山东省西瓜、甜瓜发生瓜类细菌性果斑病

山东省寿光市和昌乐县发生瓜类细菌性果斑病,该病种子带菌,病原菌为Acidovorax citrulli（Schaad et al. 2009）,危害葫芦科作物。应加强检疫和防治工作。     

西瓜噬酸菌Aac-5AAA ATPases基因moxR和ruvB功能研究

AAA ATPases(ATPase associated with diverse cellular activities)是一种与细胞活性相关的酶,广泛存在于所有生物中,同时具有蛋白酶和分子伴侣活性。为了研究AAA ATPases相关基因缺失对西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)的影响,本研究通过同源重组双交换的方法构建西瓜噬酸菌moxR基因以及ruv B基因全缺失突变菌株及互补菌株,测定了突变菌株的致病性、烟草过敏反应、运动性、生长能力、生物膜形成等;并利用实时荧光定量PCR方法测定了AAA ATPases与Ⅲ型分泌系统相关基因(hrc N和hrp E)、毒性蛋白相关基因(trb C和vir B)、鞭毛相关基因(fliR和fli M)、菌毛相关基因(pin C-1和pin C-2)以及AAA ATPases亚家族Ruv B相关基因(ruv A和ruv C)的关系。结果表明,moxR基因以及ruv B基因全缺失突变菌株的致病力降低、运动性减弱、生长能力下降、生物膜形成能力增强、烟草过敏性反应减弱、突变菌株中重要的致病基因hrc N和hrp E表达量显著下调,表明AAA ATPases相关基因moxR、ruv B在西瓜噬酸菌的致病力上发挥重要作用。     

西瓜叶枯病病原菌生物学特性研究

西瓜叶枯病(Alternaria cucumerin)是一种真菌性病害,其致病菌为瓜链格孢菌(Alternaria cucumerin),对该病菌进行了生物学特性研究.试验结果表明:菌丝在PDA与西瓜肉榨汁的培养基上生长较好,菌落直径为8.0cm;菌丝生长最适温度为25℃,菌落直径为7.1cm;适宜生长的碳源为葡萄糖,氮源为硝酸钠,pH值为7,菌落直径分别为7.2,8.7,8.0cm,菌丝致死温度为52%、10min,菌丝在光照、黑暗、光暗交替下均能生长,其中在光照条件下生长最好.适于病菌孢子萌发的温度为25℃,pH值为7,2%硝酸钠培养液条件下萌发率最高,萌发率为90.2%、95.6%和96.4%.     

感细菌性斑点病的番茄品种存在LescPtoF基因的同源序列

根据已报道的番茄Pto基因家族成员之一LescPtoF基因的序列特征设计引物,通过PCR扩增从3个感病番茄品种中获得3个同源序列。Blast结果表明其中两个序列和报道基因完全一致,另外一个和报道基因的序列相似性为99%,表明感病番茄品种中也存有LescPtoF基因的同源序列。     

杨树上的冰核细菌及其在引起杨树冻害和诱发真菌溃疡病过程中的作用

在黑龙江、吉林和辽宁省的杨树上普遍存在着冰核活性（ＩＮＡ）细菌,经测定它们能在－４℃～－６℃温度下产生冰核活性。它们分属于３个属５个种或变种,即：菠萝泛生氏菌（ＰａｎｔｏｅａａｎａｎａｓＳｅｒａｎｏ１９２８）、噬夏孢子欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉａｕｒｅｄｏｖｏｒａ（Ｐｏｎｅｔａｌ．）Ｄｙｅ１９６３）、丁香假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅｐｖ．ｓｙｒｉｎｇａｅＶａｎＨａｌ１９０２）、丁香假单胞菌流泪致病变种（Ｐ．ｓｙｒｉｎｇａｅｐｖ．ｌａｃｈｒｙｍａｎｓ（Ｓｍｉｔｈ＆Ｂｒｙａｎ）Ｄｙｅ１９７８）和丁香假单胞菌未定变种（Ｐ．ｓｙｒｉｎｇａｅｐｖｓ．）。自然条件下ＩＮＡ细菌增加了杨树的冻害;冻害的主要时期是在早春杨树萌芽阶段。在由真菌ＤｏｔｈｉｏｒｅｌａｇｒｅｇａｒｉａＳａｃｃ．引起的大斑型溃疡病病斑中分离到的ＩＮＡ细菌数量最多;而同一真菌引起的水泡型溃疡病病斑中分离到的ＩＮＡ细菌数量最少。在杨树干上接种ＩＮＡ细菌并经冷冻处理后,增加了Ｄ．ｇｒｅｇａｒｉａ的侵染,形成大斑型溃疡。证明冻伤和其它伤口是Ｄ．ｇｒｅｇａｒｉａ形成大斑型溃疡病斑的主要原因。提出了对ＩＮＡ细菌造成的杨树冻害和真菌性溃疡病进行综合     

