一氧化氮在三氧化二砷抑制马立克病病鸡肾脏肿瘤生长中的作用

为了探讨一氧化氮(NO)在三氧化二砷(As2O3)抑制马立克病病鸡肾脏肿瘤生长中的作用,复制了鸡马立克病病例模型,通过腹腔注射As2O3,于35 d4、0 d与45 d观察病理学改变,检测肾脏肿瘤组织NO含量、T-NOS、cNOS及iNOS的活性和iNOS mRNA的表达水平。结果表明As2O3能够显著抑制肾脏肿瘤生长,降低肿瘤组织内的NO含量、T-NOS、cNOS及iNOS活性和iNOS mRNA表达水平,并呈现时间效应。揭示NO在As2O3抑制MD病鸡肾脏肿瘤生长中的作用发挥着重要作用。     

三氧化二砷对鸡马立克病病毒诱导鸡肝脏肿瘤中血管生长相关因子表达的影响

为了探讨三氧化二砷(As2O3)对马立克病病毒(MDV)诱导鸡肝脏肿瘤中血管生长相关因子表达的影响,构建了鸡马立克病病例模型,通过腹腔注射As2O3(3.0 mg/kg体重),于35 d,40 d与45 d观察临床症状及血管组织病理学改变,采用半定量RT-PCR法检测肝脏肿瘤中血管生长相关因子VEGF、KDR及bFGF mRNA表达水平。结果表明,MD病鸡肝脏肿瘤内VEGF、KDR及bFGF mRNA均高水平表达,As2O3能够下调肿瘤组织内VEGF、KDR与bFGF mRNA的表达水平,并呈现时间效应。揭示As2O3能够通过下调肝脏肿瘤组织中VEGF、KDR与bFGF mRNA的表达水平,减少血管的生成,进而抑制肿瘤生长,这是As2O3抗肿瘤作用机制之一。     

小剂量砷化物对实验兔生长和繁殖性能的影响

为研究As2O3对实验兔生长和繁殖性能的影响,选择年龄和体重相近的40只实验兔(32只母兔,8只公兔)随机分成4组.对照组饲喂不含As2O3的基础日粮,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组分别饲喂含As2O3 0.5mg/kg、1.0mg/kg和1.5mg/kg的日粮.生长发育和繁殖性能的测定结果显示,试验Ⅰ组与对照组相比,差异不显著(P＞0.05),试验Ⅱ组性能表现优于对照组,差异显著(P＜0.05),试验Ⅲ组出现中毒症状.本实验表明,适量的As2O3对实验兔生长和繁殖具有促进作用.     

三氧化二砷诱导鸡MD肿瘤细胞凋亡及对细胞内钙离子浓度的影响

为探讨As2O3诱导MD肿瘤细胞株凋亡的机制,采用MTT法检测As2O3对MDCC-MSB1的抑制作用.采用荧光显微镜观察细胞形态学变化,DNA Ladder法检测细胞凋亡,Fura-2/AM负载双波长荧光分光光度计检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)变化,观察A2O3对鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1的影响.结果显示:As2O3能抑制鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1的生长,呈剂量依赖关系(P<0.05或P<0.01);在荧光显微镜下可见As2O3作用后MDCC-MSB1细胞呈现典型的凋亡特征,并出现典型的DNA Ladder,双波长荧光分光光度计检测结果显示:As2O3作用后的MDCC-MSB1细胞内[Ca2 ]i升高(P<0.05或P<0.01),呈剂量依赖关系.As2O3能明显抑制鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细胞的生长,并诱导其发生凋亡,细胞内[Ca2 ]i高可能是其诱导细胞凋亡的机制之一.     

长期饲喂小剂量三氧化二砷对不同窝次小白鼠的影响

本试验选择40日龄昆明种小白鼠80只，公母各半，随机分为两组，对照组饲喂基础日粮，试验组日粮中添另1．4mg/kg的As2O3。选F1代小白鼠生产的三窝小白鼠进行观察，记录每窝出生数，测定体增重，观察有无畸形个体出现。结果表明，长期饲喂小剂量As2O3对不同窝次小白鼠不仅不产生毒性作用，而且可增强生命力，促进生长。     

