家蚕肌钙蛋白CⅢ基因的原核表达及其抗体的制备

家蚕肌钙蛋白CⅢ(TnCⅢ)是肌钙蛋白C(TnC)的一种亚型结构,本研究利用大肠杆菌表达TnCⅢ融合蛋白,并制备其多克隆抗体.从本实验室的家蚕(Bombyx mori)蛹cDNA文库中搜索到1条编码家蚕肌钙蛋白CⅢ亚型的cDNA序列,将其命名为BmTnCⅢ(Bombyx mori TnCⅢ).该cDNA序列含有完整的ORF,可编码153个氨基酸残基组成的TnCⅢ蛋白.根据该cDNA序列,设计带有BamH Ⅰ和HindⅢ酶切位点的引物,通过RT-PCR的方法从家蚕蛹总RNA中扩增到BmTnCⅢ亚型基因的完整的ORF序列(GenBank登录号为DQ889211),并将其重组到原核表达载体pET-28a相应的酶切位点上.将获得的重组质粒pET-28a-BmTnCⅢ转化大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3),经1 mmol/L IPTG诱导表达重组蛋白后,在分子量约21 kD处出现融合蛋白条带.用亲和层析的方法纯化目的蛋白His-Tag BmTnCⅢ,并以此为抗原免疫雄性新西兰白兔(Oryctolagus cuniculus),制各了该融合蛋白的多克隆抗体.Western blot结果表明,该多克隆抗体具有较高的特异性,可用于后续的组织分布与定位研究.     

Denitrification characteristics of pond sediments in a Chinese agricultural watershed

Ponds are widely distributed in rice-based agricultural watersheds, particularly in southern China, and may play an important role in nitrate (     ) removal. However, the denitrification rate of pond sediment, measured using the acetylene (C₂H₂) inhibition technique, indicated that the amount of nitrogen removed by denitrification accounted for <1% of the total nitrogen applied. The present study was undertaken to determine the effects of sediment depth and temperature on denitrification of pond sediment using the C₂H₂ inhibition technique. The highest denitrification potential was found in the upper 5 cm of sediment, but this only accounted for approximately 34% of the total denitrification of the upper 0–30 cm of sediment, suggesting that sediment denitrification potential would be underestimated if only the upper 5 cm of sediment was measured. The denitrification potential was low and showed a weak response over a temperature range of 6–18°C, whereas denitrification increased significantly from 18 to 30°C, indicating that denitrification may play an important role in the removal of     in warm seasons. A comparison of the     disappearance and C₂H₂ inhibition methods showed that they were significantly ( P  < 0.01) and positively correlated. However, the C₂H₂ inhibition method gave only approximately 25% of the values determined by the     disappearance method.     

木薯MePP2CAa基因克隆、表达及蛋白互作分析

为探究2C型蛋白磷酸酶（protein phosphatase 2C， PP2C）在木薯响应非生物胁迫过程中的作用，利用木薯Arg7叶片cDNA扩增MePP2CAa基因，分析该基因序列、启动子活性、不同逆境和激素处理下的表达模式以及与ABA受体PYLs之间的互作关系。序列分析结果显示，MePP2CAa基因全长1 311 bp，编码436个氨基酸，具有PP2C家族的结构域特征，与橡胶树和麻风树的PP2C序列同源性最高，分别为78.95%和74.09%，在C端保守；qRT-PCR分析结果显示，MePP2CAa基因在木薯储藏根中的表达显著高于茎、叶中的表达量；不同逆境和激素处理结果显示，甘露醇、NaCl、ABA、MeJA、低温和SA处理可以显著诱导MePP2CAa基因的表达；MePP2CAa基因启动子序列分析显示，启动子包含ABA应答元件（abscisic acid responsive element，ABRE）、MeJA响应元件、干旱诱导元件等；酵母双杂交结果显示MePP2CAa能够与MePYL1互作。以上结果表明，MePP2CAa基因可能响应木薯的非生物胁迫。     

