感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达蛋白质组分析

为研究马传染性贫血病毒(EIAV)感染其主要靶细胞马巨噬细胞(eMDM)后与细胞蛋白的相互作用,本研究采用EIAV强毒株EIAVDLV34感染48 h后的马外周血单核细胞分化的eMDM,并以未感染eMDM为对照,提取细胞的蛋白质样品,进行双向凝胶电泳(2-DE)分离,并分析凝胶中差异蛋白点。结果共检测出19个表达差异的蛋白点(ratio1.4,p0.05),其中感染组相对于对照组有7个蛋白质上调表达,12个蛋白质呈现下调表达。将差异蛋白进行串联质谱分析进行鉴定,并通过生物信息学方法对这19个差异表达蛋白进行了蛋白互作用分析。此外,对其中5个比较重要蛋白的mRNA水平进行了荧光定量PCR分析,其表达变化与2-DE结果一致。本研究为进一步分析EIAV与其宿主细胞eMDM的相互作用提供了参考。     

O型口蹄疫病毒各编码基因及其产物变异率的分析

将从Genbank中提出的20株O型FMDV的全基因组分割成12个编码区域,即Lab、VP4、VP2、VP3、VP1、2A、2B、2C、3A、3B、3C和3D.通过方差分析,12个编码序列的相对变异率之间无差异(P>0.05);而这12种编码序列所对应的氨基酸相对突变率之间差异显著(P<0.01).利用Duncan法对这12种氨基酸序列相对突变率进行多重比较,发现3A蛋白的氨基酸相对突变率比其余11种蛋白的差异都显著(P<0.05);VP2、Lpro的氨基酸相对突变率与VP4、2A、2C、3Cpro、3Dpol之间存在差异(P<0.05);而VP4、2A、2C、3Cpro、3Dpol之间无差异.结果显示,O型FMDV自身RNA的转录和机体对FMDV施加的免疫压力不是造成FMDV变异的主要原因,而各种病毒产物的功能选择压力才是FMDV分子进化的主要原因.     

油菜施用不同种类叶面肥的增产效果

施用“叶面肥”能调节油菜生理机能，增进养份吸收，促进新陈代谢，增强油菜的抗逆性，提高油菜产量。     

城市体育休闲公园规划设计研究——以重庆市渝北区鹿山公园为例

在介绍重庆市渝北区鹿山公园基本概况的基础上，着重从规划指导思想、规划构想、功能分区与景观设计、绿化设计等方面详细论述体育公园规划设计思路。     

切莫抓了公路运输机 放松了对农用机管理

切莫抓了公路运输机放松了对农用机管理江苏射阳县实施上公路运输的拖拉机由公安部门委托农机监理部门管理已近一个年头。在这一年里，县农机监理部门做了大量的具体工作。自１９９７年１月中旬与公安机关办理上公路拖拉机及其驾驶员的档案交接手续后，为适应工作需要，对...     

油菜菌核病发生规律及防治方法

一、发生危害规律 1、症状 （1）叶面症状。早期多发生于叶缘，病斑圆形或不规则，初呈水渍状，后变成青褐色，有时生有轮纹，多雨高湿时极易穿孔，后期多发生于叶片基部，多为脱落的花瓣带菌感染所致，常迁延至茎秆发病。（2）花期症状。菌核病的子囊孢子极易侵染花瓣，致花瓣褪色，提早萎谢。（3）茎枝部位症状。     

马传染性贫血病毒受体选择性剪接异构体的鉴定与分析

马慢病毒受体1(ELR1)是马传染性贫血病毒(EIAV)唯一受体,属于肿瘤坏死因子受体超家族。为研究ELR1 mRNA选择性剪接的状况,本研究从EIAV靶细胞的巨噬细胞中提取RNA,经RT-PCR扩增并克隆测序。结果显示,ELR1 mRNA具有不同形式的选择性剪接异构体,主要表现为插入和缺失形式。插入片段为153 bp,位于序列的786 nt～787 nt之间,而缺失型异构体丢失了ELR1序列的415 nt～478 nt。不论序列的插入或缺失,均导致该基因编码框移位。特别是插入型异构体,编码框在跨膜区之前遇到终止密码子,造成翻译的提前终止,推测产生截短的可溶性ELR1。这些剪接异构体的鉴定为研究EIAV与机体的相互作用提供了新的研究方向。     

中西药合治猕猴奇异变形杆菌性腹泻的临床观察

本文观察中西药结合治疗猕猴奇异变形杆菌性腹泻的疗效。方法：将63例先后发病猴的诊治资料分为两组，后发病组41例，给予黄连素、藿香正气水等中成药，并配合敏感抗生素治疗；先发病组22例，当时只给抗生素治疗。结果：后发病组有效率85．4％，先发病组59．1％。两组疗效差异显著（P〈0．05）。结论：中西药结合治疗疗效优于单纯抗生素治疗。     

中国马传染性贫血病毒DLV株前病毒gp90基因在马体内的变异分析

分别以EIAV辽宁马强毒株（EIAVliao）前病毒DNA和马传染性贫血驴白细胞弱毒疫苗株（EIAVDLV）前病毒DNA为模板,从免疫接种后不同时期马血清中利用nested—PCR技术,扩增了约1．4kb的gp90基因。将其克隆后进行了测序,测序结果表明,免疫EIAVDLV后的第1时期至第5时期,与EIAV—liao比较核苷酸序列平均差异率分别为3．2956％、3．1456oA、3．36％、3．1856％和3．6456％。EIAVliao有20个N-连接糖基化位点,EIAVDLV平均是17．2个,其中有11个N-连接糖基化位点是高度保守的。     

马传染性贫血病毒囊膜基因gp90V3区糖化回复突变感染性克隆的构建

为阐明我国马传染性贫血病毒（Equine infectious anemia virus,EIAV）弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,作者分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列。结果发现疫苗株在膜基因gp90V3区的潜在N-连接糖基化位点出现稳定的碱基替换,使该位点消失。为研究囊膜糖基化的作用,以疫苗株全长感染性克隆pLG—FD3—8为亲本,利用反向遗传技术对该突变位点进行糖基化序列回复操作,构建全基因感染性克隆pLGFDg5。将pLGFDg5转染驴胎皮肤细胞（FDD）,通过逆转录酶活性和RT-PCR方法评价其感染性。结果表明,将pLGFDg5在FDD细胞中盲传3代后,可在细胞培养上清中检测到逆转录酶活性,用RT—PCR检测到EIAV保守基因片段,在电镜下可见典型的EIAV粒子。在FDD细胞上的病毒复制动力学分析显示,与其亲本克隆pLGFD3—8的衍生病毒pLGFD3-V相比,回复突变克隆衍生的pLGFDg5-V复制速度较慢,获得较低的病毒载量。体外抗体中和试验表明,与其亲本pLGFD3-V相比,引入潜在的糖基化位点g5降低了衍生病毒对中和抗体的敏感性。这一结果为N-连接糖基化在我国马传贫弱毒疫苗致弱机理的作用研究提供了重要依据。