鸡胚致死率作为检验鸡大肠埃希菌致病力指标的探讨

为探讨鸡胚致死率在检验鸡大肠埃希菌致病力方面的应用潜力,试验采用SPF级12日龄鸡胚和1日龄公雏鸡分别接种鸡大肠埃希菌菌株,检测20株鸡大肠埃希菌菌株对12日龄鸡胚和1日龄公雏鸡的致死率的相关性。结果显示,8株来源于患败血症鸡只的菌株致病力比较高,鸡胚致死率达到40%~70%;而来源于粪便的12株菌株中,10株菌株的致病力较低,其鸡胚致死率在0%~20%之间;雏鸡致死率与鸡胚致死率是相关的。表明鸡胚致死试验可反映出大肠埃希菌的毒力强弱,即鸡胚致死率可作为检验鸡大肠埃希菌致病力强弱的一种方法。     

滨海地区鸡致病性大肠埃希菌的分离鉴定

为了控制滨海地区鸡大肠埃希菌病的发生,对大肠埃希菌污染严重的部分鸡场进行了病原分离培养、血清型鉴定以及田间试验.结果表明,14株分离菌中有11株属于大肠埃希菌;分离株血清型主要有O78、O24、O93和O11 4种;免疫保护试验使大肠埃希菌病死率降低了6％.     

鸡大肠埃希氏菌制苗菌株的生物学特性研究

对制苗用鸡大肠埃希氏菌O1、O2、O78标准株的培养特性、免疫原性、菌株毒力及保存代次进行了研究。结果表明，3株标准菌在麦康凯琼脂、普通肉汤及鸡裂解血液马丁肉汤琼脂上生长良好，培养后的3株菌均符合鸡大肠埃希氏菌生化特性；用固体培养基培养后的菌液制成蜂胶灭活疫苗，免疫30日龄雏鸡，1－2周后产生保护力，3周攻毒时保护率为100％，对同型异株（湖北地方分离株）的攻击保护率在80％以上；3株菌都能使重20g小白鼠死亡、4日龄雏鸡死亡，剖解死亡雏鸡，均呈典型大肠杆菌病病理变化；连续传5－10代的3株菌，其毒力明显减弱。     

抗仔猪大肠埃希菌病高免卵黄抗体粉的研制

选用陕西部分地区规模化猪场分离的大肠埃希菌,通过营养琼脂增菌培养,制成油佐剂灭活疫苗免疫非免大肠埃希菌疫苗的健康蛋鸡,用微量凝集试验检测蛋鸡抗体水平,当抗体水平达8 log2以上时收取鸡蛋,分离卵黄用喷雾干燥机140 ℃进气、72 ℃出气,喷雾干燥成粉.选择未经过大肠埃希菌疫苗免疫母猪所产的新生健康仔猪50头分5组,按1、2、3、4 g/头每天饲喂进行预防试验.预防试验结果表明,2 g/头以上剂量饲喂制备的高免卵黄抗体粉能有效预防仔猪大肠埃希菌病.治疗试验结果表明,高免卵黄抗体粉对人工感染病例治愈率为90%,而应用庆大霉素的治愈率仅为50%.     

3株鸡大肠埃希菌地方分离株Ⅰ型菌毛的免疫原性

选择宁夏地区的大肠埃希菌3个优势血清型O15、O78、O18菌株,大规模培养后提取Ⅰ型菌毛,制备天然菌毛亚单位疫苗,免疫接种7日龄雏鸡后通过攻毒试验和抗体水平测定评价疫苗的免疫效果.结果表明,未免疫鸡的死亡率为40％～100％,而免疫鸡用同源菌株攻毒后死亡率为0～10％,用异源菌株攻毒后死亡率为20％～70％,免疫组鸡肝脏、心包和气囊的病变程度均显著轻于未免疫鸡,免疫鸡血清内出现高滴度的ELISA抗体.     

