猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株E11105 N基因的序列分析与原核表达

为研究PRRSV N蛋白的结构、功能以及N蛋白在病毒致病中的作用,以临床分离PRRSV毒株E11105为研究对象,采用Primer Premier 5.0设计一对特异性引物,经RT-PCR扩增出N基因片段,利用相关分子生物学软件对N基因序列进行分析;将N基因克隆连接到pColdⅠ原核表达载体上,经PCR、双酶切鉴定及序列测定后,得到重组质粒pColdⅠ-N,将pColdⅠ-N转入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达后用SDS-PAGE蛋白电泳及Western blot验证分析。结果显示,分离株E11105N基因与北美洲型代表株VR-2332、欧洲型代表株Lelystad virus(LV)、中国2006年暴发的高致病性PRRSV代表株JXA1、中国代表株CH-1a的核苷酸序列同源性分别为93.3%、34.7%、99.2%、95.4%,氨基酸序列同源性分别为94.4%、15.3%、94.4%、99.2%;系统进化树显示,E11105株N基因与美洲型代表株VR-2332、中国高致病性JXA1毒株的亲缘关系较近;分离株E11105N基因所编码蛋白不存在跨膜区;二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,分别占20.33%和63.41%;预测该蛋白可能存在5个较为明显的B细胞优势抗原表位。SDS-PAGE蛋白电泳结果表明,重组N蛋白主要存在于菌体沉淀中,分子质量约为16.7ku;Western blot结果显示,带His标签的重组表达蛋白能被His单克隆抗体识别,显色后条带约为16.7ku,与SDS-PAGE蛋白电泳的条带大小一致。     

推动“双碳”目标实现的林业碳汇科学传播策略

科学传播林业碳汇的自然地理形成机制和经济社会价值及其在应对全球气候变化中的作用和贡献,提升公众对林业碳汇概念、技术、市场及政策的科学认知,有利于正确引导全民参与“双碳”战略目标实现以及展示中国在全球气候治理舆论场中的国际形象和大国担当。文中梳理了我国提出“双碳”目标以来林业碳汇在国内和国外主流媒体、新媒体及社交媒体等网络平台上的传播现状,指出当前我国林业碳汇科学传播存在科学概念抽象复杂、官方主流舆论出现分歧、科学家参与积极性不高,以及对外传播力不足等难点和问题;针对上述问题,分析提出构建以科学家群体为“意见领袖”的林业碳汇科学传播体系,以及明晰林业碳汇支持政策、促进林业碳汇科普与科技创新协同发展、强化林业碳汇知识培训和科学传播人才培养、常态化科学设置林业碳汇议题、重视开展对外传播等策略建议。     

不肯加糖

乳房是奶山羊泌乳的重要器官,奶山羊产奶量的高低主要取决于乳房的发育状况,因此,对奶山羊进行科学的饲养和管理,促使乳房发育,对提高产奶量至关重要。     

思茅松控制授粉关键技术

从思茅松开花特性、亲本选择、花粉采集、授粉过程、种子采收、档案管理等方面论述了思茅松控制授粉关键技术。     

架子牛育肥项目实施的情况报告

我们在2009年进行了架子牛育肥技术的研究与应用,该项目的实施,取得了较好的应用效果。现将实施与完成的情况进行如下总结。1项目实施效果2009年末,优质肉牛存栏150头,出栏优质肉牛226头,向周边饲养户提供优质良种肉牛120头。改     

脂肪细胞膜蛋白免疫调控家畜体脂含量的研究

家畜体内脂肪过度沉积一直是消费者关注的焦点脂肪过度沉积不仅降低畜产品质量，还威胁人类健康，已成为生产领域亟待解决的问题：脂肪细胞膜蛋白免疫是利用脂肪细胞膜蛋白作为抗原，通过免疫方式来破坏脂肪细胞，使脂肪细胞数目减少，限制机体贮存脂肪的能力，是调控家畜体脂含量新的安全有效的方法.     

高山番茄嫁接抗病丰产栽培技术

近年来,随着我国农村种植业结构的调整,保护地番茄栽培面积不断扩大,轮作周期逐渐缩短,番茄青枯病已成为影响番茄生产的主要障碍.番茄通过嫁接育苗能有效地预防和控制保护地番茄青植病的发生,较好地解决番茄由于病害而难以重荐问题,同时具有抗寒、抗病、虫害少、省药省工省肥、品质佳、高产、经济效益好等特点,因而番茄嫁接栽培技术具有良好的推广应用价值.     

马γ-干扰素成熟蛋白基因在大肠埃希氏茵中表达及其多克隆抗体制备

采用RT-PCR从ConA刺激的马外周血单核细胞（PBMC）中扩增获得含信号肽的马γ-干扰素（Equine interferon-γ，EIFN-γ）基因，将其克隆至载体pCR2．1-TOPO中。通过PCR方法从重组质粒（pCR-EIFN-γ）中扩增马干扰素成熟蛋白（MatureEIFN-γ，mEIFN-γ）基因，并将其亚克隆至原核表达载体pET-28a（＋）。重组子经测序鉴定正确后转化至大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导，对其产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定，将纯化后的表达产物免疫新西兰白兔制备多克隆抗体。结果表明，mEIFN-γ基因全长为441b口，含一个开放阅读框，编码146个氨基酸的成熟蛋白；对其表达产物以可溶性和包涵体两种形式存在，重组蛋白相对分子量约为18Ku，且具有免疫反应活性。mEIFN-γ基因在大肠杆菌中高效表达并在非变性和变性条件下，采用Ni^＋亲和层析纯化方法均可获得高纯度的重组马γ-干扰素制备的多克隆抗体，为建立马γ-干扰素检测方法、监测机体免疫状态和研究机体免疫机制奠定了基础。     

绍兴市林业有害生物种类、发生规律及防治对策

通过对绍兴市林业有害生物的普查，采集标本4万多，查明全市共有林业有害生物1109种，其中昆虫11目121科854种，病害236种，有害植物12种，有害动物4种，其它3种；另外还查明害虫寄生性和捕食性天敌10目33科135种，传粉昆虫、清洁昆虫、水质指示昆虫5目11科24种。并对松材线虫病、日本松干蚧、马尾松毛虫、山东广翅蜡蝉等9种主要病虫害的发生规律进行了观察研究，对其发生趋势进行了综合分析，并提出综合治理的对策措施。     

柳杉林地立地质量评价探讨

应用数量化理论Ⅰ的原理和方法,研究影响柳杉林分优势高生长的立地因子,结果表明:地势、坡向、坡形、土层厚度、腐殖质层厚度、土壤松紧度、土壤质地为主要立地因子,并利用其编制了柳杉人工林数量化地位指数表,在此基础上进行立地类型的划分与立地质量的评价,提出柳杉最适宜的造林地。