三氧化二砷对鸡马立克氏病肿瘤细胞凋亡的影响

研究了三氧化二砷（As2O3）对诱导鸡马立克氏病（MD）肿瘤细胞株MDCC—MSB1细胞凋亡相关基因Fas、Caspase-3 mRNA表达及Caspase-3活性的影响，进而探讨了AS2O3诱导MD肿瘤细胞株凋亡的机制。以体外培养MDCC-MSB1为研究对象，经终浓度分别为0、2、4和8μmol／L的As2O3作用48h后，采用荧光显微镜观察细胞的形态学变化，DNA Ladder法检测细胞凋亡情况，RT-PCR方法检测Fas、Caspase-3 mRNA的表达水平，试剂盒比色法检测Caspase-3活性的变化。结果表明，AS2O3能引起典型的凋亡形态学变化，并出现典型的DNA Ladder，同时Fas、Caspase-3 mRNA的表达水平和Caspase-3活性均增加，组间差异均极显著（P〈0．01），呈现剂量依赖性。证实As2O3诱导鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细胞凋亡是通过增加Fas、Caspase-3 mRNA的表达和提高Caspase-3活性来实现的。     

应用质粒PTK探针鉴定锥虫的初步研究

用^32P标记质粒探针PTK1、PTK1.1和PTK1．2，对12株中国伊氏锥虫的斑点杂交试验显示，3个探针均能与8株具有正常动基体的伊氏锥虫杂交，而不与其余4株异常动基体伊氏锥虫杂交，对正常动基体株的敏感度为10^2虫体。探针PTK1亦能与马媾疫锥虫杂交，敏感度为10^2个虫体。但PTK1与布氏锥虫仅发生微弱的杂交反应．敏感度为10^5个虫体。试验表明伊氏锥虫株之间的kDNA微环是同源的，伊氏锥虫与马媾疫锥虫和布氏锥虫的kDNA微环存在着共同序列。     

转录靶向猪瘟病毒3′-UTR shRNA细胞株干扰猪瘟病毒增殖的检测

对筛选的转录猪瘟病毒石门株3-′UTR shRNA的PK-15细胞株P-1（114-132位）、P-2（136-154位）和P-3（209-227位）分别接种猪瘟病毒（CSFV）,在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测CSFVNS3基因及-βactin基因,以研究构建细胞株在转录水平上对CSFV增殖干扰的效果;接毒后第72、96和148小时以酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测细胞NS3蛋白表达量,通过OD490值分析构建细胞株在病毒蛋白表达水平上对CSFV增殖的影响。检测结果表明：（1）接毒后第72和96小时P-1、P-2和P-3细胞株中NS3基因的量明显减少,与接毒的空白PK-15细胞比较差异显著（P〈0.05）,说明P-1、P-2和P-3细胞株转录的shRNA能干扰CSFV RNA的转录;（2）接毒后第72和96小时P-1、P-2、P-3细胞株中NS3蛋白的表达量明显少于接毒的PK-15细胞（P〈0.05）,说明转录的shRNA在病毒蛋白水平上能干扰CSFVNS3基因的表达,但接毒后第148小时干扰效果有所降低。     

猪瘟猪O型口蹄疫高致病性猪蓝耳病疫苗联合免疫试验报告

为了评价猪瘟、口蹄疫、猪蓝耳病疫苗联合免疫效果,采用猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫缅甸98灭活疫苗和猪繁殖与呼吸综合征活疫苗对33～50日龄健康仔猪同时分点注射进行联合免疫,用正向间接血凝试验和ELISA试验检测其免疫效果。结果表明,3种疫苗联合免疫具有较高安全性,猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫缅甸98灭活疫苗(浓缩)和高致病性猪蓝耳病灭活苗同时分点注射,对猪瘟脾淋苗和猪O型口蹄疫缅甸98灭活疫苗免疫效果无明显的免疫抑制或干扰作用,但对高致病性猪蓝耳病灭活苗免疫效果有显著的抑制或干扰作用。猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫缅甸98灭活疫苗可进行联合免疫,但高致病性猪蓝耳病灭活疫苗应单独免疫。     

鸡IFN-γ重组鸡痘病毒对鸡传染性腔上囊炎MB43弱毒疫苗免疫鸡免疫应答的影响

将重组鸡痘病毒（rFPV—IFN-γ）与IBDMB43弱毒疫苗联合接种SPF鸡，研究重组鸡IFN-γ对IBD疫苗免疫效果的影响。结果显示，rFPV—IFN-γ和MB43弱毒疫苗联合免疫组（MB43＋rFPV-IFN-）＂）及rlFN-γ和MB43弱毒疫苗联合免疫组（MB43＋rIFN-γ）在免疫后第2周即可检出ELISA抗体，比MB43疫苗单独免疫组早1周。用IBDVGx株攻击后，MB43＋rFPV-IFN-γ组和MB43＋rIFN-γ组免疫鸡的脾只有个别淋巴细胞核浓缩、核崩解，少数滤泡萎缩变性坏死；胸腺损伤程度轻于MB43疫苗单独免疫组和非免疫对照组。免疫后1周，3个免疫组外周血CD8^＋T淋巴细胞含量均显著高于非免疫对照组，CD4^＋T淋巴细胞含量变化不明显；攻毒后第2周，3个疫苗免疫组CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞含量均显著升高，各组之间CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞含量无明显差异。证实，rFPV—IFN-γ和rIFN-γ可加强疫苗的细胞免疫和体液免疫应答。     

