RT-PCR技术检测猪瘟病毒的应用研究

本试验应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对猪瘟进行诊断应用研究.应用RT-PCR对来自广西不同地区的135份疑似猪瘟病料进行检测,84份诊断为阳性,阳性率62.2%.从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共276份,经RT-PCR检测,37份为阳性,阳性率为13.4%.其中健康猪扁桃体带毒较高,246份扁桃体中有35份阳性,占14.2%.采自柳州健康猪的26份淋巴结材料全为阴性,只有邕宁县的1份健猪淋巴结阳性.结果表明,RT-PCR技术可应用于猪瘟的临床诊断.     

夏秋大白菜干烧心病综防技术

温州市涂园土壤属淡涂粉砂质粘土,pH 7.80～8.62,土壤表层氯化钠含量0.12％～0.15％,灌溉水盐分含量0.13％～0.25％,有机质、碱解氮和速效磷含量偏低,但速效钾含量很高。由于土壤盐分含量过高,结构性差,夏秋栽培大白菜极易发生干烧心病(叶球外部正常,内部叶顶变干、黄化,呈干纸状),尤其在酷暑干旱的天气条件下,其发病率达95％以上。 针对此,温州市农业科学研究院蔬菜研究所成立了夏秋大白菜干烧心病的综合防治及高产栽培技     

犬药物过敏的诊治

20 0 3 2 0 0 4年,笔者用犬特安注射液治疗犬5 0余例,其中大型犬3 0多例、小型宠物犬1 8例,这些病例多因患肠炎、流感等而使用此药物进行治疗。使用方法和剂量:肌肉注射按每千克体重0 .2 0 .3mL ,每日2次。经治疗,多数犬痊愈,效果显著。但其中有5例小型宠物犬在注射后数分钟出现不同程度的过敏反应。1　过敏症状　肌肉注射后约3 10分钟,轻者:犬的头面部、颈部、唇部、眼睑部出现红肿,触诊发硬、有热痛,身体发僵、不灵活,步态不稳,表现胆怯、怕人等;重者:除上述症状外,犬出现呕吐,肌肉颤抖,眼睑水肿、外翻突出,瞳孔放大。2　治疗措施　在这5…     

隔离早期断奶(SEW)实施与展望

河南省内乡县牧原养殖有限公司，自2000年3月27日开始由原场(内乡马山猪场)母猪分娩的仔猪12～14天断奶到新场(即公司总部——内乡灌张水田种猪场)生长育肥，选留母猪经重新组群，发展到年出栏瘦肉型猪20万头，纯种种猪5000头，二元母猪2．5万头。近五年来相继有30余万头仔猪实     

广西猪瘟流行毒株全基因组的克隆与序列分析

参考已发表的猪瘟病毒(CSFV)Shimen株、HCLV株、Paderborn株的核苷酸序列，设计并合成11对引物。应用RT—PcR技术，成功地分11个片段扩增了CSFV广西流行毒株GXWZ02的全基因组，将这11个基因片段克隆，并测定了其核苷酸序列。应用计算机生物软件Vector NT1将11个基因片段进行拼接。确认CSFV GXWZ02株全基因组序列的长度为12296个核苷酸(GenBank收录号AY367767)。将GXXZ02株与国内外已发表的Slhimen、HCLV、39、Brescia、Eystrup、Glentorf、Alfort187、Pader190rn、CS、ALD、GPE、P97、LPC毒株进行全基因组核苷酸序列和推定的氨基酸序列比较，核苷酸同源性分别为85．4％、84．6％、88．7％、85．7％、85．7％、85．3％、85．6％、95．3％、85．7％、85．7％85．4％、83．4％、84．3％，推定的氨基酸同源性分别为92．6％、91．7％、94．2％、93．1％、92．9％、92．3％、93．0％、97．7％、92．6％、93．0％、92．6％、90．5％、90．6％。GXWZ02与Shimen、HCLV的全基因组序列及推定的氨基酸序列有明显差异，表明GXWZ02株在遗传性和抗原性上发生了较明显的变化。系统发育树分析，所比较的14株CSFV被分为2个群：GXWZ02、Paderborn和39这3个毒株被归为群Ⅰ，其余的11个毒株被归为群Ⅱ，GXWZ02与Paderborn的亲缘关系最接近。将GXXZ02与Shimen、HCLV基因组中单个基因分别进行核苷酸及推定的氨基酸序列同源性比较，结果显示，基因E^ms、E2、P7、NS2、NS5A的遗传变异程度大。而NS3、NS4A、NS4B的遗传性则相对保守。     

