动物性产品中"瘦肉精"残留的检测方法研究进展

本文综述了“瘦肉精”检测方法的研究进展。指出简易检验法、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(CG-MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)是目前国内外用于检测CLB的常用方法,但都不是十分理想,新兴的滴金免疫技术(DIGFA)和生物传感器技术(BS)由于其明显的技术优越性,必将成为CLB检测技术的新宠儿。     

盐酸克伦特罗残留检测方法简介

盐酸克伦特罗,俗称瘦肉精,目前,国内外检测其残留的方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)、毛细管区带电泳法(CE)、免疫分析技术(IA)和生物传感技术等方法。盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CLB)简称克伦特罗,俗称瘦肉精,别名克喘素、氨     

克伦特罗荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究

本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,为实现其产业化应用奠定基础。采用荧光胶乳微粒为标记物,以抗原包被浓度、膜干燥时间、混匀反应时间、反应温度及层析时间为单因素优化制备了CLB荧光免疫层析试纸条,并对该试纸条的检测限、特异性、临床准确度及添加回收率、精密度和稳定性进行了评价。最佳制备条件:抗原包被浓度2.0 mg/mL,膜干燥时间5 d,混匀反应时间1 min,反应温度25 ℃,层析时间15 min。评价结果显示,试纸条检测限可达0.35 μg/L;CLB与其他8种同类药物交叉反应率均小于0.8%,特异性良好;各批添加回收率在80%~120%之间,准确度达到要求;不同CLB浓度下变异系数(CV)均小于5%,符合精密度标准;此外,稳定性试验验证了该试纸条稳定性良好。     

昆明市猪尿样中"瘦肉精"的监测

2003年12月至2004年11月，昆明市动物监督检验所开展了生猪“瘦肉精”的监测工作，现将检测结果报道如下。 1 材料与方法 1．1 盐酸克伦特罗ELISA检测试剂盒农业部推荐的德国拜发（Biopharm）公司生产的盐酸克伦特罗（CLB）酶联免疫（ELISA）检测试剂盒。     

猪肉中瘦肉精残留的危害、常用检测方法和监管措施

瘦肉精商品名是盐酸克仑特罗(CLB),由于其可使脂肪型动物的脂肪和肉的比例发生变化,还可促使动物加速生长,因此曾在猪饲料中广泛添加,以使瘦肉产出率提高。但由于这种药物对人的副作用严重,现在已经被禁止,但依旧有一些不法分子还在应用,一方面是由于利益驱使,另一方面是由于当前国内外检测CLB的方法、手段还未完善,并未建立起宰前监测体系以及准确、迅速、便利的检测方法。现介绍CLB的危害、检测方法及监管措施。     

胶体金技术在弓形虫病诊断中的应用

利用胶体金标记技术诊断弓形虫病的方法有免疫金银染色法(IGSS)、快速斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和胶体金免疫层析法(GICA)。其中胶体金标记免疫层析技术作为一种新型的免疫学快速诊断和检测技术,不仅具有敏感、特异、便捷等特点,而且适合基层和现场使用,成为当今快速检测病原体及临床快速诊断疾病的主要技术手段,在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。论文对免疫胶体金技术在弓形虫病诊断中的应用和发展进行了综述。     

免疫层析快速诊断试纸条在动物疾病诊断中的应用

免疫层析(immunochromatography，IC)是20世纪80年代初期发展出来的一种独特的免疫分析方法．它是在免疫渗滤技术基础上建立的一种简单快速的免疫学检测技术，由Beggs等(1990)最先用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定。到了90年代．该技术又与单克隆抗体技术和新材料技术相结合．发展了一项新型体外诊断技术-免疫层析快速诊断试纸条．     

猪轮状病毒检测技术研究进展

猪轮状病毒(PoRV)是导致哺乳仔猪和断奶仔猪腹泻的主要原因之一。该疫病的暴发流行,给养猪业造成巨大的经济损失。因此,快速可靠检测PoRV的方法,有利于及时诊断和防控该病。目前,用于检测猪轮状病毒的方法很多,论文对于近年来检测PoRV的方法进行了论述,包括病毒分离培养鉴定、病毒电镜形态检查、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫层析试纸条检测技术、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)和逆转录-环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)、原位杂交技术(ISH)、纳米孔测序等,并分别介绍了不同检测方法在应用中的优缺点,为有效诊断及防控PoRV感染提供技术指导。     