IBDV地方流行株鸡胚毒三价油乳灭活苗免疫效果研究

将分离于河南省的YX08、YX12和YB02野毒株的第10代鸡胚传代毒作为种毒接种鸡胚,用收获的鸡胚绒毛膜尿囊液试制出三价油乳灭活苗,并对其进行检测和免疫效果比较。结果表明：三价油乳灭活苗和三价油乳灭活苗与活疫苗联合免疫效果均明显优于活疫苗免疫组,平均AGP效价分别达到2^2.8和2^3.0;当活疫苗免疫组鸡血清中已无可测性抗体时,三价油乳灭活苗免疫组和联合免疫组仍具有2^1．8和2^1.2的AGP效价。在接种后第30,60天,分别用传染性法氏囊病病毒标准强毒株BC6／85、地方野毒株YX08、YX12和YB02进行攻毒试验。在接种后第30天,三价油乳灭活苗和联合免疫疫苗对这4个毒株的攻击可提供93．3％～100％的保护;单独的活疫苗可提供60．0％～80．0％的保护;在接种后第60天,三价油乳灭活苗、联合免疫疫苗和活疫苗分别能提供80．0％～93．3％、80．0％～93．3％和40．0％-53．3％的保护。     

p15基因干扰对肝癌耐药的影响

目的 探讨小于扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制p15基因对肝癌耐药的影响.方法 采用浓度递增法用顺铂(cisplatin,CDDP)诱导肝癌细胞HepG2建立动态耐药模型HepG2/CDDP/2.0.脂质体法将针对p15 mRNA的siRNA( Y1、Y2、Y3)和阴性对照siRNA-F转染至HepG2/CDDP/2.0细胞,筛选最佳转染浓度和最有效的干扰序列.MTT法检测HepG2/CDDP/2.0对CDDP的半数抑制浓度(IC50)、流式细胞仪分析HepG2/CDDP/2.0细胞周期分布、RTPCR和Western blot分别检测p15 mRNA和p15蛋白、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达.结果 成功建立肝癌耐药模型HepG2/CDDP/1.6,系中度耐药.RT-PCR显示siRNA Y3干扰效果最佳.转染后G1期细胞比例分别为53.8%(24 h),51.6% (48 h),48.8% (72 h)(P＜0.05);RT-PCR和Western blot显示p15表达降低,p-gp表达增加.结论 在肝癌耐药的动态过程中,随着耐药时间的延长,G1期的比例增加.抑制p15的表达可降低G1期的比例,增加肿瘤耐药性.     

柠檬酸稀土添加剂中试生产的条件研究

本文对柠檬酸稀土饲料添加剂生产中的酸度、原料用量、温度、沉淀条件等进行试验，并对柠檬酸稀土中活性成分RE2O3的含量及Pb、As、Cd、Hg等有害元素的含量进行了测定，通过动物饲养试验，证明该产品完全合格，并取得了一定的社会效益。     

利用不同源红细胞检测鹅禽流感抗体效价的报告

从某一已免疫禽流感的种鹅场采取30份血样，分别以健康鸡红细胞悬液和健康皖西白鹅红细胞悬液为指示剂，对30份血样进行禽流感血凝和血凝抑制试验。结果：用鸡红细胞悬液作指示剂进行血凝试验，测出抗原4HAU为1：32；用鹅红细胞悬液作指示剂进行血凝试验，测出抗原4HAU为1：8以1：32倍数稀释抗原，分别用鸡红细胞和鹅红细胞悬液作指示剂进行血凝抑制试验，测出30份鹅血清禽流感H5免疫抗体效价的平均值分别为2^5.8和2^3.9；以1：8倍数稀释抗原，用鹅红细胞悬液作指示剂进行血凝抑制试验，测出30份鹅血清禽流感免疫抗体的平均效价为2^5.1。     

四君子汤发酵液的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响

本试验研究了四君子汤发酵液对S180肿瘤模型小鼠的抗肿瘤作用和对免疫功能的影响。采用血清溶血素法检测荷瘤小鼠体液免疫功能;MTT比色法检测淋巴细胞的增殖和流式细胞术检测T细胞亚群。结果表明,四君子汤发酵液具有明显的抑制肿瘤生长的作用,并且可以增强环磷酰胺（CTX）的抗肿瘤作用,降低CTX免疫抑制的副作用。四君子汤发酵液可以提高免疫器官指数;对肿瘤小鼠脾淋巴细胞转化、血清抗体产生都有促进作用;可以明显提高模型小鼠CD3^＋和CD8^＋T淋巴细胞水平,降低由于肿瘤引起的CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞比值的升高,与模型组比较差异显著（P〈0.05）。研究表明四君子汤发酵液的抗肿瘤作用和增强机体免疫调节功能有关。     