海洋渔业转型系统的构建及运行机制分析

海洋渔业转型系统的构建是一个复杂的工程，主要由原因子系统、动力子系统、支持子系统和目标子系统四部分构成，各子系统之间相互作用，相互制约，维护着系统的稳定性。当然，要保证整个系统的顺利运行还需要一系列的保障条件，主要包括物质资本、人力资本、风险、技术、环境、社会服务及政府政策等各方面的保障因素，各个方面都影响着转型的每一个环节和每一个过程。     

A Study on Seedlings'''' Density of Aralia elata

lntr0duction,4ruliaehIIa(Miq)see111isaIcaflosingSI11aIltree\\I1icl1beI0ngst0AraIiaceaeCl1inesAraIia.Itisoncki11doflnedicala11dcatablepla11ts.Tl1e.tcl1desl1ootil1earIysprillgisvaIuabIewiIdvegeIabIes-\vI1icl1c0l1lail1sricl1protei11,fat,restoredsugar-orgal1icacida11d111tICI1vi-tamin.Itis0neofInail1\viIdvcgetabIestbrexP()rt.However,thiswitdresoLlrceisco111i11gtobeexI1aIIsctcdbecaLlseofI1eaveygatI1eri11gforyears.Seedil1gal1dgrowillgseedlil1gexperi111cl1tof,,11-'Ili`IehII'Itvascotl11…     

CO2与氮肥交互作用的番茄光合速率预测模型

为了实现CO2气肥和营养液氮肥含量的准确调控，建立了作物整个生长周期的光合速率预测模型。以番茄为实验对象，设置了3个CO2浓度和3个营养液含氮量的交互处理实验，使用LI-6400型便携式光合速率仪采集叶室内的环境信息和单叶净光合速率。利用多元线性回归方法建立了番茄整个生长周期的光合速率预测模型，模型的相关系数为0.885，调整后的决定系数为0.782。实验结果表明，该模型具有较高预测精度，可为温室CO2气肥浓度和营养液氮肥含量的调控提供理论依据。     

转玉米C4型pepc水稻成熟胚为外植体的水稻悬浮细胞系的优化

为了研究外源玉米光合作用关键酶C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)基因在C3植物水稻中提高光合效率的分子机理,本研究以高表达玉米C4型pepc水稻(PC)和未转基因野生型Kitaake (WT)为材料,探索高效且稳定水稻悬浮细胞系建立的方法.结果表明:PC成熟胚愈伤组织的诱导培养基中添加2 mg/L2,4-D和1 mg/L 6-BA,可出诱导出高频的愈伤组织；再通过3次继代培养(2～0.5 mg/L 2,4-D,2～0.2 mg/L 6-BA,1 mg/L ABA),逐步降低2,4-D和6-BA的浓度,可获得了疏松、颗粒状且分散的愈伤组织块；然后转接到水稻悬浮细胞液体培养基中(0.5 mg/L2,4-D,0.2 mg/L 6-BA和1 mg/LABA),在28℃下培养,新原液的比例为3∶1,经42 d,可建立稳定且高效的供试水稻悬浮细胞系.     

兔胚胎培养液的血小板活化因子效应

将兔２细胞期或８～１６细胞期胚胎培养２４ｈ后的胚胎培养液分别注入去脾兔或去脾小鼠体内。注射后１２０ｍｉｎ内，均出现外周血中血小板数的明显减少。此现象是由于胚胎释放的某种活性物质引起的，该活性物质可能是血小板活化因子，经冷冻保存不丧失生物活性，且不存在种属差异     

京山县蔬菜产业发展现状、问题与对策

对近年来京山县蔬菜（包括食用菌）产业发展现状进行了阐述,指出了京山县蔬菜产业发展过程中存在的困难和问题,包括资金投入不足、栽培技术不高、基地规模不大、产业化程度不高等,并提出了今后京山县蔬菜产业化发展相应的措施和对策。