猪红细胞抗原国际标准抗血清的制备研究

 利用俄罗斯及德国提供的抗猪红细胞抗原42种国际标准抗血清,检测了154头萍乡二头乌猪,68头汉普夏×萍乡杂交猪及43头万安花猪11个基因位点的抗原型及基因型,并利用凝集反应和溶血反应检测了萍乡二头乌猪84头母猪体内“自然抗体”的存在种类与效价,在此基础上,选定了33对供受体猪按计划进行同种免疫。先后共采集了33头受体猪近4000ml抗血清,通过吸附试验,制备了15个单价抗血清,其中5种已与国际标准统一,另外10种是否为中国猪所特有,需要进一步确定。     

鱼呼肠孤病毒(FRV)抗血清的制备及其应用

在FRV的分离和纯化基础上，本文介绍了制备FRV抗血清的几种方法。并采用不连续对流免疫电泳法(DCIE)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行FRV诊断学研究结果，同时对这两种方法检测FRV的灵敏度作了比较。     

大麦黄矮病毒GPV株系外壳蛋白基因在E.coli中的表达及抗血清制备

 病毒外壳蛋白基因经适当引物逆转录成cDNA后,应用聚合酶链反应(PCR)扩增,得到大麦黄矮病毒(BYDV)GPV株系的外壳蛋白(CP)基因。将此基因克隆至表达载体pMal,转化E.coli TB1,诱导表达了携带外壳蛋白的融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的7%,此融合蛋白的分子量约为60kD,经亲和层析纯化后免疫家兔,获得BYDV-GPVCP的抗血清。     

多抗间接ELISA方法的建立及其在海洋细菌快速检测中的应用

为了从对虾体内分离出的菌株中快速筛选出蜡样芽孢杆菌和溶藻胶弧菌,将蜡样芽孢杆菌与溶藻胶弧菌作为抗原,免疫SPF新西兰大白兔,获得免疫血清,效价均高于1:2000。将免疫兔血清作为一抗,HRP-羊抗兔血清作为二抗,建立了蜡样芽孢杆菌和溶藻胶弧菌快速检测的间接ELISA方法。此方法中,兔抗血清最佳稀释度为1:10000,菌液最佳包被浓度为106 CFU/ml;HRP-羊抗兔血清最佳稀释浓度为1:1000,可检测细菌最低浓度为104 CFU/ml。抗蜡样芽孢杆菌血清与苏云金芽孢杆菌有交叉反应,抗溶藻胶弧菌血清与其亲缘相近菌株无交叉反应,具有较强的特异性。2012年和2013年,分别从斑节对虾、中国对虾、凡纳滨对虾等9批样本中分离纯化到109株海洋细菌,利用建立的多抗间接ELISA方法对其中部分菌株进行快速检测,共检测出6株溶藻胶弧菌,未检测出蜡样芽孢杆菌。