高+Gx过载作用对恒河猴肺脏的影响

15只健康恒河猴于清醒状态下，在动物离心机上经受相应峰值( 1Gx、 15Gx、 18Gx、 21Gx)的抛物线型过载作用后，按要求在过载后不同时期剖解，大体观察、取材，进行病理形态学的定性研究。结果显示：(1)眼观病变。 15Gx组、 18Gx组和 21Gx组在过载作用后即刻肺脏出现了不同程度的气肿、萎陷、淤血和出血点或斑；恢复组可见肺脏边缘有不同程度气肿区域，肺脏的背面呈暗红色；在各叶的背面均可见大小不等、多少不一的暗红色出血点或斑。(2)光镜下可见各急性实验组动物的肺脏呈现不同程度的气肿区和萎陷区，肺泡壁毛细血管扩张充血，肺泡腔内有浆液和红细胞渗出； 21Gx组还出现了血管内溶血、细支气管粘膜脱落和出血等，肺脏的病理损伤随G值升高而明显加重； 15Gx作用造成的肺脏损伤在1个月后基本恢复。而 21Gx作用后1个月肺脏的损伤尚未恢复，且出现了白细胞浸润、浆液渗出和增生等炎症反应。因此，高 Gx过载可引起猴肺脏明显的病理性损伤，其中 15Gx造成的损伤相对较轻，且容易恢复，而 21Gx造成的损伤严重，且难以恢复。     

猪流行性腹泻病毒胶体金检测方法的建立

应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体m Ab-PEDV1C12和(m Ab)-PEDV2C11,并将m Ab-PEDV2C11和羊抗鼠Ig G抗体喷在硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,对pH值、抗体浓度、封闭时间等条件摸索与优化。测试结果表明,该猪流行性腹泻病毒快速检测试纸条的检测下限达到310个TCID50的病毒量,检测时间为10 min,批内和批间重复性为100%。结论:该方法使用简单快速,适合猪场检测猪流行性腹泻病毒。     

喀斯特山区草地施肥对放牧乌蒙半细毛羊抗氧化系统功能的影响

为选择草地施肥的肥料种类,减少施肥对乌蒙半细毛羊产业的影响,在威宁县凉水沟种羊场多年生人工草地开展施肥和放牧试验。 结果表明:凉水沟种羊场人工草地牧草铜含量相对较低,但仍高于乌蒙半细毛羊营养需要标准;施肥极显著增加牧草氮含量(P<0.01),各施肥处理之间没有明显差异。硫酸铵施肥显著增加牧草硫和锌含量(P<0.01),显著降低了牧草硒的含量(P<0.01)。放牧试验结束时,施硫酸铵草地的乌蒙半细毛羊血液中铜、铁和硒的含量极显著低于施硝酸铵草地和对照组(P<0.01), 动物血液锌和硫含量极显著高于硝酸铵施肥牧场和对照组(P<0.01)。硫酸铵施肥牧场的乌蒙半细毛羊血红蛋白、红细胞压积容量极显著低于硝酸铵施肥牧场和对照牧场(P<0.01),血清铜蓝蛋白含量、血清超氧化物歧化酶活力、血清谷胱甘肽过氧化物酶活力和血清过氧化氢酶等抗氧化酶的活力极显著低于硝酸铵施肥牧场和对照牧场(P<0.01),丙二醛的含量显著高于硝酸铵施肥牧场和对照牧场(P<0.01)。血液其他矿质元素和血液指标及血清生化值在2个施肥处理和对照之间均差异不显著。 因此得出结论,草地施肥的种类需要根据土壤矿物质分布和含量情况确定,铜含量低的牧场不适合硫酸铵施肥,硫酸铵施肥明显影响了乌蒙半细毛羊机体抗氧化系统功能。     

新型环形病毒AGV7 VP3基因克隆、表达及其多抗制备

研究对新型环形病毒AGV7 VP3基因进行了克隆、表达以及多克隆抗体的制备。利用原核表达系统获得了可溶性重组GST-VP3蛋白,纯化后免疫小鼠制备了抗GST-VP3多克隆抗体。同时构建pcDNA3.1+EGFP-VP3真核表达载体。通过共聚焦显微镜观察发现,AGV7 VP3与EGFP融合蛋白在HCT116肿瘤细胞中集中表达于细胞核,且呈散在点状分布,类似凋亡小体。研究为进一步研制AGV7血清学诊断方法提供了材料,同时为探究AGV7VP3的生物学功能打下了基础。     

基于遥感的农作物长势模板数据库构建

针对农作物生长发育各阶段的特征,利用高分辨率遥感影像建立农作物长势模板数据库,可以实现农作物从播种到收获各个阶段的全程监测、预警及分析对比。以水稻种植及相关应用需求为例,探讨了遥感影像获取及处理方法,模板数据库概念设计、逻辑设计及分布式存储等若干关键问题。该研究对实现农作物生长过程监管、提高工作效率具有重要的意义,极大地促进了农业遥感的纵深化发展,并为农业信息化的精细化、产业化发展带来了新的契机。