淡水鱼虾细菌病诊断与防控技术研究进展

本文概述了淡水鱼虾常见的细菌性疾病,包括细菌性败血症、细菌性肠炎、细菌性烂鳃、链球菌病、迟缓爱德华氏菌病、鮰类肠败血症、诺卡氏菌病、急性肝胰腺坏死病和螺原体病等,并对近年来国内外主要淡水养殖细菌性病害检测方法的研究情况进行综述,包括基于病原菌生理生化特征的检测方法、基于分子生物学技术的检测方法(如常规定性PCR检测方法、实时定量PCR技术、环介导等温扩增技术、16S r RNA检测技术、核酸探针杂交法和基因芯片技术等),以及基于免疫学相关技术的检测方法(如免疫酶技术、免疫荧光技术、胶体金免疫层析技术和抗体芯片技术等),提示在防控方面应该注重监测预警、免疫、药物、生态和综合防控等技术。本文为淡水养殖细菌性病害的诊断、检测方法的标准化及推动相应检测产品的商品化提供了参考。     

饲料中盐酸克伦特罗的测定-HPLC法

盐酸克伦特罗(CLB)作为一种主要的β-兴奋剂应用于畜禽肉制品生产中,用以提高肌肉和脂肪的比例并加快生长速度.在畜禽产品中过量残留会对消费者造成危害,因此被禁止在畜禽养殖中使用.CLB在家畜与人体内吸收好,而且与其他β-兴奋剂相比,它的利用率高,以至食用了含有盐酸克伦特罗的猪肉出现中毒现象.由于CLB通过饲料对动物的饲喂会残留在动物的肌肉与内脏组织中,对饲料中CLB进行监测也就显得尤为重要.经试验,应用高效液相色谱(HPLC)法检测饲料中盐酸克伦特罗,标准曲线r值≥0.999 95;变异系数(CV值)≤0.82%;检测回收率88.06%～100.33%;回收率标准偏差≤1.25%.     

现代诊断技术在兽医学上的应用及其进展

1　免疫酶技术 (ＥＩＡ)ＥＩＡ是根据抗原 -抗体结合的特异性 ,以酶作标记物 ,酶对底物具高效催化作用的原理而设计 ,既可用于抗原的检查 ,也常用于血清抗体的检测。1 .1　酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)ＥＬＩＳＡ是应用最广泛的免疫酶技术 ,包括间接法、夹心法、竞争法等。自ＶＯＬＬＥＲ和ＢＩＤＷＥＬＬ(1 975 )首先报道了应用间接ＥＬＩＳＡ方法检测病毒特异性抗体以来 ,ＥＬＩＳＡ方法已普遍应用于传染病的流行病学普查、抗体水平的评价以及疫苗质量的监控和标化等 ,迄今为止大多数动物病原体均已发展或报道了ＥＬＩＳＡ方法的研究与…     

笼养肉种鸡的喷雾免疫

喷雾免疫是一种在饲养管理水平比较高的情况下．操作要求比较严格的免疫技术。如果饲养管理水平差．操作不当等则可导致较严重的后果。我公司从1999年开始采用喷雾免疫，并在全公司(注：我公司常年存养41万套从父母代肉种鸡)11个种鸡厂应用，取得了令人比较满意的效果。我们一方面深入研究喷雾免疫的理论和反复验证、改进操作技术，另一方面加强监督检测，使操作技术在生产中得到推广应用，通过检测和对比验证了喷雾免疫在笼养肉种鸡上操作的可行性。现将经验介绍给同行，以供参考。     

沙丁胺醇单克隆抗体的制备、鉴定及其免疫学检测方法的建立

本研究采用碳二亚胺法将沙丁胺醇(Salbutamol．Sal)分别与钥孔血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联．制备免疫抗原(Sal-KLH)、(Sal-BSA)和包被抗原(Sal-OVA)。用免疫抗原免疫8周龄雌性Blab／c系小鼠，通过四次免疫后．将小鼠断尾采血．以包被抗原包被板，用间接ELISA法选出血清具有抗Sal的高阳性鼠，取这些小鼠的脾细胞与SP2／O细胞融合．通过检测、克隆、筛选等步骤生产抗Sal单抗。通过以上步骤得到3株具有稳定、特异分泌抗Sal的单克隆抗体．分别命名为2A6(A株)、383(B株)、2H7(C株)。应用3株抗Sal单抗，基于间接抑制ELISA方法．建立沙丁胺醇免疫学检测方法。通过对此方法中的相关条件进行优化．可以使本检测体系对沙丁胺醇的检测范围达到1．25～1280ng／m1．表明基于此原理建立的检测方法可以用于动物性食品沙丁胺醇残留的普查。     

