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1.
狂犬病病毒SRV9克隆株核蛋白基因的克隆、表达与特性分析 总被引:4,自引:0,他引:4
根据已发表的狂犬病病毒核蛋白基因序列,设计并合成了一对引物,从SAD株驯化的SRV9。蚀斑株中提取病毒RNA,通过RT-PCR扩增出核蛋白的全长cDNA序列,测序结果显示,其序列与国外报道的SAD母源株序列一致。将核蛋白的cDNA克隆至原核表达载体pET-28b( )中,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyss,于30℃1mmol/LIPTG条件下诱导表达,大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE分析,在分子量约为56kDa处出现一新的蛋白带。和预期的目的蛋白分子量相符,Western-blotting检测表明,表达产物能与狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应,出现单一反应带,扫描分析显示,表达产物占菌体总蛋白的23%,包涵体分离,纯化后,纯度达89%,上述结果为核蛋白在狂犬病基因免疫和免疫检测中的进一步应用奠定了基础。 相似文献
2.
CIDR、PMSG、FSH联合使用对初产供体羊Borderdale(波德代)3♂15♀、Poll Dorset(无角陶赛特)5♂18♀和Ger-man Mutton Merino(德国肉毛兼用美利奴—德美)3♂15♀进行同期发情和超数排卵。同期化发情波德代、无角陶赛特和德美分别为100.00%、88.89%和93.33%,羊只同期化发情时间经历和各时间点分布3个品种各有特点。超数排卵效果品种间存在差异,波德代、无角陶赛特、德美分别为6.60±2.97(枚)、3.63±2.25(枚)、5.50±3.32(枚),波德代极显著地高于无角陶赛特(P<0.01)。超排有效率波德代、无角陶赛特、德美分别为100.00%、87.50%、92.86%。未受精卵波德代极显著地高于德美羊和无角陶赛特羊(P<0.01)。胚胎总数德美羊极显著地高于波德代(P<0.01)。有效胚胎波德代羊、无角陶赛特羊、德美羊分别为2.40±2.31、2.75±2.05、4.07±3.79,德美极显著地高于波德代(P<0.01)。同一方法进行同期化发情,羊只经历时间和各时间点均衡分布能否有效控制是同期发情的焦点问题,是有效胚胎数目差异的主导因素之一。 相似文献
3.
4.
5.
6.
JEV、PPV、PRRSV、PRV多联PCR的应用研究 总被引:3,自引:0,他引:3
用 JEV、PRRSV二联 PCR,PPV、PRV二联 PCR以及这 4种病毒 4联 PCR对来自内蒙、广州、广西、天津、北京、吉林病料进行检测 ,共检了 1 4 6份病料。其中 PRRSV阳性 7份 ,PPV阳性 1 2份 ,PRV阳性 2 1份 ,PRV和 PPV混合感染 4份。并对 5份人工接种 JEV小鼠病料检测 ,其中 4份为阳性。随后对部分阳性 PCR扩增产物进行点杂交和核苷酸测序鉴定 ,证实了 PCR扩增准确性。对内蒙 PRRSV阳性扩增带测序结果显示 ,我国流行 PRRSV为美洲型 ,在扩增片段的核苷酸序列上有 3个碱基差异 相似文献
7.
用奶牛乳房炎多联苗 (B)免疫家兔 ,14 d血清中金黄色葡萄球菌抗体效价可达 1∶ 8,2 8d抗体水平明显升高 ,可达 1∶ 32 ,注苗后 35 d攻毒 ,攻毒后 2 d保护率为 93.3% (14 /15 ) ,自然保护率为 2 0 % (1/5 ) ,10 d保护率为 6 6 .6 % (10 /15 ) ,自然保护率为 2 0 % (1/5 ) ;用多联苗 (B)臀部肌肉注射免疫泌乳牛 ,试验期间 4个月内 ,3ml剂量组临床型乳房炎月平均发病率为 11.0 9% ,其对照组为 2 0 .19% ,发病率降低 4 5 .2 9% ,差异极显著 (P<0 .0 1) ;5 m l剂量组月平均发病率为 13.0 1% ,其对照组为 31.36 % ,发病率降低 5 8.5 1% ,差异极显著 (P<0 .0 1) ;3ml剂量组与 5 m l剂量组之间发病率无明显差异 (P>0 .0 5 ) ;注苗后泌乳牛血清抗体水平可持续 4个月 ,且 30 d时效价水平最高。 相似文献
8.
