Mx蛋白研究进展

Mx蛋白是干扰素诱导表达的抗病毒蛋白家族中的成员之一。人、哺乳动物、鱼类、家禽体内都有Mx蛋白。Mx蛋白具有GTP酶活性 ,在其肽链氨基端均包含一个氨基酸序列高度保守的的三联GTP结合区域 ,羧基端存在有亮氨酸拉链区域。人和鼠的Mx蛋白有抗病毒活性。家禽中鸭的Mx蛋白无抗病毒活性 ;鸡的Mx蛋白的抗病毒活性受 6 31位氨基酸的影响 ,当 6 31位氨基酸为天冬酰胺时有抗病毒活性 ,为丝氨酸时则无抗病毒活性。文章最后对禽类Mx蛋白的应用和展望进行了探讨     

重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性评价方法研究

为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2 ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性;采用细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在DF1细胞上抑制水疱性口炎病毒(VSV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)增殖活性;采用MTS法分别测定重组融合蛋白促鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)和脾淋巴细胞增殖活性。结果表明,重组融合蛋白可以与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应;重组融合蛋白在DF1细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV活性高于抗IBDV活性,且均明显高于rChIFN-α蛋白对照;不同浓度的重组融合蛋白均具有明显的促鸡PBLC和脾淋巴细胞增殖活性,且其促增殖活性明显高于rChIFN-α蛋白对照。本研究成功建立了重组融合蛋白体外活性检测评价方法,为进一步探究重组融合蛋白在鸡体内协同作用奠定基础。     

蛋白水解物的生产和抗氧化活性评价及其作用机理

氧化应激是造成动物衰老和疾病的重要因素。近年来的研究表明,动植物蛋白水解物具有清除体内过剩的活性氧自由基、抑制脂肪氧化等生物活性。蛋白水解物可作为天然抗氧化剂应用于食品和饲料行业,具有广阔的市场前景,并能为蛋白资源开发提供新的思路。本文从蛋白水解物生产工艺与抗氧化活性评价方法介绍出发,着重探讨了蛋白水解物抗氧化活性的影响因素、作用机理及其安全稳定性等问题,并对其在未来研究中的发展方向和应用前景进行了展望。     

中华圆田螺纤溶活性蛋白的 发现及活性研究

纤溶活性蛋白研究是当前研究之一,该蛋白具有良好的溶栓效果。中华圆田螺富含活性蛋白。本实验以中华圆田螺为研究对象,采用硫酸铵分段盐析分离和提取得到了活性粗蛋白。纤溶平板法证明其具有纤溶活性,并研究了温度、pH值、金属离子对其纤溶活性的影响。实验结果表明中华圆田螺活性蛋白最适作用温度为58℃;pH值为7～10范围内影响较小,活性较强;Na~+、K~+对其纤溶活性无影响,Ca~(2+)、Fe~(3+)对其有抑制作用。     

枯草芽胞杆菌DarA蛋白的鉴定及其原核表达

目前,我国全面禁止饲料中添加抗生素,寻找新型的抗生素替代物是当前研究的热点之一。本研究旨在分离枯草芽胞杆菌SXAU18所产具有抗菌活性的蛋白物质,并通过原核表达系统获得其具有抗菌活性的重组蛋白。试验选用硫酸铵沉淀、氯仿抽提、分子截留等蛋白提取技术,对枯草芽胞杆菌SXAU18产生的抗菌蛋白进行分离纯化;通过SDS-PAGE技术和牛津杯扩散法检测分离到的蛋白物质的抑菌活性;通过质谱、生物信息学技术分析预测目的蛋白的基因序列;利用大肠杆菌表达系统和AKTA蛋白纯化系统对目的蛋白进行表达和纯化;借助牛津杯扩散法鉴定重组蛋白的抑菌活性。结果表明,枯草芽胞杆菌SXAU18所产的抗菌物质为相对分子质量15 ku左右的蛋白质,含有共同的特定氨基酸序列—GSSIFGLAPGK,对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌和单增李斯特菌有较好的抑菌活性;通过质谱分析和生物信息学推测SXAU18所产的（主要）抑菌蛋白为DarA;经诱导表达的重组蛋白DarA主要以可溶性上清蛋白形式存在,纯化后的DarA蛋白为单一条带,并具有良好的抑菌活性。结果提示,分离自枯草芽胞杆菌SXAU18的抗菌蛋白DarA具有抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌和单增李斯特菌生长的活性,且可以通过体外表达获取该蛋白。     

