Programmed Cell Death Induced by (?)-8,9-Dehydroneopeltolide in Human Promyelocytic Leukemia HL-60 Cells under Energy Stress Conditions

(+)-Neopeltolide is a marine macrolide natural product that exhibits potent antiproliferative activity against several human cancer cell lines. Previous study has established that this natural product primarily targets the complex III of the mitochondrial electron transport chain. However, the biochemical mode-of-actions of neopeltolide have not been investigated in detail. Here we report that (−)-8,9-dehydroneopeltolide (8,9-DNP), a more accessible synthetic analogue, shows potent cytotoxicity against human promyelocytic leukemia HL-60 cells preferentially under energy stress conditions. Nuclear morphology analysis, as well as DNA ladder assay, indicated that 8,9-DNP induced significant nuclear condensation/fragmentation and DNA fragmentation, and these events could be suppressed by preincubating the cells with a pan-caspase inhibitor, N-benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp(OMe)-fluoromethylketone (zVAD). Immunoblot analysis demonstrated the release of cytochrome c from the mitochondria and the cleavage of full-length caspase-3 and poly(ADP-ribose) polymerase (PARP). These results indicated that 8,9-DNP induced caspase-dependent apoptotic programmed cell death under energy stress conditions. It was also found that 8,9-DNP induced non-apoptotic cell death in the presence/absence of zVAD under energy stress conditions. Immunoblot analysis showed the intracytosolic release of apoptosis-inducing factor (AIF), although it did not further translocate to the nucleus. It appears most likely that, in the presence of zVAD, 8,9-DNP triggered necrotic cell death as a result of severe intracellular ATP depletion.     

诺沃霉素A对茶轮斑病的防治效果

茶轮斑病是茶树的一种重要叶部病害,防治该病害通常使用化学杀菌剂。化学杀菌剂的频繁使用易使病菌产生抗药性并造成农药残留,因此,需要更为安全有效的防治方法。诺沃霉素A是由植生链霉菌HEBRC-20821分泌的一种新型32元环大环内酯类化合物。本研究探索了诺沃霉素A在离体条件下对拟盘多毛孢的抑菌活性及对感染茶轮斑病离体叶片的防治效果。诺沃霉素A在离体条件下对茶拟盘多毛孢的菌丝生长具有强烈抑制作用,抑制中浓度为2.11μg/mL。当用5μg/mL诺沃霉素A处理菌丝后,在显微镜下可见茶拟盘多毛孢菌丝形态发生异常。在离体叶片条件下,诺沃霉素A在75和150μg/mL浓度下对茶轮斑病防效分别为68.29%和100%。在2 000和4 000μg/mL浓度下诺沃霉素A对茶叶没有产生药害。诺沃霉素A有望成为防治茶轮斑病的一种新型药剂。     

利用链霉素耐药性突变筛选抗菌活性放线菌

利用链霉素耐药性突变,从天然无抗菌活性或活性微弱的12株放线菌中筛选活性菌株。在链霉素浓度为25 μg/mL时共获得99株耐药菌株。通过抑菌活性测定,发现7株耐药突变菌株的发酵液产生了抑制细菌活性,其中仅耐药突变株67S-14所产生活性物质的遗传性能稳定。室内抑制真菌活性测定结果表明:菌株67S-14发酵液对玉米大斑病菌Exserohilum turcicum、番茄灰霉病菌Botrytis cinerea和棉花枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum的抑制率较原始菌株No.67提高50%以上。该突变株在菌落形态方面与原始菌株存在较大的差异。Doskochilova溶剂系统纸层析结果表明,该活性物质可能为大环内酯类抗生素。HPLC分析结果表明,该抗生素可能是突变菌株67S-14产生的代谢产物。     

水产品中7种大环内酯类抗生素残留量的HPLC-MS/MS测定法

建立了水产品中7种大环内酯类抗生素[竹桃霉素（OLD）、红霉素（ERM）、吉他霉素（KIT）、交沙霉素（JOS）、螺旋霉素（SPI）、替米考星（TIL）和泰乐菌素（TYL）]残留检测的HPLC-MS/MS法。样品经乙腈提取,中性氧化铝和正己烷净化后,以选择反应检测模式检测,基质匹配标准工作曲线定量。在1～100 ng·mL-1范围内,7种药物的峰面积与质量浓度的线性关系良好（R2〉0.995）。试验选择不同阴性样品为试样,在4μg·kg-1、20μg·kg-1和40μg·kg-1添加水平下的回收率为75.4%～108%,相对标准偏差为0.665%～12.9%。方法的检出限为1μg·kg-1,定量限为4μg·kg-1。该方法简单,灵敏度高,重现性好,可为水产品中7种大环内酯类抗生素残留的检测提供技术支持。     

大环内酯类抗生素研究进展

大环内酯类抗生素是一类化学结构和抗菌作用相近的药物。因其抗菌活性强、抗菌谱广、疗效显著和不易产生耐药性等优点而被广泛应用于临床。研究表明 ,大环内酯类抗生素能与细菌核糖体 50 s亚单位的 L 2 7及 L 2 2蛋白质结合 ,抑制细菌的蛋白合成而发挥抗菌作用。近年来 ,其家族新成员不断涌现 ,种类逐渐增多 ,并且新一代大环内酯类抗生素具有对酸稳定性好、半衰期长、组织药物浓度高等特点 ,不仅在感染性疾病治疗中起着极为重要的作用 ,而且在非感染性疾病发挥着独特的疗效。目前 ,其作用机制、构效关系、动力学特征和耐药机制逐渐被人们所认识 ,使这类药物的应用前景更加广阔。然而 ,大环内酯类抗生素有一定的毒性 ,尤其是静脉注射时会产生肾毒性、低血钾症和血栓性静脉炎等副作用 ,因此临床应用时应注意克服     

拮抗放线菌A02活性产物的分离和鉴别特性研究

为了明确利迪链霉菌A02抑菌活性物质的分离和鉴别特征,利用pH纸层析和纸电泳试验检测了其离子特性,有机溶剂萃取和硅胶薄层色谱分离测定了其极性,捷克八溶剂系统纸层析、紫外光谱扫描、官能团化学反应和蛋白酶敏感性试验分析了其化学类型.结果表明,菌株A02代谢活性产物在酸性和碱性溶液中呈电中性,但其极性较强,能被正丁醇高效萃取...     

一种抗真菌抗生素的分离纯化及初步鉴定

从海南五指山采集的土样中分离到一株放线菌,编号为WS-23883,其发酵提取物对多种植物病原真菌具有很强的抑制活性。对其产物进行提取精制及制备液相纯化,获得了纯度达90%以上的化合物。生测表明,在20μg/mL浓度下该抗生素对多种植物病原真菌的抑制率达100%。根据活性产物紫外吸收光谱,可判断其为一多烯大环内酯类抗生素。质谱分析表明,活性化合物分子质量约667 u,据此判断其为一四烯大环内酯类抗生素。