砷的生物功能及营养作用

砷的化学性质非常复杂，在自然界中以多种形态的化合物存在。砷的无机化合物有氧化物(As2O3)、硫化物(As2S3)及其盐类(砷酸铅等)。砷的氧化物和大部分盐类属高毒类化合物。常见的有机砷化合物主要有对氨基苯砷酸(阿散酸、AA制剂)、3-硝基-4羟基苯砷酸(洛克沙生)、对氨基苯砷酸钠等，这些都是常用的添加剂。1 砷的生物学功能　　有关砷的生物学功能及其特殊的作用未能被充分证实，因此对砷的功能还有争议。1．1 砷与磷酸脂的关系 砷与磷同属周期系第五类主族元素，性质相似，砷酸盐与同族的磷酸盐具有异质同晶现象，因此能组成类似的化合…     

山药多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

将150羽14日龄蛋公鸡随机分成3组,每组50羽,用新支二联弱毒苗点眼、滴鼻免疫的同时2个试验组分别肌肉注射高、低剂量的山药多糖（CYPS）溶液,对照组肌肉注射生理盐水。1次／d,连续3d。分别于免疫后第10,20,30,40,50,60天每组随机抽取8只蛋公鸡,翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制抗体效价;每组再随机抽取5只蛋公鸡心脏采血,分离淋巴细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖的动态变化,用流式细胞仪双染色法检测CD3^＋、CD3^＋CD4^＋和CD3^＋CD8^＋淋巴细胞含量。试验结果表明,山药多糖高剂量组的血凝抑制抗体效价、CD4^＋／CD8^＋比值明显高于对照组,并可显著促进T淋巴细胞增殖,提示山药多糖对鸡新城疫疫苗的免疫效果有明显增强作用。     

无机砷和有机胂制剂对仔猪生产性能的比较

试验选择20kg左右的杜长淮三元杂交仔猪100头,随机分为四组,各组基础日粮相同,对照组日粮中添加100mg/kg的有机胂(阿散酸),其余三组分别添加0.5mg/kg、0.8mg/kg、1.0mg/kg的无机砷(As2O3).结果表明对于仔猪的平均日增重和料重比,添加0.8mg/kg和1.0mg/kg的无机砷(As2O3),与添加100mg/kg的有机胂(阿散酸)差异不显著(P＞0.05),并且以添加0.8mg/kg的无机砷(As2O3)经济效益最好.     

用三色间接流式细胞术检测猪外周血白细胞亚群

用三色间接流式细胞术检测猪外周血粒细胞、B细胞和单核细胞亚群。来源于2头猪的12个猪外周血液样品裂解红细胞后,用3种SWC（swine workshop cluster）单抗和不同标记的二抗染色,对全体细胞设门,测定了SWC1、SWC3、SWC8在外周血白细胞上的表达,分析了嗜中性粒细胞（SWCI^＋SWC3^＋SWC8^＋）、嗜酸性粒细胞（SWCI^-SWC3^＋SWC8^＋）、B细胞（SWC1^-SWC3^-SWC8^＋）、单核细胞（SWC1^＋SWC3^＋SWC8^-）在外周血白细胞中的比例。结果显示,细胞分群情况良好,两组测定结果的均值及方差无显著差异,其中嗜中性粒细胞占（32．6±0．8）％,嗜酸性粒细胞占（4．7±0．3）％,B淋巴细胞占（3．7±0．2）％,单核细胞占（2．2±0．2）％。     

低毒力新城疫抗原抗体复合物疫苗研究

用低毒力新城疫病毒LaSota株作为复合物疫苗抗原,与新城疫特异性中和抗体混匀配制了不同比例的8种复合物疫苗,用1日龄SPF雏鸡进行免疫效果试验。试验l组～8组分别免疫复合物疫苗1～8,试验9组免疫常规新城疫活疫苗,试验10组为空白对照组。免疫后3周采血测定HI抗体效价,同时用新城疫强毒北京株F48E9攻击。试验l组～10组HI抗体效价分别为2^3.6、2^3.1、2^2.3、2^4.85、2^4.85、2^5.0、2^5.0、2^4.5、2^5.1、2^2.14。攻毒后1组～10组鸡的死亡率分别为30％、50％、90％、10％、0％、0％、0％、0％、09,6、100％。结果表明,低毒力新城疫病毒LaSota株与特异性抗体制备的复合物疫苗,可以减轻疫苗的毒副作用,提高疫苗的安全性,其免疫效果比常规活苗好。