[结果]3.6%阔世玛水分散粒剂300ml/hm^2+拌宝1200ml/hm^2和阔世玛3.6%水分散粒剂375ml/hm^2+拌宝1500ml/hm^2对野燕麦和阔叶杂草(猪殃殃、荠菜、野油菜)的株防效和鲜草减退率均在90%以上,具有很好的综合防效,且对小麦的药害较轻。[结论]冬小麦田间杂草的防除以阔世玛3.6%水分散粒剂300~375ml/hm^2+拌宝1200~1500ml/hm^2为宜。 相似文献
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通过实证测算农村金融与农业发展关系。在土地、技术等条件不变的情况下,每提高1%的农村金融支持将会有0.024 040%的农业增长。这说明在我国目前的金融支农模式下,金融支持可以促进农业发展,但是效果不是很明显,需要进一步提高农村金融支农的力度。最后,提出了措施建议。 相似文献
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利用电子鼻/舌融合系统对啤酒香气、滋味进行检测,基于其融合后的嗅/味综合信息实现啤酒的分类。由于传统K均值聚类结果依赖于初始值的选取,且易陷入局部最优,依据融合数据特点提出一种改进的基于粒子群优化的K均值聚类算法,该算法在运行过程中优化了权重系数,随着迭代次数增加同时调整收敛速度,使粒子的搜索更趋于平衡化,同时引入压缩因子,平衡全局与局部矛盾。将该算法与K均值聚类算法进行比较,实验数据证明该算法具有较好的全局收敛性,能克服易陷入局部最优的缺点而收敛于最优解,结果显示:该算法对5种啤酒聚类效果明显,正确率稳定在93.3%。 相似文献