拟南芥乙烯应答基因HLS1的原核表达及多克隆抗体制备

【目的】制备乙烯应答基因HLS1多克隆抗体,在过表达植物中检测HLS1的积累,为深入研究HLS1响应乙烯信号通路的分子机制奠定基础。【方法】构建pET28a-HLS1c原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导获得重组蛋白HLS1c-His;镍柱亲和纯化重组蛋白后免疫家兔获得抗HLS1血清,利用抗原亲和纯化抗血清获得高纯度的HLS1多克隆抗体;用HLS1抗体和GFP抗体,检测原生质体瞬时转化体系中GFP-HLS1c融合蛋白的表达;用农杆菌蘸花法获得过表达GFP-HLS1g的转基因植物,用HLS1抗体和GFP抗体检测GFP-HLS1g融合蛋白的表达。【结果】成功构建了原核表达载体pET28a-HLS1c,并在大肠杆菌系统中诱导获得重组蛋白HLS1c-His,且多以包涵体形式存在。纯化的HLS1c-His多克隆抗体,能清晰检测到约80 ng原核表达的HLS1抗原。纯化的HLS1抗体不仅能检测到原生质体中瞬时表达的GFP-HLS1c融合蛋白,也能检测到过表达转基因植物株系中的GFP-HLS1g融合蛋白,并且与标签蛋白GFP对应抗体所检测到的特异性条带大小一致。【结论】成功制备了拟南芥HLS1蛋白多克隆抗体,为HLS1蛋白在植物发育中的功能研究奠定了基础。     

涝胁迫对豫楸1号4种砧木嫁接苗渗透调节物质的影响

通过对涝渍胁迫条件下豫楸1号4种砧木嫁接苗渗透调节物质（Pro、可溶性糖、可溶性蛋白）活性的测定,结果表明：在持续涝渍胁迫下,3种渗透调节物质的变化趋势基本一致,整体变化趋势为先上升后下降,只是峰值出现的时间有差异。     

轮回选择在烟草育种中的应用及方法

提出了在烟草育种中应用轮回选择方法的必要性,综述了轮回选择改良群体的理论与方法和轮回选择在烟草育种中的应用效果,同时探讨了轮回选择在烟草群体改良中的应用特点和方法。     

固相微萃取法测定卷烟主流烟气中的游离烟碱

通过顶空固相微萃取进样器（HS-SPME）对卷烟主流烟气剑桥滤片中的游离烟碱进行萃取，并用气相色谱/质谱（GC/MS）进行外标法定量分析，对溶剂、萃取纤维、预平衡时间、萃取时间、萃取温度、脱附时间等分析条件进行了优化.同时建立了滤片不同含水量对游离烟碱测定影响的校正曲线，根据实际样品主流烟气粒相物水分的含量对游离烟碱的测定值进行校正，实现了对游离烟碱存在环境无干扰的条件下简便、快速、准确测定卷烟主流烟气粒相物中的游离烟碱.以参比卷烟3R4F为实际样品进行测定时，本方法的RSD为8.3%，检测限和定量限分别为0.2 μg/支和0.5 μg/支.     

肾上腺皮质肿瘤良恶性鉴别方法探究

肾上腺皮质肿瘤（Adrenocortical Tumor,ACT）是一种常见的肿瘤,存在于人体的内分泌系统中,并且是引发肾上腺皮质癌（Adrcnocortical Carcinoma,ACC）进而导致死亡的主要原因.经典的＂Weiss系统＂在诊断明确性上存在种种无法解决的问题,但随着科技水平的发展,人们开始探索新的途径来鉴别ACT的良恶性,于是开始有了影像学和分子生物学技术等特异性的检查方法,从而进一步增强了诊断的明确性.现通过对比的方式,探究肾上腺皮质肿瘤（Adrenocortical Tumor,ACT）影像学检查和分子生物学技术检查的结果,从而能更准确地鉴别其良恶性.     

电子技术实践教学中创新能力的培养

培养学生的创新能力是一个复杂的系统工程,它需要各学科密切协调,需要教师全员参与。本文阐述了在电子技术实践教学中,通过改革基础实验教学和课程设计,开放实验室等教学途径,有效的提高学生的实践能力,培养学生的创新意识和创新能力。     

PCV2衣壳蛋白羧基端基因在T4噬菌体表面的展示及ELISA方法的建立

用PCR扩增猪圆环病毒Ⅱ型广东分离株的衣壳蛋白羧基端基因,将PCR产物连接到pR质粒,转化DH5α细胞,筛选阳性克隆进行PCR鉴定并测序后,转化E2菌,将重组E2菌与缺陷型噬菌体T4-Z1同源重组后,得到重组噬菌体,经SDS-PAGE和Western blotting分析,表明衣壳蛋白片段在噬菌体表面正确展示,表达的融...     

6种大孔树脂对复方免疫增强剂多糖的吸附解吸性能

筛选出对中药复方免疫增强剂多糖具有较好的吸附解吸效果的大孔树脂。通过静态吸附及解吸试验、动态吸附及解吸试验，利用苯酚 硫酸法跟踪检测多糖质量浓度，以吸附率与解吸率为评价指标，初步研究AB 8、LSA 5B、DM 18、CAD 40、LX 1、D941型大孔树脂对中药复方免疫增强剂中多糖的吸附及解吸性能。结果表明，在6种大孔树脂中， AB 8对中药复方免疫增强剂多糖的动态吸附率和解吸率最高，分别为54%和90%。说明AB 8型大孔树脂可以作为分离纯化多糖的材料。     

石榴果实的糖酸组成及风味特点

采用高效液相色谱法测定4种石榴成熟期果实中糖和酸的组成,并对其味感值和糖酸组分与果实风味指标间的相关性进行分析。结果表明,石榴果实中可溶性糖组分有蔗糖、葡萄糖、果糖和山梨醇,其中葡萄糖和果糖含量最高,分别占总糖含量的43.84%~48.36%和49.18%~50.67%。4个品种中,"玉石籽"的总糖含量最高,"白皮"的最低。石榴果实中主要有机酸是奎宁酸、琥珀酸、草酸、L-苹果酸、莽草酸、柠檬酸和D-苹果酸,其中"玛瑙籽"的总酸含量最高,"青皮"的最低。石榴果实中果糖的味感值最大、其次是葡萄糖;味感值最大的酸是奎宁酸,其次为柠檬酸。相关性分析结果表明,石榴果实的糖酸比与甜味/酸味比值之间呈极显著正相关,各品种间糖酸比(甜味/酸味比值)的差异主要取决于有机酸的含量,与糖含量无关。综合其风味特点,"青皮"和"玉石籽"是甜味较浓的品种,"白皮"和"玛瑙籽"则是酸味较浓的品种。     

氯酸钾诱导龙眼成花根系内源激素水平及根系活力的变化

研究氯酸钾诱导‘松风本’龙眼成花对根尖内源激素水平和根系活力的影响。结果表明,11月施用5 g/盆的氯酸钾,在其花芽生理分化期间,根系内源激素CTK、IAA含量提高,GA3含量明显降低,ABA含量相对上升;CTK/GA3、IAA/GA3和ABA/GA3比值提高,从而促进花芽分化,诱导龙眼成花;施药后前10 d根系活力下降,后逐渐上升,至40 d时根系活力基本恢复正常。