血清学检测的雄性特异性抗原Fab抗体的特异性鉴定

旨在研究血清学检测的雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体的特异性。以从噬菌体Fab抗体库中筛选到具有较高雄性特异性结合活性的重组噬菌体克隆为基础,构建Fab抗体的可溶性表达噬质粒,并诱导和纯化该抗体片段,利用免疫荧光FITC/DAPI共染技术和ELISA分析其特异性。结果表明,该抗体在约49 ku处有条带出现。在Fab抗体和H-Y抗血清的细胞免疫荧光比较分析试验中发现,从雌、雄鼠脾细胞的阳性细胞数量和平均荧光强度的角度分析,Fab抗体的雄性特异性强于抗血清。石蜡切片免疫荧光定量分析显示,Fab抗体与雄鼠肝脏的结合活性明显高于对应雌鼠,差异极显著(t=20.73,P=0.002 3<0.01),而H-Y抗血清与雄鼠肝脏的结合活性略高于对应雌鼠,差异显著(t=7.11,P=0.019 2<0.05)。以C57BL/6雄鼠脾细胞、睾丸细胞作为抗原的ELISA分析显示,Fab抗体具有雄性特异性,但Fab抗体的OD值低于抗血清。结果提示,Fab抗体的雄性特异性高于H-Y抗血清,但其雄性特异性结合活性低于H-Y抗血清,Fab抗体在具备雄性特异性的同时,仍有少量雌性非特异性结合,Fab抗体的体外亲和力成熟可作为后续研究工作,以获...     

PADRE-TGFβ1融合蛋白的原核表达及鉴定

构建PADRE-TGFβ1原核表达质粒,并对其进行诱导表达和反应原性分析.对PADRE、联接序列(Linker)及TGFβ1的基因序列进行密码子优化,采用全基因合成的方法人工合成全长PADRE-Linker-TGFβ1序列,合成产物克隆至pET-28a(+)质粒.将构建好的质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受...     

早期胚胎玻璃化冷冻保存技术研究进展

本综述阐明了胚胎玻璃化冷冻原理，比较了玻璃化冷冻技术各种方法及其优缺点，分析了胚胎玻璃化冷冻的影响因素，展望了玻璃化冷冻技术的应用前景。     

移植时间对小鼠卵巢卵母细胞在雄性体内生长发育的影响

将1日龄小鼠卵巢移植入成年雄鼠肾囊下,分别于移植后21,28和35 d回收移植卵巢,对移植体的大小形态、回收率、回收卵母细胞数及其大小进行评价.结果表明:三时间段回收的移植体均生长增大,有腔卵泡明显,回收率达87.5%～92.9%,差异不显著;35 d移植体平均直径达(2 574.7±785.9) μm,显著大于21 d(2 075.3±329.8) μm和28 d(2 088.9±297.7) μm 移植体(P＜0.01);回收移植体均能分离到卵母细胞,随着移植时间的延长回收卵母细胞数下降,其中21 d移植体回收卵母细胞最多,为(40.5±29.8)个,与35 d移植体回收卵母细胞数(11.1±7.6)个相比差异极显著(P＜0.01),28 d移植体回收卵母细胞数(28.4±21.1)个,与前二者差异均不显著;回收卵母细胞形态正常,达到GV期,平均直径达(74.2±2.1)～(75.0±5.9) μm,组间差异不显著;28 d移植体中回收到MⅡ期卵母细胞.随着移植时间的延长,移植体增大,回收卵母细胞数减少.说明在卵巢异位移植中要获得丰富而又充分生长的卵母细胞应根据卵巢卵泡发育规律选择合理的移植时间.     

妊娠相关糖蛋白(PAG)在奶牛早期妊娠诊断上的应用现状

妊娠相关糖蛋白(pregnancy associated glycoproteins,PAG)是反刍动物妊娠后外周血液出现的特异性蛋白,在妊娠过程中发挥着重要的作用。目前,在生产上通过检测PAG在血清中浓度能够进行奶牛的妊娠诊断。作者综述了PAG的发现、分离纯化及其在奶牛体内的代谢水平和近年奶牛早期妊娠诊断上的应用情况。     

哺乳动物早期胚胎性别鉴定技术研究进展

哺乳动物早期胚胎性别鉴定是人们实现性别控制的重要途径。随着科学技术的发展和各种新的研究工具在性别鉴定中的应用,性别鉴定已越来越接近于能够在生产实践中应用。目前应用较多、重复性较好的性别鉴定方法主要有细胞遗传学方法、生物化学方法、免疫学方法和分子生物学方法等。文章主要综述了哺乳动物早期胚胎性别鉴定技术的研究现状,并分析了这些方法存在的问题及发展前景,为哺乳动物早期胚胎性别鉴定的研究提供借鉴。     

维生素A在猪早期胚胎发育期间的转运

综述了维生素A对母猪繁殖性能,尤其是早期胚胎发育的影响．对断奶母猪注射或在日粮中添加维生素A能降低胚胎死亡率,显著提高产仔数及活仔数,从而增加母猪的繁殖性能．     

雄性特异性抗原的研究进展

雄性特异性抗原为雄性动物特有,是引起同种雌性动物免疫排斥反应的物质的总称。这类物质广泛存在于哺乳动物及其他脊椎动物。依据其检测方式的不同,可分为细胞毒性T细胞相关性雄性特异性抗原和血清学相关性雄性特异性抗原。目前,已初步确定了几个细胞毒性T细胞相关性雄性特异性抗原的候选基因及抗原肽序列,它们都位于Y染色体上。对于血清学相关性雄性特异性抗原的研究则还处于初级阶段。近年发现了细胞毒性T细胞相关性雄性特异性抗原的抗体,揭示此两类物质具有内在的联系。     

工艺花茶的窨制方法

工艺花茶是带嫩茎的茶芽，经杀青、干燥等工艺制成的绿茶长脚银针经手工整形、捆扎，将各种可食用干花固定其中初制成茶坯，再经鲜花窨制，最后烘干的一种再加工茶。     

玉米赤霉烯酮对猪卵巢颗粒细胞毒性的研究

以体外培养的猪卵巢颗粒细胞为模板,研究了玉米赤霉烯酮(ZEA)对该细胞的毒性作用.结果表明,在所测浓度范围内,ZEA对卵巢颗粒细胞活性具有明显的抑制作用,且抑制作用随着浓度的增强而加大,并呈现剂量效应关系；60、90和120 μmol/L的ZEA使细胞中的MDA含量均升高,呈现剂量效应关系；ZEA作用后,细胞中GSH-Px酶活力下降；TUNE检测发现凋亡细胞呈棕褐色,凋亡细胞间间隙明显加大,随着ZEA剂量的加大,棕褐色细胞逐渐增多,尤其是高剂量ZEA组,细胞核大部分被染成棕褐色,细胞皱缩,胞间几乎无连接；当Annexin标记FIFC、流式细胞仪检测发现,高剂量组(120 μmol/L) ZEA处理后其凋亡率可达60.83％,坏死率很低,显示ZEA抑制猪卵巢颗粒细胞增殖主要是通过细胞凋亡,并非坏死途径.