斑点叉尾鮰呼肠孤病毒CCRV诱导CCK细胞凋亡的研究

为研究斑点叉尾(鱼回)呼肠孤病毒(CCRV)诱导斑点叉尾(鱼回)肾脏细胞(CCK)发生凋亡的机理,以CCRV感染的CCK细胞为实验材料,采用Hoechst 33258染色、DNA片段化检测、TUNEL反应、亚G1期细胞检测以及线粒体膜电位变化检测等方法进行实验.感染试验结果显示,病毒感染斑点叉尾(鱼回)肾脏组织细胞后,细胞变圆、皱缩,随后细胞脱落,细胞单层呈网状,感染72 h后出现典型细胞病变效应(CPE);病毒感染48 h后Hoechst 33258染色结果显示,细胞的染色质固缩、核边缘化或破裂,可观察到凋亡小体,细胞凋亡率随时间增加;DNA片段化检测结果显示,病毒感染细胞12 h后细胞基因组DNA出现片段化,随后逐渐增强,72 h达到最高;TUNEL反应结果表明,病毒感染细胞72 h后细胞基因组DNA断裂,有大量游离3’末端自由羟基(-OH)存在.亚G1期细胞检测结果显示,病毒感染48 h后,约53.44％细胞处于亚G1期;利用JC-1检测试剂盒检测病毒感染细胞的线粒体膜电位变化,病毒感染细胞24 h后线粒体膜通透性发生改变,膜电位变化显著.紫外线灭活与热灭活的斑点叉尾(鱼回)呼肠孤病毒不能诱导斑点叉尾(鱼回)肾脏细胞发生凋亡,表明细胞凋亡依赖于病毒复制.     

‘黑珍珠’番茄植株再生体系的研究

为了研究‘黑珍珠’番茄植株再生,以‘黑珍珠’番茄幼嫩叶片为外植体诱导愈伤组织,通过愈伤组织诱导培养、愈伤组织分化培养、不定芽增殖培养、生根培养和试管苗移栽,建立高效快速的‘黑珍珠’番茄再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片愈伤组织的培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,叶片外植体愈伤组织诱导率最高可达98.2%;诱导出的愈伤组织在MS+ 1.5 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L IBA培养基上能很好的分化出不定芽;MS+4.0 mg/L KT+ 0.01 mg/L IBA 培养基可实现不定芽芽增殖;最适宜的生根培养基为1/2MS+ (0.05~0.08) mg/L NAA,试管苗移栽成活率达92%。     

西安地区甜菜夜蛾发生规律调查及药剂防治试验

对西安地区甜菜夜蛾的发生规律进行了调查,并对防治用药进行了筛选。结果表明,甜菜夜蛾在关中地区一年发生5代,其中以3、4、5代为主害代,特别是7、8月份发生的3、4代为害最重。雌雄性比1∶1.2,每雌平均产卵量为550粒。田间小区试验表明,15%茚虫威悬浮剂、24%甲氧虫酰肼悬浮剂和20%杀铃脲悬浮剂对甜菜夜蛾具有理想的控制效果。     

香蕉细菌性枯萎病菌在中国的潜在适生区域

青枯菌2号小种引起的香蕉细菌性枯萎病(moko disease)是香蕉生产上最具毁灭性的病害之一.为指导香蕉细菌性枯萎病的预防控制和制定相关的检疫政策,该研究根据EPPO公布的香蕉细菌性枯萎病在全球范围内的分布资料,分别采用GARP和MAXENT两种预测模型对其在中国的潜在适生区域进行分析预测.结果显示,GARP和MAXENT的预测结果基本一致,均表明香蕉细菌性枯萎病菌在中国的潜在适生区域集中分布于东南部的云南、广西、广东、海南、福建、台湾、江西、湖南、贵州、四川、重庆、浙江、湖北等13个省(市、自治区),其中高风险适生区域包括广东、广西、台湾、海南、福建和云南省.     

高GC含量青枯菌aac基因PCR扩增体系的建立与优化

通过添加增效剂、正交试验设计优化PCR反应体系、联合采用多种PCR程序等措施,建立并优化了PCR扩增体系,成功地从高GC青枯菌基因组中扩增出了长度为2 434 bp且GC含量高达70.9%的aac基因。PCR反应体系为20 μL包括5%DMSO、2.5 mmol/L MgCl2、500 μmol/L dNTP、10 pmol/L引物、1.25 U Taq酶、50 ng模板DNA。首先采用热启动PCR：95 ℃5 min,保持80 ℃,加入Taq酶;然后采用二步PCR：5个循环包括变性95 ℃1 min,65 ℃1 min;最后采用降落PCR：30个循环为95 ℃1 min,78 ℃1 min,每个循环降低0.5 ℃,72 ℃3 min;补充10个循环为95 ℃ 1 min,63 ℃1 min,72 ℃3 min;72 ℃10 min。该试验体系的建立与优化为研究高GC含量生物的基因功能提供了方法。     

