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结合提取基因组DNA的CTAB法(hexadecyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵)和用于提取海藻基因组DNA的LiCl法,设计了针对产生较多荚膜多糖细菌的DNA提取方法—LiCl沉淀法。通过电泳、分光光度计及16SrRNA基因扩增检测,证明LiCl沉淀法可以有效地提取产荚膜细菌基因组DNA,其片断大小约为23kb,不需进一步纯化即可用于后续分子生物学实验。 相似文献
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木材纤维素在LiCl/DMAc溶剂体系中的溶解特性 总被引:3,自引:0,他引:3
为了使木材纤维素改性以制备功能材料,该文研究了木材纤维素在LiCl/DMAc中的溶解特性,确定LiCl在木材纤维素溶剂体系中的重要作用,进一步验证了溶解机理,并对溶解产物进行了红外光谱分析.结果表明:①LiCl在LiCl/DMAc溶剂体系中起重要的作用,可与木材纤维素生成中间络合物,减少纤维素分子之间的氢键作用,提高其溶解性能.②非水溶剂法是对木材纤维素溶解的较好方法,红外谱图分析表明,在纤维素的特征吸收宽峰—OH的位置(3 400 cm-1),其吸收强度大大减小,即纤维素羟基缔合程度减小,分子间氢键受到破坏.③LiCl/DMAc溶剂体系能有效地溶解木材纤维素,为木材纤维素改性制备功能材料提供了较好的均相合成体系. 相似文献
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一种适用于多糖多酚植物的高质量RNA快速提取方法 总被引:1,自引:0,他引:1
植物总RNA的提取是进行下游分子生物学实验的关键基础,高质量的RNA是下游实验成功的保障。许多植物由于其体内含有酚、多糖以及其他的一些次生代谢物,要获得这些植物高质量的总RNA比较困难。本文在多次实验的基础上,提出了改良LiCl沉淀法,该方法步骤少、效率高,使用此方法得到的棉花幼苗总RNA经检测表明其质量比使用冷酚法提取的RNA要高得多,且完全满足后续实验的要求。使用此方法成功提取了香蕉叶片、根、木薯叶片的RNA,经检测表明,所得到的RNA完整性好,完全可以满足后续实验的要求,说明改良LiCl沉淀法是一种适用于多酚多糖植物的快速RNA提取方法。 相似文献
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[目的]探讨花生不同组织部位RNA提取方法,为开展花生分子生物学研究奠定基础.[方法]在CTAB法的基础上,设计一种改良的mCTAB-dLiC1法,其使用高质量体积分数的KAC除去组织中的多糖,使用两次10.0 mol/L的LiC1沉淀RNA,采用琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量,核酸蛋白分析仪测定RNA纯度,并通过逆转录、RT-PCR和cDNA-SCoT验证其质量.[结果]采用mCTAB-dLiC1法的RNA产率为554.80 μg/g,RNA的A260/A280比率为1.89,RNA非变性琼脂糖凝胶电泳未出现可见的DNA条带;扩增的28S和18S条带比值为2∶1,且条带清晰无拖尾现象;提取的RNA通过逆转录、RT-PCR扩增和cDNA-SCoT扩增验证,均获得较好的扩增效果,获得的RNA和cDNA质量好.[结论]mCTAB-dLiCl RNA提取方法是一种高效提取花生各组织部位RNA的方法,可在花生分子生物学研究中应用. 相似文献
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目的 筛选泰妙菌素高产菌株。方法 以TMⅡ09—003为出发菌株,经UV照射180s后,将菌悬液均匀的涂布于加有0.8%的氯化锂平板上,在避光条件下于温度26℃~27℃,湿度60%~65%的环境下培养成熟后,进行挑取单菌落、初筛、复筛。以HPLC法测化学效价。结果 经UV照射180s后,氯化锂加量为0.8%剂量对菌株的致死率为88.6%。对用此剂量处理获得的诱变菌株进行了筛选,最终获得4支高产菌株,分别为:TMⅡ09—236、TMⅡ09—253、TMⅡ09—441和TMⅡ09—447。 相似文献
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[目的]探求LiCl喷施糯玉米的最佳使用浓度和最佳喷施次数。[方法]以凤糯2476为供试品种,模拟pH值为3.0的酸雨条件,LiCl喷施浓度设6种:0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00mg/L,喷施1~5次,对糯玉米幼苗喷施后测定其对糯玉米幼苗的营养生长及其生理特性的影响。[结果]在模拟酸雨条件下,喷施0.50mg/LLiCl的处理效果最佳,可以促进糯玉米幼苗生长,增加干物质积累,促进根系生长,提高根系活力;酸雨胁迫次数不同,最佳缓解酸雨胁迫LiCl的浓度也有所差异,随着酸雨胁迫次数增加,缓解酸雨胁迫所需的LiCl浓度也在增加;多次喷施LiCl也可以增加缓解效果,表现在糯玉米株高、茎粗、干重及鲜重增加。[结论]建议在糯玉米生产中提前喷施LiCl,对于酸雨严重地区可以增加浓度及施用次数。 相似文献
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Residual wood meal after extraction of milled wood lignin (WMEM) ofEucalyptus globulus was extracted with alkali and LiCl/N,N-Dimethylacetamide (DMAc). These agents dissolve mainly hemicellulose and cellulose, respectively. The extractability of WMEM in alkali solutions was influenced by the degree of swelling of the cellulose. Under good swelling conditions, considerable amounts of cellulose and lignin were extracted with the hemicellulose. Maximum extractability was about 60% of the WMEM under optimum conditions (3 M or 5 M LiOH or 3M NaOH solution). Some portion of cellulose was extracted with LiCl/DMAc at room temperature. Thus, lignin inE. globulus WMEM was divided into three fractions: hemicellulose-lignin fraction, cellulose-lignin fraction, and insoluble-lignin fraction.Part of this work was presented at the 49th annual meeting of the Japan Wood Research Society, Tokyo, April 1999; and at the 50th annual meeting of the Japan Wood Research Society, Kyoto, April 2000 相似文献
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为筛选出产新农抗702的高产链霉菌702突变株.分别以链霉菌702菌株为试验材料和以庆大霉素为敏感抗生素,NTG-LiCl复合诱变链霉菌702菌株,获得抗庆大霉素突变株.NTG处理90 min对菌株的致死率可达71.56%,抗药性突变率高达19.46%,获得的抗药性突变株经过摇瓶初筛和复筛,获得高产突变株13-18-52菌株,产抗新农抗702的摇瓶发酵单位达到1 946 μg/mL,比出发菌株发酵单位1 416 μg/mL提高了37.43%.采用抗药性致死突变标志的NTG-LiCl复合诱变筛选模型可以获得产新农抗702的链霉菌702高产菌株. 相似文献
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改良CTAB-LiCl法提取枣总RNA体系的建立 总被引:4,自引:1,他引:3
本试验以枣树田间枝条的枝皮及组培苗为材料,应用改进的CTAB法进行了总RNA的提取。针对枣组织中富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用β-巯基乙醇和PVP去除酚类,KAc及无水乙醇去除多糖,LiCl沉淀过夜的方法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,A260/A280介于1.8~2.0之间,A260/A230均大于2.0,证明得到的RNA纯度、完整性和产率均较高,蛋白、多糖及酚类等去除较彻底。结果表明,本试验建立的改良CTAB-LiCl法适于进行枣总RNA的提取 相似文献