鸭源巴氏杆菌-大肠埃希菌二联多价蜂胶灭活疫苗的制备与免疫效果试验

本研究选取鸭致病性大肠埃希菌（E．coli）常见血清型O1、O2、O18、O78和3株分离自发病鸭场、毒力强、免疫原性好的巴氏杆菌（Pasteurella multocida,P砌）D22、D23、D157作为制苗菌株,分别以鲜血琼脂和马丁琼脂进行固体表面培养制备的抗原与蜂胶佐剂高速乳化,制备鸭多杀性巴氏杆菌-大肠埃希菌二联多价蜂胶灭活疫苗。结果表明,疫苗安全可靠,雏鸭一免后第14天对同源E．coli、Pm攻击免疫保护率为100％和90％;雏鸭二次免疫后第14天的免疫保护率均为100％。用间接ELISA对免疫鸭进行抗体消长规律检测,7日龄商品麻鸭首免后20d抗体达到高峰,抗体维持时间在54d以上;首免7d后进行二免,可产生显著高于一免的抗体水平。疫苗免疫雏鸭能够显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）地增强T细胞的免疫力,可维持3周左右。疫苗在4℃可保存12个月以上。     

张家口地区鸡致病性大肠埃希菌的分离鉴定与耐药性监测

从张家口地区鸡场怀疑患大肠杆菌病的病死鸡的肝脏、心包等组织中分离鉴定出27株大肠杆菌,对其进行大肠埃希菌O群抗原鉴定,共有6种O型血清型,O18、O78、O76为优势血清型,未定型菌3株,占待检菌株的11.1%;对27株分离菌进行抗生素敏感性试验,所有菌株对硝基呋喃类抗生素(NFT)和头孢菌素类抗生素(CFZ、CED)极度敏感,对其它抗生素的敏感性则各不相同。     

猪链球菌Ⅱ型高免卵黄抗体粉的研制

试验用猪链球菌Ⅱ型CVCC606株制备疫苗免疫产蛋鸡,首免后7d检测到低水平的卵黄抗体,再经3次强化免疫,于末次免疫后7d卵黄抗体效价达到9log2,最高效价达到10log2,高水平卵黄抗体可维持到末次免疫后50d,随后出现下降。收集抗体效价大于9log2的高免蛋卵黄,经喷雾干燥成卵黄抗体粉,效价在10log2以上,卵黄抗体粉质量稳定,于室温(25℃)保存6个月抗体水平无明显降低。体外抑菌试验表明,高免卵黄抗体粉可有效抑制猪链球菌Ⅱ型CVCC606株和猪链球菌II型强毒分离株。高免卵黄抗体粉可有效预防猪链球菌Ⅱ型菌株对BALB/c小鼠的致死性感染。     

一株O1血清型鸡大肠埃希菌iss基因的序列分析

采用1日龄雏鸡对1株O1血清型鸡源大肠埃希菌(E.coli)的致病性进行测定,并扩增iss基因.结果表明,鸡E.coli O1对1日龄雏鸡具有较强的毒力.iss基因在致病性鸡E.coli O1中的序列与已知禽大肠埃希菌iss基因序列同源性为100%,与人源大肠埃希菌iss基因核苷酸,序列同源性为90.9%,显示了此基因具有保守性.     

伊犁地区牛源大肠埃希菌血清分型和ERIC-PCR分型研究

调查某肉牛养殖场和其定点屠宰加工场中牛源大肠埃希菌的表型和基因型,为产业链中大肠埃希菌的污染情况提供科学依据。对分离鉴定的牛源大肠埃希菌采用O抗原多价血清进行检测,选取其中多价4和多价5的菌株进行单价PCR(O7、O39、O5、O114、O116、O6、O9、O30、O55)的扩增,同时进行ERICPCR的基因分型。结果表明,牛源大肠埃希菌分离株以多价4、多价5、多价6和多价19较多,检出率均超过5%。单价PCR检测出O5(2株)、O114(3株)、O116(4株)、O6(6株)、O9(2株)血清型。ERIC-PCR基因分型多价4和多价5中含有13种基因型,分成6簇,同源性在59%~100%。同种多价血清在一个簇,其中D簇包括12株菌,同源性在70%以上。然而同一种血清型的不同菌株其基因型不在一个簇内。     

不同免疫途径对商品蛋雏鸡新城疫黏膜及血清抗体的影响

通过不同的免疫途径对商品蛋雏鸡进行免疫,探讨不同的免疫途径对商品蛋雏鸡新城疫(Newcastle disease,ND)黏膜抗体及血清抗体的影响。结果表明,同时用新城疫弱毒疫苗免疫后,不同的免疫途径产生的新城疫黏膜抗体及血清抗体效价有较大差异。采用喷雾法于3日龄首免,15日龄二免,25日龄三免,鸡体产生保护水平(6 log2)以上的ND黏膜抗体和血清抗体最快、抗体水平最高、维持时间最长、总体免疫效果最好,而采用饮水免疫的试验组产生的ND黏膜抗体和血清抗体水平均不高,总体免疫效果最差。     

