猪肺炎支原体膜蛋白的电泳分析及免疫印迹检测

以猪肺炎支原体Z株为试验材料,采用SDS-PAGE和Western印迹对该菌膜蛋白进行了分析。研究表明:猪肺炎支原体经A_(26)液体培养基培养,15000 r/min离心收集菌体细胞,低渗超声法破膜获得膜制剂后,应用12.5％的凝胶对膜蛋白进行SDS-PAGE分离,在电泳图谱上呈现出36条蛋白带,相对分子质量范围为1.18×10~4～9.12×10~4。同时以膜制剂作为抗原,分4次免疫试验兔,心脏采血,提取抗血清,并分离纯化得到IgG,然后进行Western印迹法检测。其结果发现在SDS-PAGE分离得到的36种膜蛋白(或多肽)中,有6种蛋白具有免疫原性。     

‘新红星’苹果果实蔗糖合酶的活性及亚细胞定位

 在‘新红星’苹果果实发育过程中, 伴随果糖、葡萄糖和蔗糖的积累, 蔗糖合酶的分解活性逐渐下降, 而合成活性逐渐升高。苹果果实的蔗糖合酶由分子量为90 kD 的亚基组成, 其免疫信号强度随发育进程而增加。蔗糖合酶主要定位于果肉细胞的细胞质中, 发育中后期该酶的分布密度有一定增加。综合结果认为, 蔗糖合酶调控发育早期蔗糖的降解和发育后期蔗糖的积累。     

试析费孝通西部大开发的人文生态思想

著名社会学家费孝通先生为了西部的发展开展了广泛的社会调查,研究了当地少数民族的历史和现状。他发现有关西部开发主要集中在物质文明和经济利益层面,忽略了文化艺术。在费孝通看来,西部的贫困与生态失衡之间有着密切的关系,他指出生态平衡是西部大开发的根本,民族共同繁荣是西部大开发的重点,人文资源是西部大开发的宝库。因此,他提出要保护、开发和利用西部的人文资源,认为只有将人文和地理结合起来考察西部的开发,才是我国经济发展逐步发育成熟的表现,只有这样才符合邓小平关于我国现代化建设＂两个大局＂战略思想,符合我国全面推进社会主义现代化建设的战略部署     

Citizens’ perception of and satisfaction with urban forests and green space: Results from selected Southeast European cities

In this paper the results of the first comprehensive study on perception of and satisfaction with urban forests and green space in seven Southeast European cities are presented. The aims of the paper are to analyse 1) citizen perceptions of the current state of urban forests and green space in their cities, 2) to what extent current urban forests and green space meet their needs and how this can be improved. A cross-sectional study was conducted by using a common face-to-face survey questionnaire. Respondents were selected based on census data though a stratified sampling procedure by taking into account age, gender and city district (n = 384 in each city). The results showed that citizens genuinely care for urban forests and green space in their cities, but are not satisfied with their current state. The respondents found issues related to misbehaviour of other users, the presence and quality of facilities, as well as the presence and quality of management or maintenance the most pressing. There were more statistically significant differences than similarities between cities. Socioeconomic variables explained perceptions only to some extent. Citizens were very supportive of educational campaigns about the importance of urban forests and green space as well as of better enforcement of the existing regulations though having more community wardens that were expected to tackle current unsatisfactory situations. Urban planning and urban forest and green space management in these cities are facing many problems characteristic for post-socialist countries. Study findings are expected to contribute to decision making in urban planning and natural resource management.     

大鼠成熟的肺表面活性蛋白B的原核表达及纯化

为表达和纯化SP-B蛋白,先对SP-B基因进行稀有密码子优化,PCR反应获得SP-B片段,构建重组质粒pGEX4T-1/SP-B,转化到E.coli BL21(DE3)中诱导表达;用SDS-PAGE与Western blot进行检测;用GSTPrep FF 16/10对融合蛋白进行纯化。经双酶切鉴定证实质粒中插入基因长250bp,测序结果与大鼠SP-B cDNA序列相符;质粒转化后用IPTG进行诱导,在分子质量约34ku处出现1个新条带,与pGEX4T-1/SP-B蛋白预期大小一致,且该融合蛋白能可溶性表达并被纯化。结果表明成功构建了pGEX4T-1/SP-B重组质粒,表达、纯化得到GST/SP-B蛋白,为研究肺表面活性物质替代药物奠定了基础。     

西方语境的中国古典园林审美认知历史溯源

中国古典园林审美不仅仅在中国文化体系中进行讨论，随着全球化进程，西方语境学者也逐渐涉及相关的内容。尝试寻找一种跨文化的“他者”视角，梳理近3个世纪以来西方语境的中国古典园林审美认知经历的3个主要阶段。以18世纪为开端，经过19—20世纪借助西译艺术著作和海外园林建设实现对审美理解从印象到真实的转变，到进入21世纪后诞生的跨学科的诸多新观，这个过程中展现出以中国传统园林审美为代表的打破自身线性历史的闭关自守，回归全球语境的未来中国古典园林研究趋势。     

