棉花黄萎病菌致病型的AFLP分析

 选用41个棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)代表菌系,在温室条件下,对4个棉花品种鄂荆1号(感)、中棉所12(耐)、文-5(抗)和唐棉2号(抗)进行致病性测定,结果可将供试菌系分为落叶型与非落叶型2类。选取8对AFLP引物PCR扩增的结果中,统计带型稳定、清晰且有多态性的条带,共169条作系统聚类分析,将上述菌系分为2大类,第一类为非落叶型菌系,包括10个非落叶型菌系和1个过渡菌系;第二类为30个落叶型菌系。根据聚类分析建立树状图,发现菌系与地理来源存在一定的相关性,而依据菌系致病力强弱分类则相关关系不大。选用25对EcoRⅠ和MseⅠ引物组合,对供试的41个V.dahliae进行AFLP扩增,筛选到2对引物E64(GACTGCGTACCAATTCGAC)、M53(GATGAGTCCTGAGTAACCG)和E49(GACTGCGTACCAATTCCAG)、M65(GAT-GAGTCCTGAGTAAGAG),能分别扩增出433bp和110bp2条仅为V.dahliae非落叶型菌系独有的特异片段,可将落叶型与非落叶型菌系分开,这2条特异片段被命名为EM₄₃₃和EM₁₁₀。     

一个与稻瘟病菌无毒基因AVR-Pik~m连锁的SCAR标记的分离

 本研究将以前在稻瘟病菌菌株S1522获得的与决定对水稻品种梅雨明无毒性的基因(AVR-Pik^m)相连锁的1个RAPD标记OPO12₁₀₀₀进行了克隆和鉴定。核苷酸序列测定与分析结果表明:OPO12₁₀₀₀的大小为946个碱基,不含有与已报道的稻瘟病菌Mg-SINE、Fosburry、Magyy、Grasshopper、Pot2以及Pot3等同源的重复序列。根据OPO12₁₀₀₀的核苷酸序列,设计了1对24个核苷酸的特异引物,对无毒表型亲本S1522和毒性表型亲本S159、无毒表型群体基因池、毒性表型基因池以及有性杂交后代108个菌株进行了PCR扩增,所有无毒表型的菌株均能特异性地扩增出1条与OPO12₁₀₀₀大小相同的DNA条带,而毒性表型的菌株除5个重组个体外,均不能扩增出这条特异带。此结果表明,与稻瘟病菌无毒基因AVR-Pik^m连锁的RAPD标记OPO12₁₀₀₀被成功地转化为SCAR标记,为进一步通过染色体步移克隆该无毒基因奠定了基础。     

转基因水稻对稻瘟病的抗性研究

 采用苗期初筛、复筛、抗谱测定和田间自然诱发试验等不同鉴定方法,对经分子检测证明已整合有碱性几丁质酶基因和β-1,3-葡聚精酶基因的22个转化系的转基因水稻植株进行稻瘟病抗性鉴定研究,筛选出对稻瘟病的抗性比原种对照七丝软占有明显提高的一系列转基因水稻品系,其中表现高抗的有来自F4-9转化株系的7个品系。高抗材料的R7代品系,经室内抗谱测定及田间病圃试验结果,仍然表现高抗稻瘟病。本研究通过转基因技术,成功地将优质感病品种改良成高抗品系,研究结果证明了利用基因工程手段培育抗病水稻新品种是一个非常有希望的育种途径。     

从海南省杂草胜红蓟和假马鞭上检测到粉虱传双生病毒

 利用三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)及PCR检测的方法对采自海南的胜红蓟(Ageratum conyzoides)和假马鞭(Stachytarphetajamaicensis)的5个病样进行了检测,表明均为粉虱传双生病毒。PCR扩增产物克隆后进行序列测定,结果表明存在2类双生病毒,其中样品Hn2存在2类病毒的复合侵染。这是在海南首次报道存在有粉虱传双生病毒。     

菜豆萎蔫病菌的种子检验鉴定技术研究

本研究对我国一类检疫性有害生物菜豆萎蔫病菌Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｃｃｕｍｆａ－ｃｉｅｎｓｐｖ．ｆｌａｃｕｍｆａｃｉｅｎｓ（Ｃｆ）进行种子检测鉴定技术的研究，发现５２３，ＮＢＹ＋ＴＴＣ和ＮＢＹ＋刚果红三种培养基均可作为分离培养基；对带菌种子分离的灵敏度为１．８×１０２ｃｆｕ／ｍｌ，病叶柄和茎是分离的最佳部位，病菌可通过种子传给种苗引起种苗发病，发病时间为７～２０天，针刺接种是Ｃｆ最有效的接种方法，接种发病率为１００％。使用标准化的Ｂｉｏｌｏｇ鉴定系统鉴定病原，在种水平的鉴定准确率达９８．５％。     