大鲵皮肤水溶性蛋白质成分分析及活性鉴定

该试验旨在研究大鲵(Andrias davidianus)皮肤水溶性蛋白成分及其活性,揭示大鲵皮肤黏液的蛋白组分,鉴定具有潜在功能活性的蛋白质。通过物理和化学刺激的方法收集大鲵皮肤黏液,制备大鲵皮肤黏液水溶性蛋白样品,并通过SDS-PAGE垂直电泳、细菌凝集试验、氧化物清除效率试验以及蛋白质谱Label-free分析大鲵皮肤黏液水溶性蛋白的成分以及活性。结果表明:大鲵皮肤黏液中含有多种水溶性蛋白,分子量介于10～300 kDa之间,其中50 kDa分子量以上蛋白条带较为丰富,在100 kDa分子量以上含有较多蛋白,14 kDa以下蛋白含量较少。大鲵皮肤黏液水溶性蛋白对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABST)2种自由基具有清除能力,说明其具有一定的抗氧化活性。大鲵皮肤黏液水溶性蛋白对大肠杆菌和嗜水气单胞菌2种细菌具有较强的凝集作用,暗示大鲵皮肤水溶性蛋白具有一定的抗菌活性。蛋白质谱Label-free分析表明这些蛋白是由66种蛋白质组成;通过分子注释有20种蛋白与免疫抗病功能相关,2种蛋白与抗氧化活性相关。研究揭示大鲵皮肤黏液水溶性蛋白含有66种蛋白,分子量介于10～300 kDa,活性鉴定结果显示大鲵黏液水溶性蛋白具有抗氧化活性和抗菌活性。     

卵黄免疫球蛋白和卵磷脂的开发利用

正蛋黄是鸡蛋的重要组成部分,含有水溶性蛋白类和脂溶性磷脂等活性成分,其中卵黄免疫球蛋白和卵磷脂是最重要的活性物质。蛋黄活性成分包括水溶性蛋白类成分和脂溶性成分。蛋白主要有卵黄免疫球蛋白、卵黄高磷蛋白、卵黄脂磷蛋白和生物素结合蛋白。脂溶性成分中甘油三酸酯为主的中性脂质约占65%,磷脂质约为     

模拟酸雨胁迫对罗汉果幼苗生理特性的影响

以罗汉果幼苗为材料,研究不同pH值(2.5,3,4,5)及pH 5.6(CK)对罗汉果幼苗丙二醛、可溶性蛋白、叶绿素含量及CAT、POD、SOD活性的影响。结果表明：各模拟酸雨处理罗汉果幼苗中MDA含量随pH值的降低而升高。罗汉果幼苗叶绿素含量、CAT活性随pH值的减小而显著降低。当pH值大于4时,罗汉果幼苗可溶性蛋白含量随pH值的增大而显著增强,罗汉果幼苗体内POD和SOD活性随pH值增大而降低,当pH值小于4时,随pH值的减小罗汉果幼苗可溶性蛋白含量、POD和SOD活性显著降低。当PH值等于4时,罗汉果幼苗可溶性蛋白含量最高,POD和SOD活性最强。CAT、POD、SOD活性与MDA含量呈极显著负相关,可溶性蛋白与这三种酶呈极显著正相关,叶绿素含量与POD、SOD活性呈极显著正相关。     