广西厚皮甜瓜根腐病病原菌鉴定及抗病种质筛选

根腐病是近年上升为广西地区大棚厚皮甜瓜生产上的重要病害,严重影响甜瓜产业的健康发展.为明确该病害病原菌的分类地位并获得抗病种质材料,对病原菌进行分离纯化和致病性测定,结合形态学和分子生物学特征对病原菌进行分类鉴定,并通过苗期抗病性鉴定方法筛选抗病种质材料.结果表明,致病菌株的菌落和分生孢子形态特征与前人报道的腐皮镰孢菌...     

防治甜瓜枯萎病药剂配方筛选及盆栽防效测定

以甜瓜枯萎病菌为试材,采用菌丝生长速率法和孢子萌发法从8种待选药剂中选出4种较优试剂进行复配试验,采用Wadley方法分别计算菌丝生长和孢子萌发的增效系数,确定最优配比并进行盆栽试验。结果表明:8种待选药剂中,25%腈菌唑乳油和45%咪鲜胺微乳剂对菌丝生长抑制效果较好,EC50值分别为0.001 2、0.004 6 mg·L^-1;250 g·L^-1嘧菌酯悬浮剂和25%啶菌恶唑乳油对孢子萌发抑制效果较好,EC50分别为0.092 2、3.263 2 mg·L^-1。上述4种药剂按比例法两两混配,30种组合中有2种配比对病菌菌丝生长及孢子萌发均为增效和加和作用,即咪鲜胺∶嘧菌酯=4∶1,嘧菌酯∶啶菌恶唑=2∶3。盆栽接种防效测定结果表明,上述2个组合每株浇灌10 mL浓度为1.0 g·L^-1药液对甜瓜枯萎病防治效果分别为80.42%和76.57%,均显著高于单剂防效。为甜瓜枯萎病的防治药剂使用提供参考依据。     

西瓜噬酸菌Ⅲ型分泌系统hrcQ基因功能分析

Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)是影响西瓜噬酸菌Acidovorax citrulli致病性的重要因素,hrcQ作为T3SS的保守基因,在组成和维持该系统功能方面扮演着重要角色,但hrcQ在西瓜噬酸菌中的具体生物学功能尚不明确。本试验以西瓜噬酸菌Aac5菌株为研究对象,通过基因敲除、致病力及相关表型测定等,解析了hrcQ基因的功能。结果表明:hrcQ缺失导致Aac5菌株对寄主的致病能力丧失,运动性及生物膜形成能力降低,并丧失了引起烟草过敏性反应能力;hrcJ和hrcR基因在hrcQ缺失突变株中的表达量下调,hrcQ对hrcJ和hrcR基因均为正调控。表明hrcQ在维持西瓜噬酸菌致病能力中起着不可或缺的作用。     

西瓜噬酸菌DeoR家族转录因子glpR的功能研究

DeoR(Deoxyribonucleoside operon repressor)家族转录因子是在原核生物中广泛存在的转录调控因子。DeoR通过调节毒力因子的表达来影响病原细菌的致病性,并且在不同的病原细菌中有不同的调控网络。为了阐明DeoR在西瓜噬酸菌中的功能和信号通路,Aac5菌株被用来构建DeoR转录因子glpR的缺失突变株及互补菌株,通过进行表型及转录水平的测定,对西瓜噬酸菌中DeoR转录因子glpR的功能进行初步探究。结果表明,缺失glpR基因后,Aac5菌株利用果糖的能力、对西瓜苗的致病能力、西瓜子叶体内生长能力以及形成生物膜的能力均显著下降,体外生长速度减慢,而抗高盐胁迫能力以及抗铜离子胁迫能力显著增强。同时,基因glpR的缺失会导致三型分泌系统基因hrpG、hrpE及hrcJ表达量显著下调,果糖利用相关基因fruA、fruB与fruK表达量显著下调,生物膜相关基因flgG表达量显著下调,与WT-fruBpGUS相比,ΔglpR-fruBpGUS的fruB的启动子活性显著减弱。以上结果表明,glpR基因在西瓜噬酸菌果糖利用、抵抗逆境胁迫以及致病过程中起重要作用。