一种简单快速的赤霉病菌单孢分离方法 ——平板稀释画线分离法

本文对琼胶平板稀释纯化法进行了改良,建立了一种新方法—平板稀释画线分离法,既保留了其简单快速,操作方便,易于掌握的优点,又解决了可靠性差的缺点,适用于一些不易直接挑取的体积较小,颜色较淡的真菌孢子,如镰刀菌等,和传统分离方法相比节约了大量时间,适合大量样品的分离纯化。     

大鲵虹彩病毒理化及生物学特性研究

对大鲵虹彩病毒(Giant salamander iridovirus,GSIV)的理化特性及生物学特性进行了研究。结果表明:GSIV对热处理敏感,56℃和65℃处理30 min均可彻底灭活病毒;GSIV经酸(pH3)和碱(pH10)处理,病毒滴度(TCID50)与对照组相比较分别下降了8.58、9.04个对数级,差异极显著(P<0.01);GSIV经有机溶剂氯仿、乙醚以及胰蛋白酶处理,TCID50与对照组相比较分别下降了9.33、7.83、6.49个对数级,差异极显著(P<0.01)。冻融次数对GSIV滴度的影响不显著(P>0.05)。GSIV对细胞培养物的感染性试验结果表明,GSIV可在鲤上皮瘤细胞系(Epithelioma papilloma cyprini,EPC)、斑点叉尾鮰肾脏细胞系(Channel catfish kidney,CCK)、虹鳟鱼性腺细胞系(Rainbow trout gonadal,RTG-2)等细胞中增殖,但在EPC、CCK细胞中增殖速度快,TCID50高;GSIV在EPC细胞中的最适生长温度是25℃。GSIV在EPC细胞中增殖动态试验结果表明,GSIV感染细胞6 h后TCID50开始快速上升,进入对数增长期,72 h时TCID50达到最大值,以后趋于稳定。GSIV感染EPC细胞超薄切片透射电镜观察结果显示,在EPC细胞质中可见大量虹彩病毒样颗粒,呈晶格状排列,直径约140 nm。     

北京市空气污染物对过敏性鼻炎的影响研究

 以2009年3月19日至2010年3月18日间北京医院耳鼻喉—头颈外科的过敏性鼻炎（AR）门诊就诊病人观测为基础,结合北京市空气质量,探讨空气质量与AR的关系。结果表明, AR患者的人数均随年龄的增长呈现先增加后减少的趋势,以中青年龄段（21～50岁）人数最多。春、秋季是过敏性鼻炎的易发时期,夏、冬季发病率相对较低。AR日就诊人数的时间变化趋势与空气中PM10,SO2,NO2的浓度变化具有一定的时间对应性,在观测的上半期内尤为明显,表明在短期内空气中PM10,SO2,NO2浓度的增加会直接影响AR的发生与症状加重,并导致就诊人数增加     

西安地区害虫性诱自动化监测预警系统的应用现状

为切实做好农作物病虫害的监测预警试验示范工作,西安市在所辖区县建立了2个"闪讯"害虫远程实时监测系统监测站,通过对玉米重大虫害玉米粘虫的监测,评价了"闪讯TM"监测系统在病虫害预测预报中的应用效果。监测结果显示,西安地区一代粘虫成虫的发生盛期在6月上旬,二代粘虫成虫的发生盛期在7月中下旬左右,三代粘虫成虫的发生盛期在8月中下旬,与历期人工调查的发生规律相一致。表明"闪讯TM"监测系统能客观反映粘虫在西安地区的发生规律,具有省时、省力、高效的优点,但存在着诱集效果较差,自动计数不准确等缺点,尚需进一步改进。     

25%乙嘧酚磺酸酯微乳剂防治甜瓜白粉病田间药效试验

对25%乙嘧酚磺酸酯微乳剂防治甜瓜白粉病进行了春秋两季田间药效试验,结果表明,25%乙嘧酚磺酸酯微乳剂对甜瓜白粉病均具有理想的防治效果,药后7 d,制剂量600 g.hm~(-2)、900 g.hm~(-2)和1 200 g·hm~(-2)的防效达81.54%~83.63%、83.08%~86.87%、84.64%~88.49%,均高于对照药剂,且对甜瓜生长无不良影响,安全性好。产量调查结果表明,25%乙嘧酚磺酸酯微乳剂防治甜瓜白粉病对甜瓜产量具有提升作用,25%乙嘧酚磺酸酯微乳剂900 g·hm~(-2)和1 200 g·hm~(-2)在春秋两季折合产量分别为23 827.5 kg·hm~(-2)和24 202.5kg·hm~(-2),增幅分别达7.04%和8.73%,明显优于对照药荆。