挤压膨化对小麦胚芽蛋白乳化活性及乳液表面电位的影响

为研究挤压膨化处理对小麦胚芽蛋白的乳化性能影响,本试验以乳化活性、乳化稳定性、乳液表面电位等为主要指标,研究挤压膨化处理后小麦胚芽蛋白的乳化性能变化。采用挤压膨化处理小麦胚芽粉,然后分别提取小麦胚芽清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,测定其乳化活性、乳化稳定性、乳液表面电位的变化。结果表明：挤压膨化处理后小麦胚芽清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白的乳化活性和乳化稳定性均得到了提高,尽管谷蛋白乳化活性有所下降,但其乳化稳定性比处理前提高了83.21%;挤压膨化处理后小麦胚芽清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的乳液Zeta电位（绝对值）均显著提高,醇溶蛋白乳液Zeta电位（绝对值）提升最为显著,达53.2%。综上,挤压膨化处理能够显著改善小麦胚芽蛋白的乳化性能。     

蛋白的不同提取方法对瘤胃酶活的影响

反刍动物瘤胃中酶的活性与瘤胃功能息息相关，为了筛选出合适的瘤胃酶提取方法，实验设计了6种活性蛋白提取方法，分别是超声破碎法、常温研磨法、冷冻研磨法、高压破碎法、反复冻融法和蛋白抽提法。结果表明：超声破碎和高压破碎这2种方法可以提取到总量和活性均高的纤维素酶，高压破碎法可以提取到较高淀粉酶总量的蛋白，常温研磨法可以提取到淀粉酶活性和蛋白酶活性较高的蛋白。说明不同的蛋白提取方法对瘤胃不同酶的总量和活性影响不同。     

蝇蛆活性蛋白对清远麻鸡生长、肉质及抗病力的影响

采用室内笼养、室外圈养与山地散养方法,测定了蝇蛆活性蛋白鸡饲料对清远麻鸡生长、抗病力及肉质营养成分的影响。结果表明,用蝇蛆活性蛋白饲养室内笼养清远麻鸡,其日增重和成活率均显著高于用普通饲料饲养的鸡,而料肉比则显著低于普通饲料饲养的清远鸡;与直接饲喂鲜虫的比较,虽然投喂鲜虫与用蝇蛆活性蛋白饲养的效果差异不显著,但用蝇蛆活性蛋白饲养仍比投喂鲜虫的好。在此基础上,室外圈养测定了蝇蛆活性蛋白不同添加量对鸡生长性能的影响,结果以添加10%的蝇蛆活性蛋白最为适宜。山地散养表明,饲喂蝇蛆活性蛋白的清远麻鸡,不仅生长速度快,耗料量少,且抗病力大大增强。对鸡肉营养成分分析表明,无论是室内笼养或山地散养,用蝇蛆活性蛋白饲养的清远鸡,其鸡肉蛋白质含量均比普通饲料饲养的高,脂肪比普通饲料饲养的低,必需氨基酸占总氨基酸的比值(EAA/TAA)、呈味氨基酸占总氨基酸的比值(DAA/TAA)及不饱和脂肪酸(USFA)占总脂肪的比值均比普通饲料饲养的高。以上结果证明,利用蝇蛆活性蛋白饲养清远鸡,可显著促进鸡生长,提高鸡成活率和饲料报酬率,有效改善鸡肉的营养组成,使肉质鲜嫩、味美,营养价值更高。     

三七活性蛋白的分离及浸提液的筛选

在32种高原药源性植物中筛选出血凝活性较强的三七，用不同pH值和不同盐浓度的缓冲溶液浸泡制备浸提液，测定了其血凝活性，并进行了糖专一性抑制试验、硫酸铵分级沉淀、活性蛋白含量和分子质量的测定。试验表明，高原药源性植物三七浸提液具有活性蛋白的血凝活性，在1mol／L NaCl的甘氨酸缓冲溶液中活性最强，能被半乳糖所抑制，硫酸铵分级沉淀在40%和60％时蛋白含量最多，血凝活性最高，活性蛋白含量为29％。     