云南引进帝国百脉根的研究

对引进帝国百脉根进行茎叶比、干鲜比、干草产量、营养成分和体外干物质消化率(IVDMD)的测定。结果表明，帝国百脉根含有丰富的营养，分枝期和盛花期粗蛋白含量分别高达28．0%和20．79%，粗纤维含量为13．0%和17．46%，Ca、P 丰富，比例恰当，体外干物质消化率较高而稳定，在分枝期和开花期分别为58．64%和57．25%。因此，帝国百脉根为饲用价值较高的优良豆科牧草，应予以进一步开发利用。     

利用远缘杂交创造核果类果树新种质的研究

以桃、杏、李、樱桃、杏梅等果树的 1 4个品种为亲本 ,3年来共进行了 80余个组合的远缘杂交试验 ,探讨了核果类果树远缘杂交的亲和性 ,并对远缘杂种幼胚进行了胚抢救。结果表明 ,铃铛花期授粉的坐果率显著高于初花期授粉 ;同一杂交组合 ,正反交坐果率差异显著 ,母本对远缘杂交亲和性影响很大 ,选择自交亲和或自然坐果率高的种或品种做母本容易克服远缘杂交的不亲和性 ;适宜场强的静电场、He -Ne激光处理及60 Coγ射线与He -Ne激光联合处理花粉 ,均能显著提高花粉离体萌芽率 ,用上述处理的花粉进行的远缘杂交坐果率也明显高于对照 ;60 Coγ射线单独处理则降低了花粉离体萌芽率 ,远缘杂交的坐果率也低于对照 ;对远缘杂种幼胚及时地进行胚抢救 ,并诱导形成多丛芽 ,是克服核果类果树远缘杂种不育性的有效方法。研究并筛选出了李、樱桃胚萌发与生长、多丛芽诱导与增殖以及生根培养等最佳培养基配方。目前已将欧洲甜樱桃×中国樱桃、大石早生李×泰安巴旦水杏及凯特杏×总统李等一批核果类果树远缘杂种定植于露地 ,其中欧洲甜樱桃与中国樱桃的种间杂种是国内外首次获得     

长期施肥条件下菜田—蔬菜生态系统变化的研究( Ⅳ) 蔬菜生态系统的变化

 以2002 年设施番茄栽培为代表计算其N、P、K投入量与携出量之间的表观平衡状态, 其结果基本上和14.5 年后的土壤实测值与设施栽培本底值之间纵向比较的增长关系一致, 前者只能说明系统养分变化的趋势, 后者才是实际的养分盈亏状态, 养分盈亏主要取决于有机肥的施用与养分元素的供给。5个代表性处理模拟了蔬菜施肥的不同现状, 从土壤肥力及产量等方面的变化真实反映出各自的系统变化及发展趋势, 在本试验条件下以ANK施肥下的系统最优。对有机肥施用、化学肥料的配施以及测土施肥等问题进行了探讨。     

甘肃省生态环境综合评价指标体系研究

甘肃省生态系统分为社会经济系统和自然生态系统两大类 ,社会经济系统指标体系由社会经济条件和人为环境压力构成 ;自然生态系统由水环境、森林生态系统、草地生态系统和土壤生态系统四个次一级系统组成 ,每个次一级生态系统由各自所属指标体系来系统评定。利用因子分析法、Delphi法和头脑风暴法经过多次综合专家意见最终确定 2 6项指标作为甘肃省生态环境质量综合评价体系。利用层次分析法 (AHP)定量各指标的权重。通过综合评价表明 ,甘南州、陇南地区、张掖地区的生态环境质量较好 ,甘肃中部广大黄土高原地区次之 ,河西走廊的武威市、金昌市和嘉峪关市环境质量最差。评价结果真实地反映了甘肃省生态环境的基本状况 ,说明该指标体系具有科学性 ,能够用于不同地区之间或同一地区不同时间的环境质量对比与变化研究。     

Changes of Ca2＋ activated potassium channels and cellular-proliferation in autogenous vein grafts

AIM: To investigate changes of Ca^2＋ activated potassium channels (K_Ca) in autogenous vein grafts. METHODS: The contraction of venous ring was measured by means of perfusion in vitro. The intimal proliferation and proliferation of cultured smooth muscle cells (vascular smooth muscle cells, VSMCs) were observed by the means of computerised image analysis and MTT method, respectively. Furthermore, whole cell mode of patch clamp was used to record K_Ca of VSMCs isolated from autogenous vein grafts. RESULTS: 1 week after transplantation there were no significant differences of contraction and intimal relative thickness between autogenous vein grafts and control. Contraction and intimal relative thickness of autogenous vein graft were significantly increased 2 weeks after transplantation (P＜0.05, n=8 vs control), and they were more enhanced 4 weeks after vein transplantation (P＜0.01, n=8 vs control). TEA (blocker of Ca^2＋ activated potassium channels) increased MTT A₄₉₀ value of VSMCs from femoral vein in a dose-dependent manner (P＜0.05, n=8). K_Ca current density was significantly attenuated in VSMCs from autogenous vein grafts 1-4 weeks after transplantation (P＜0.05, n=5). CONCLUSION: K_Ca was inhibited in autogenous vein graft, which accounted for vasospasm and intimal proliferation.