广州近代城市公园的中西合璧特征探析

广州近代城市公园设计精巧,风格独特,在岭南造园史上具有重要地位。结合历史图文资料,运用风景园林史学和风景园林美学相结合的研究方法,归纳分析其造园特征。广州近代城市公园的中西合璧特征主要体现在3个方面:因地制宜的空间布局、中西融合的建筑小品、多姿多彩的植物景观。探析其中西合璧特征,有利于丰富岭南近代园林历史与理论研究,推进对广州近代城市公园的保护与造园智慧的传承。     

论“西方经济学”教学中的学生职业能力培养

随着社会经济的飞速发展,培养学生职业能力的重要性日益突出。当前＂西方经济学＂课程教学存在着课程实验内容的不足、教学活动创新性不够、教学主体参与性不强以及分析方法缺乏归纳和整理等问题,对学生专业实践、职业转换、社会交往、综合运用方面的能力培养造成不利影响,因而需要合理规划与选择,以培养出社会所需的＂一专多能＂的人才。     

西方经济学多元化教学改革模式初探

随着社会改革和经济社会转型的不断深入,普通高校中西方经济学的教学工作正面临着一个重要的历史命题———如何对教学工作和教学模式进行改革,使其适应时代发展的需要,为社会提供适合社会要求的智力资源。本文以此为契机,对西方经济学多元化教学模式的改革问题进行了研究。旨在通过本文的工作,为西方经济学的教学工作提供一定的思想借鉴。     

山羊TNNT3基因可变剪切及其对骨骼肌细胞分化的作用

【目的】快速骨骼肌肌钙蛋白T（fast skeletal troponin T3,TNNT3）作为肌钙蛋白(troponin, Tn)家族成员,调节横纹肌收缩、参与骨骼肌的生长发育并影响家畜肉质性状。通过获得山羊TNNT3基因的可变剪切体,分析山羊TNNT3基因可变剪切的表达模式及其在肌细胞分化中的作用,深入解析TNNT3基因在山羊骨骼肌生长发育过程中的作用机制。【方法】基于NCBI已公布山羊TNNT3基因（NM_001314210.1）和牛TNNT3基因（XM_010821200）mRNA序列,使用软件Primer Premier 6.0设计引物,以简州大耳羊胚胎期和出生后7个阶段骨骼肌为试验材料,克隆测序获得山羊TNNT3基因的CDS区可变剪切体,利用软件ORF Finder、EditSeq、DNAMAN、ClustalW和MEGA_X_10.1.8等对序列进行生物信息学分析;进一步设计实时荧光定量（real-time PCR,RT-qPCR）及半定量引物,研究TNNT3基因剪切体在7个不同组织（背最长肌（longissimus dorsi muscle,LD）、半膜肌（semimembranosus muscle,SM）、心、肝、脾、肺、肾）和7个发育阶段（胚胎期E75、E90、E105和出生后B3、B45、B150、B300）肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中表达模式;此外,对转录本TNNT3_3进行体外编码能力检测确定其具有编码蛋白的能力,并在山羊骨骼肌卫星细胞（skeletal muscle satellite cells,MuSCs）中过表达,观察细胞形态变化以及检测标志基因的表达变化,研究其对山羊MuSCs分化的作用。【结果】①TNNT3（NM_001314210.1）CDS区全序列主要含有18个外显子,其中外显子16/17相互排斥,转录后单一表达。克隆发现山羊TNNT3基因 5个新转录本（TNNT3_1—5）,其外显子数分别是15、15、20、16、14。②生物信息学分析结果显示山羊TNNT3基因核苷酸序列和氨基酸序列与绵羊、牛、猪等哺乳动物具有很高的一致性,而与鱼类和爬行类动物的一致性较低,说明TNNT3基因序列在哺乳动物高度保守。③TNNT3 mRNA在背最长肌、半膜肌、心、肝、脾、肺、肾7个组织中都有表达,其中在骨骼肌中高度富集(P < 0.01),心脏及肺次之,其余组织中较低;TNNT3 mRNA在背最长肌和半膜肌中的表达始终处于一个动态变化中,胚胎期TNNT3在半膜肌的表达量高于背最长肌（P<0.05）;出生后则背最长肌中高于半膜肌（P<0.05）。④山羊TNNT3基因转录本TNNT3_3重复出现保守的外显子9—11（138bp）,体外翻译实验显示其可编码蛋白且蛋白大小与预期基本相符（37 kD）;相较于对照组,在山羊MuSCs中过表达该转录本使肌分化标志基因Myomaker、MyoG和MyH4 mRNA极显著升高(P < 0.01)。【结论】获得了山羊TNNT3基因具有完整CDS区5个新可变剪切体,TNNT3主要在肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中高表达,在哺乳动物中高度保守且促进成肌分化。初步表明TNNT3基因在动物肌肉生长发育中具有重要的生物学功能。