单分子免疫阵列技术在传染病诊断中的应用

单分子免疫阵列(single molecule array,Simoa)技术,又称"数字ELISA",是近年来新开发的一种数字免疫分析方法,将单分子计数用于蛋白质生物标记物的检测。该方法可测量各种不同基质(血清、血浆、脑脊液、尿液、细胞提取物等)中的蛋白质,检测限可达飞摩尔(fg/mL)数量级,灵敏度较传统ELISA提高约1 000倍。目前,该技术在一些重大传染病,如新冠肺炎、结核病、艾滋病、朊病毒病诊断中的优势逐渐凸显。Simoa技术可帮助监测新冠病毒感染进程,有望实现早期高灵敏度诊断,以区分新冠肺炎轻症和重症患者;有望帮助诊断活动性结核病,并可以监测结核病治疗效果;可更准确检测人免疫缺陷病毒(HIV)免疫相关蛋白含量变化,提高早期诊断的灵敏性;可在羊瘙痒病临床症状出现前检测活体动物血清,提高痒病早期检测能力,从而有望用于人类克雅氏症诊断。未来,通过开发相关病种的检测试剂盒,有望利用Simoa技术提高疫病的综合诊断能力,还可进行疫苗免疫效果评价,为疫病防控提供依据。     

化学发光免疫分析技术在动物疫病检测中的应用

化学发光免疫分析(chemiluminesecence immunoassay,CLIA)是用于疫病检测的一种免疫检测技术,是基于免疫反应原理,结合化学发光检测技术而建立的。与放射免疫分析、酶免疫分析等标记免疫技术相比,具有无放射性污染、灵敏度高和特异性强的特点,已被广泛应用于疫病流行病学调查、诊断、药物分析以及微生物检测等方面。本文简要介绍了CLIA技术的基本原理及发展,从细菌、病毒和寄生虫检测方面,综述了近年来该技术在动物疫病检测中的应用,提出该技术正向高特异性、高灵敏度、高通量、快速和自动化检测的方向发展,这为今后CLIA在动物疫病检测中的应用研究提供参考。     

兽药残留免疫检测技术应用进展

免疫检测技术（Immunoassays,IAs)是利用抗原与抗体在体外的特异性反应建立起来的检测技术。兽药属于小分子物质（MW＜1000D），没有免疫原性，必须与大分子物质交联成人工抗原才能获得免疫原性。本文从兽药人工抗原的制备、抗体的制备、免疫检测方法的建立等三个方面对免疫技术在兽药残留检测的应用进行了综述，并展望了兽药免疫检测技术的发展趋势和前景。     

3种β_2-受体激动剂荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究

本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)、莱克多巴胺(ractopamine,RAC)和沙丁胺醇(salbutamol,SAL)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,并对该试纸条的检测范围、检测限、准确度、精确度、假阳性、假阴性及其与仪器方法的符合率进行评价。结果显示,克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条标准曲线范围分别为0~3.2、0~6.4、0~8.0μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条检测下限分别可达0.2、0.4和0.5μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇与其他8种同类药物交叉反应均成阴性,特异性良好;各批添加回收率在60%~120%之间,准确度达到要求;不同克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇浓度下变异系数(CV)均小于15%,符合精密度标准;猪尿中假阳性率和假阴性率均为0;此外与仪器方法的符合率为100%。试纸条适用于猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺残留快速检测,具有灵敏度高、稳定性好和特异性强的特点。     

免疫学和分子生物学技术在水产动物疾病诊断中的应用

目前,各种免疫学和分子生物学技术的发展和在水产养殖病原微生物检测和诊断中的广泛应用,对水产养殖病害的有效防控起到了巨大的促进作用。论文回顾了主要免疫学技术(单克隆抗体、酶免疫、凝集反应、荧光抗体、胶体金)和分子生物学技术(核酸杂交、基于PCR的分子生物学检测技术、限制性内切酶分析、16 S rRNA、基因芯片)的特点以及其在水产动物疾病诊断中的研究及应用情况,并分析了今后水产动物疾病诊断技术的发展方向。     

胶体金免疫层析技术在兽医检测中的应用及其展望

胶体金免疫层析技术是固相标记免疫测定技术,以其简便、快速,可通过肉眼观察到显色结果,已成为当今主要的免疫分析方法。1在病毒检测中的应用据报道,有人建立的检测O型口蹄疫病毒(FMDV)抗原的胶体金免疫层析方法,检测53份试验     

新型检测技术在犬猫主要病原检测中的应用进展

犬猫传染性疾病严重影响犬、猫健康，甚至威胁人类生命健康。随着新型材料和科学技术的发展，在传统检测方法的基础上建立了多种快速、灵敏、特异的检测技术。针对研究较多的快速检测方法如等温扩增技术、基因芯片技术、时间分辨免疫荧光层析技术以及免疫微球分离检测技术等多种新型检测技术，从检测时间、优缺点及在犬猫主要病原检测的研究进展等多角度予以综述，旨为在不同的检测环境下选择适合犬猫病原检测技术及产品研发提供参考。