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鸡γ-干扰素基因(ChIFN-γ)的瞬时表达及其抗病毒活性检测 总被引:1,自引:0,他引:1
采用PCR技术从质粒pET-ChIFN-γ中扩增得到鸡(Gallus gallus)γ-干扰素(chicken interferon gamma,ChIFN-γ)基因,将其亚克隆到真核表达载体pCAGGS中.将鉴定正确的克隆命名为pCAGGS-ChIFN-γ,体外转染鸡胚成纤维(CEF)细胞,24 h后经间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(Western blot)检测,表达蛋白具有良好的免疫原性.然后利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水疱口炎病毒(VSV*GFP)在CEF细胞上检测表达的ChIFN-γ抗病毒活性(AVA),经检测其抗病毒活性为2×10~3AU/mL,并且其活性可被抗鸡IFN-γ的多克隆抗体阻断. 相似文献
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构建问号钩端螺旋体LigA基因保守区和可变区的重组原核表达质粒,了解重组表达的LigAcon蛋白和LigAvar蛋白对金黄地鼠的免疫保护作用。采用高保真PCR扩增LigAcon和LigAvar基因并测序,构建LigAcon和LigAvar基因原核表达系统。SDS-PAGE和Western-blotting鉴定蛋白表达及其纯化情况。测定金黄地鼠的存活率来观察免疫LigAcon和LigAvar蛋白的金黄地鼠对感染问号钩端螺旋体56606株后的保护率。测序结果显示所得片段分别为LigAcon和LigAvar的编码序列,酶切及PCR分析证实重组质粒构建成功,SDS-PAGE和Westernblotting分析重组质粒可高效表达蛋白LigAcon和LigAvar。LigAcon免疫组,LigAvar免疫组,及LigAcon+LigAvar免疫组对金黄地鼠的免疫保护率均为100%。LigA蛋白是问号钩端螺旋体属特异性保护性抗原,未来可能在钩端螺旋体病的诊断和预防中发挥作用。 相似文献
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以山东省非粮土地作为研究对象,以地理信息系统和SPSS为主要数据处理工具,通过综合专家经验和相关研究资料,对山东省非粮土地甜高梁种植潜力进行评估。结果表明,山东省甜高梁适宜种植区主要分布在中部、东部丘陵区和南部平原区。其中高度适宜区约占总面积的5.4%,主要分布在山东省南部。 相似文献
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基于地统计学的耕层土壤有机质空间变异及不同插值模型的比较 总被引:2,自引:0,他引:2
为了揭示耕层土壤有机质含量的空间变异规律,指导土壤肥力评价和管理工作,实现耕地资源的可持续利用,本研究通过土壤样本野外采样和分析,测定样本中土壤有机质的含量,在ArcGIS地理信息系统平台上,利用地统计分析模块中的克立格法分析文登市耕层土壤有机质的空间变异性,并对比选择最优的克立格插值模型。结果表明:文登市耕层土壤有机质拟合的最优理论模型是Tetraspherical模型;C0/sill值为0.86,耕层土壤有机质空间相关性很弱,耕作制度、施肥数量和种类、种植制度等人类活动的作用影响很大,这些人为活动使土壤有机质的空间相关性减弱,逐渐向均一化方向发展;耕层有机质含量处在较低水平,应改善耕作管理方式实现耕地资源的可持续利用。 相似文献