Oded Cohen Ozgur Batuman Yoni Moskowits Alexander Rozov Elisha Gootwine Munir Mawassi Moshe Bar-Joseph 《Phytoparasitica》2005,33(2):141-148
Mechanical inoculations with contaminating tools and propagation of infected budwood were considered the main causes for the
omnipresence of multiple viroid species among citrus and other Middle Eastern and Mediterranean fruit trees and grapevines.
However, neither means could explain viroid infections of wild trees — scattered on terrains inaccessible to humans — nor
the finding of similar viroids among graft-incompatible plants. Northern hybridization of RNA extracts made of scrapings from
the surfaces of goat (Capra hircus) horns that were rubbed against etrog (Citrus medica) stems infected with a citrus viroids complex, revealed accumulation of considerable amounts ofCitrus exocortis viroids (CEVd) andHop stunt viroids (HSVd). Experimental transmission of both CEVd and HSVd was obtained by rubbing healthy citrus plants with goat horns that
had been rubbed 24 h earlier on infected etrog stems. These results implicate goats as possible vectors of viroids. Transmissionvia goats could have facilitated the long-range spread of viroids among cultivated and wild plants andvice versa and also among graft-incompatible plants. 相似文献
9.
柑橘裂皮病类病毒的一步RT-PCR法检测及其在甜橙体内的分布 总被引:3,自引:0,他引:3
柑橘裂皮病是由柑橘裂皮病类病毒(Citrusexocortisviroid,CEVd)引起的一种重要的柑橘病害。分别采用快速微量核酸提取法和SDS-KAc抽提法在表现症状的Etrog香橼中提取核酸,采用一步RT-PCR法对CEVd进行检测,结果显示SDS-KAc法可以消除带毒样品中非特异性条带。从嫁接接毒的铜水72-1锦橙植株的接穗部取嫩叶、老叶、皮,从砧木部茎杆上取老皮以及根皮分别提取总核酸进行RT-PCR检测,分析CEVd在甜橙体内的分布情况。初步检测结果表明在接穗的嫩叶、老叶、皮,砧木部茎杆的老皮和根皮上都可以检测到CEVd,以接穗部叶和皮检出稳定性高。 相似文献
10.
摄入不同能量的围产期乳牛肝低密度脂蛋白受体mRNA丰度的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
将30头健康、经产、处于围产期的黑白花乳牛随机分为3组,每组10头。从产前28d开始,低能量组乳牛饲喂《中国奶牛饲养标准(2000)》减少20%日粮(能量摄入80%),对照组乳牛饲喂《标准》日粮(能量摄入100%),高能量组乳牛饲喂《标准》增加20%日粮(能量摄入120%),产后各组乳牛均饲喂标准日粮。至产后第56d结束试验;采用内对照RT-PCR方法检测摄入不同能量的围产期乳牛肝活体组织低密度脂蛋白受体(LDLR)mRNA丰度。结果,不同能量组乳牛肝LDLR mRNA丰度产前至产后均呈现先升高后降低的趋势。100%和120%能量组肝LDLR mRNA丰度在产后14d达最大值,且产后均高于产前(产后56d除外,P〈0.01或P〈0.05);而80%能量组产后1d即达到最大值,产前14d至产后14d,LDLR mRNA相对表达量显著高于100%和120%能量组;产后28~56d,120%能量组显著高于80%和100%能量组(P〈0.01)。表明围产期乳牛能量摄入水平对肝LDLR mRNA丰度有显著影响。 相似文献