青大Ⅰ号苜蓿抗寒性生理生化指标的测定

为了研究低温胁迫下不同品种苜蓿抗寒性生理生化指标的变化,试验以寒牧1、寒牧2、寒牧3、寒牧4苜蓿为材料,测定低温(4℃)培养和常温(25℃)培养苜蓿芽中可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶活性及苜蓿叶片中的酯酶同工酶活性。结果表明:低温处理后苜蓿芽中可溶性蛋白含量增加,超氧化物岐化酶活性下降,苜蓿叶片中酯酶同工酶活性增强。说明苜蓿是通过提高可溶性蛋白含量、降低超氧化物岐化酶活性、增强酯酶同工酶活性来适应低温逆境,以减轻低温伤害。     

牛初乳的功能成分概述

正牛初乳所含各种蛋白本身不仅具有生理活性,同时,在其大分之内部还存在许多具有生理活性的蛋白肽,在蛋白质被水解之前它们是以非活性状态隐藏在蛋白质分子中,当蛋白质被水解后,这些肽的活性被释放出来。自从1979年Brant从牛乳β-酪蛋白的水解物中分离出β-阿片样肽至今,已经从牛乳酪蛋白的水解中发现了多种活性肽,例如:阿片样肽、抗血压升高肽、酪蛋白磷酸肽、免疫多肽、抗血栓肽等。     

重组鹅β-防御素7蛋白的原核表达及其生物学特性分析

为探讨鹅β-防御素7(Av BD7)的生物学特性,将鹅Av BD7基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体p Pro EX HTa的EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD7,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对其菌液进行诱导表达。经N-三(羟甲基)甲基甘氨酸十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-SDS-PAGE)分析,该重组蛋白大小为10~15 ku,与预期大小结果一致。重组鹅Av BD7蛋白纯化后,通过菌落计数的方法测定其体外抗大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其对鸡红细胞的溶血活性。结果显示,重组鹅Av BD7蛋白对所测定的5种细菌均有显著抗菌活性(P0.05),且其抑菌活性随蛋白浓度的增加而增强。高浓度盐离子(150 mmol/L)显著抑制重组鹅Av BD7蛋白的抗菌活性(P0.05)。重组鹅Av BD7蛋白对鸡红细胞没有溶血活性(P0.05)。由此可见,重组鹅Av BD7蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶血活性。     

大熊猫西氏贝蛔虫BsABF基因的原核表达及重组蛋白抗菌活性初步分析

本研究旨在探究大熊猫西氏贝蛔虫一个抗菌肽分子的生物学特性及其重组蛋白rBsABF在体外的抗菌活性。对西氏贝蛔虫抗菌肽BsABF基因进行克隆、原核表达及重组蛋白rBsABF的纯化,通过免疫印迹与荧光免疫组化分析重组蛋白rBsABF免疫反应性及BsABF在虫体中的分布;采用抗菌试验对重组蛋白rBsABF的抗菌活性进行了初步评价。研究结果显示,BsABF基因ORF全长276bp,编码蛋白分子大小为10.01ku,带有N端信号肽,与猪蛔虫同源基因序列相似性为94%,主要分布于虫体体壁、肠道与虫卵,重组蛋白rBsABF具有良好的免疫反应性。抗菌试验结果显示该重组蛋白对大熊猫源粪肠球菌及大肠杆菌具有一定的抗菌活性。首次鉴定了大熊猫西氏贝蛔虫BsABF基因,抑菌试验表明重组蛋白rBsABF具有抗菌活性,为今后深入研究该蛋白的功能特性奠定了基础。     

