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以试管苗叶片为外植体,将绿色荧光蛋白基因(GFP)转入苹果品种昌红中,研究发现抗生素筛选压对苹果转化效率的影响主要表现为对转化细胞再生植株的抑制作用。虽然降低筛选压(10或20 mg/L卡那霉素)可获得较高频率(分别为62.0%和57.8%)的转化愈伤组织,但其对转化细胞再生植株的抑制仍然明显。通过建立转化细胞悬浮培养系,在无筛选压下获得大量的由悬浮转化细胞增殖形成的愈伤组织,该愈伤组织再转到无筛选压的再生培养基上,6周以后15.8%的愈伤组织可再生转化植株。研究结果显示,可通过建立悬浮培养系的方式消除抗生素筛选压的抑制作用,快速大量获得苹果转化植株,为进一步开展苹果转化基因的整合机制与表达特性研究,推动苹果转基因育种的应用奠定基础。 相似文献
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以昌红和姬神2个苹果品种无菌苗的离体幼叶为试材,分别接种在附加不同浓度卡那霉素(Kan,0、5、10、15、20、30、40和50mg/L)、头孢霉素(Cef,100、200、400和600mg/L)和羧苄青霉素(Carb,100、200、400和600mg/L)的MS+TDZ1.0mg/L+NAA0.5mg/L培养基上,暗培养14d后转移到光下培养,30d后进行再生指标统计,分析不同浓度Kan、Cef和carb对苹果离体叶片不定芽再生的影响。结果表明:Cef浓度为600mg/L、Carb浓度为400mg/L时完全抑制供试品种叶片的再生,Carb对昌红和姬神离体叶片抑制再生的作用比Cef强烈;昌红苹果对Kan非常敏感,Kan浓度为10mg/L时即能极显著抑制不定芽的再生,浓度为20mg/L时不定芽白化而不能正常生长。以苹果离体叶片的高频再生系统作为基因转化的受体系统,Kan适宜选择浓度为20mg/L。 相似文献
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利用SFB4’基因特异引物BFP200/BFP201与内对照引物PCR IC-F/IC-R对甜樱桃自交亲和品种斯特拉自然杂交后代的29个株系的基因组DNA进行扩增,鉴别其是否具有自交亲和性,并对已进入结果期的10个株系进行田间自花授粉试验进一步验证其自交亲和性。结果表明:斯特拉杂交后代的29个株系中27.6%的株系检测出自交亲和特异条带,具有自交亲和性。在自交亲和基因鉴定时出现特异条带的品种和株系,其自交结实率均≥18.6%;而未检测出自交亲和基因特异条带的品种和株系,其自交结实率均≤14.8%。甜樱桃自交授粉结实率>15.0%的品种,即可认为具有自交亲和性。 相似文献
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苹果资源离体条件下保存效果 总被引:2,自引:0,他引:2
对苹果试管苗离体保存研究表明;在室温条件下,通过提高培养基中碳源的浓度或改变碳源种类,以及增养基中添加生长抑制物质等,试管苗可离体保存至8个月。在低温条件下,试管苗的生长明显受到抑制,并进一步延长了其保存周期。而在超低温条件下,茎尖的生长完全受到抑制,可实现种质资源的长期保存。 相似文献
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