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克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4基因并稳定转染胎儿成纤维细胞 #br# 总被引:2,自引:1,他引:1
【目的】克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4(thymosin beta 4,Tβ4) 基因,构建皮肤特异性表达载体,转染内蒙古白绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达红色荧光蛋白并可用于核移植的转基因细胞克隆。【方法】通过RT-PCR克隆Tβ4基因cDNA序列,然后与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光蛋白表达元件连接构成Tβ皮肤特异性表达载体pCDsRed-KT。外源表达载体以lipofectamineTM 2 000介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合。【结果】 克隆了内蒙古白绒山羊Tβ4基因,cDNA全长142 bp,其中包含135 bp的完整ORF,编码44个氨基酸残基,氨基酸序列与已报道的牛胸腺素β4(XM002706880.1)同源性为100%。测序显示构建的表达载体pCDsRed-KT中,Tβ4基因正确连接在皮肤特异性启动子KAP6-1下游,顺序连接CMV启动子和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。PCR检测显示外源KAP6-1启动子和Tβ4基因整合到细胞基因组中,筛选出的转基因细胞高效表达红色荧光蛋白。【结论】克隆得到内蒙古白绒山羊Tβ4基因并构建成功其真核表达载体,可稳定转染绒山羊胎儿成纤维细胞,为下一步通过核移植方法获得转胸腺素β4基因绒山羊提供了条件。 相似文献
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梁燕 《北京农业职业学院学报》2007,21(4):63-66
课程是将宏观教育理论与微观教育实践联系起来的桥梁,它始终是教育改革的重要内容.高等职业教育是以就业为导向,以能力为本位的教育类型,随着职业能力内涵的不断发展其课程必须做出相应的变革.新时期高等职业教育职业能力本位课程在课程设计、课程内容、课程结构、科目课程形式等方面具有若干特征. 相似文献
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茶多酚药理毒理研究进展及药效动力学初探 总被引:4,自引:0,他引:4
茶多酚清除自由基的功能及其对疾病的防治效果已越来越得到认同。那么它进入生物体内后是怎样变化并起到抗氧化剂的作用的?这种抗氧化剂是否会对生物体造成损伤?茶多酚对人体的安全性如何?本文试就这几个问题的研究新进展做一综述。一、茶多酚清除自由基效果和对疾病的防治茶多酚具很强的供氢能力,使它对自由基具有卓越的清除能力。生物学活性研究表明:茶多酚消除活性氧自由基的效率达92%-98%,明显优于VC和VE‘”。茶儿茶素的SO%清除自由基浓度在1-3Pm。(-)-EGCG的清除活性比(-)-EGC高2倍,比(-)-EL和(+)… 相似文献
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通过分析山东省内核桃良种的遗传背景,并构建其分子身份证,以期为核桃品种的选育、良种的质量追溯提供技术支持。本研究以17个核桃品种为试材,利用荧光SSR分子标记方法构建其指纹图谱,在分子层面进行数据分析。17个核桃品种间Nei’s遗传距离0.181~0.720,遗传相似系数0.267~0.867;筛选出5对SSR核心引物构建品种的指纹图谱,核心引物可分成HF9+HF15,HF3+HF9+HF14两组,每组均可完全区分17个品种;以指纹图谱为基础,与商品信息结合,数字化编码生成核桃品种分子身份证。17个核桃品种遗传基础较广,其聚类结果与地理位置相关性不大;5对核心引物多态性较好,可用于构建核桃指纹图谱;编码生成的分子二维码为核桃良种鉴定提供基础。 相似文献
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