活性肽类制品发展趋势

蛋白水解物和由蛋白水解物制备的活性肽类食品，具有易消化、易吸收、抗过敏性、治疗低血压和降低胆固醇等作用，故国外关于蛋白水解物和活性肽产品的开发极为活跃，目前已有多种产品上市。日本开发的各种活性肽制品如表1所示。表1活性肽产品—览表前一个时期蛋白水解物的开发以大豆、乳蛋白、蛋白蛋白为主，尤以乳蛋白水解物和活性肽的研究开发最为活跃和深入。近年来有关畜血、水产蛋白的水解物和活性肽产品研究和开发日益受到重视，目前已有此方面的产品问世，许多新产品也正在研制开发中。现在有关蛋白水解物的制品的分类基本按下列两原…     

利用ELISA双抗体夹心法检测血浆蛋白粉中IgG相对活性的研究

母乳中的免疫球蛋白具有帮助乳猪抵抗,腹泻等疾病的能力。血浆蛋白粉除为乳猪提供均衡的蛋白质营养外,还含有大量的免疫球蛋白以及其他活性成分以提高乳猪的免疫力、提高乳猪的生长能力。免疲球蛋白的活性依赖于其天然结构的保持,结构变性就丧失活性。本研究以3,000头猪新鲜血浆混合样为标准样,利用ELISA双抗体夹心法对血浆蛋白粉中的免疫球蛋白IgG的相对活性进行检测。研究结果表明,该方法可有效评估经喷雾干燥处理以后血浆蛋白粉中IgG的活性保持情况,从而推断出血浆蛋白粉的核心质量。方法稳定、测试结果可靠,可作为血浆蛋白粉的核心成分免疫球蛋白IgG活性检测的手段。     

卵母细胞体外成熟过程中CTSB、CTSS和caspase 3活性与表达量的变化

CTSB、CTSS和caspase 3对细胞凋亡具有重要作用,其活性和蛋白表达量可反映细胞内、外环境对卵母细胞的凋亡刺激。本研究利用双夹心ELISA方法测定绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3在IVM 0、8、16、24 h的活性与蛋白表达量,研究其在IVM过程中的变化、与卵母细胞质量的相关性及E-64对其产生的影响。结果表明:质量差组卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3活性与CTSB蛋白表达量均极显著高于正常质量组(P0.01);CTSB、CTSS活性和蛋白表达量在IVM过程中无显著变化(P0.05),caspase 3活性呈现先降低后升高的趋势,蛋白表达量无显著变化(P0.05);5μmol/L和10μmol/L E-64显著或极显著降低了CTSB、CTSS和caspase 3活性(P0.05 or P0.01),10μmol/L E-64显著提高了CTSB蛋白表达量(P0.05)。结果显示,CTSB、CTSS和caspase 3的活性及CTSB蛋白表达量与卵母细胞质量呈负相关,E-64可降低CTSB、CTSS和caspase 3活性,并提高CTSB蛋白表达量。     

牛奶中活性蛋白和活性脂肪酸生物活性研究进展

当前牛奶已成为人们膳食结构中重要的组成部分，其不仅能提供丰富的营养，还具有一定的保健功能。牛奶营养功能的挖掘与评价是当前食品营养领域的研究热点，而牛奶营养功能的发挥主要依赖其含有的活性因子，包括活性蛋白/多肽、活性脂肪酸等。作者查阅和归纳了近年来关于牛奶中活性因子功能评价的文献，从中筛选出几种重要的活性蛋白，主要包括乳铁蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白，对这3种活性蛋白的抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤及免疫调节功能等相关活性和作用机制进行系统的阐述。同时也总结了牛奶中几种重要的活性脂肪酸，主要包括油酸、亚麻酸和二十二碳六烯酸，并对其抗炎、降血压、预防心脑血管病等相关活性和机制进行阐述。对于牛奶中活性蛋白和活性脂肪酸的具体阐述，均以相关的试验调研为切入点，其机制为活性因子直接或间接作用于靶细胞并发挥相关的作用。