Immunogenicity of an Escherichia coli multivalent pilus vaccine in chickens

Immunogenicity of an oil-emulsified Escherichia coli multivalent pilus vaccine was evaluated in 4-week-old chickens. The vaccine contained 180 micrograms of pilus protein from each of serotypes O1 and O78 and 170 micrograms of pilus protein from serotype O2. Chickens were vaccinated twice subcutaneously at 4 and 6 weeks old and challenged via the posterior thoracic air sac with E. coli serotype O1, O2, or O78 2 weeks after the last vaccination. Unvaccinated challenged chickens suffered 8% to 26% mortality; no vaccinated chickens died. Vaccinated chickens had very mild gross lesions in the air sacs, livers, and pericardial sacs and eliminated E. coli more efficiently than the unvaccinated challenged chickens. The results showed that a multivalent pilus vaccine protects chickens against active respiratory infection.     

病死雏鸡的病原分离鉴定

从送检的３１只病死雏鸡中分离出３０株致病菌，其中沙门氏杆菌２７株，分离率９０％，大肠杆菌６株，分离率２０％。对其中５株沙门氏杆菌和４株大肠杆菌进行了系统生化鉴定及血清型鉴定，证实５株沙门氏菌中鸡白痢沙门氏杆菌占６０％（３／５），鸡伤寒沙门氏杆菌占４０％（２／５），４株大肠杆菌中Ｏ２２株，Ｏ６１株，Ｏ１１５１株。对分离菌进行了雏鸡致病力及抗菌药物敏感性试验，提出了相应的预防对策     

鸡大肠杆菌多价灭活油乳疫苗的研制

选择从河北省不同地区分离的6个优势血清型O78、O2、O111、O36、O35大肠杆菌菌株，经培养、混合、灭活后，用白油、吐温、司本－80按一定比例混合，制成鸡大肠杆菌多价油乳灭活疫苗。经安全性检验、稳定性检验、免疫力检验，结果表明，该苗安全有效，性能良好，接种后无不良反应，免疫肉鸡雏鸡后第7d可检测出抗体，在第56d抗体达到最高水平(7.3log2)，使鸡获得免疫保护，对大肠杆菌的感染率、发病率有明显下降，     

新疆阿拉尔垦区鸡致病性大肠杆菌的分离与鉴定

从新疆阿拉尔垦区的不同鸡场和屠宰点收集典型病变的病料100份,从中分离出大肠杆菌26株,并进行血清型鉴定,其主要血清型主要有O_(127)、O_(111)、O_(55)、O_(26)、O_(126)、O_(128)、O_(125)、O_(4),动物回归试验显示所分离的6种血清型的菌株对3～5日龄内雏鸡具有很强的致病作用,多数菌株可使接种雏鸡94.4%死亡。通过药敏试验结果表明,所分离26株大肠杆菌对头孢唑林钠最敏感,为该垦区鸡的大肠杆菌病诊断和预防提供技术支持。     

陕西省鸡胚源性大肠杆菌的分离鉴定

从陕西关中六个种鸡场的１９８只死胚及出壳弱雏中分离出９８株大肠杆菌,平均分离率为４９．５％。通过小鸡致病力试验,筛选出６３株具有致病力的菌株,占分离菌的６４．３％。生化鉴定表明,这些致病菌均符合大肠埃希氏菌的生化特性。血清型鉴定可确定６种,其中以Ｏ１、Ｏ２、Ｏ７８为主,分别占鉴定菌的４４．４％（２８／６３）、３３．３％（２１／６３）和９．５％（６／６３）,另三种为Ｏ２２、Ｏ７５、Ｏ８９共占８．０％（５／６３）。有３株未定型,占４．８％（３／６３）。用１６种抗生素进行药敏试验,对先锋霉素Ｖ和恩诺沙星高度敏感,对羧苄青霉素、氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、磺胺嘧啶、新霉素、链霉素中度敏感。     

鸡大肠杆菌多价灭活铝佐剂菌苗的研制

选择从新疆石河子地区分离的5个优势血清型078、02、07、0111、015大肠杆菌,经培养、混合、灭活后,与氢氧化铝按一定比列混合,制成鸡大肠杆菌多价灭活疫苗。经安全性检验、稳定性检验、免疫力检验,结果表明：该苗安全有效,性能良好,接种后无不良反应,免疫雏鸡后第7天可检出抗体,第35天抗体达到较高水平,使鸡获得免疫保护,对大肠杆菌的感染率和发病率有明显下降。     

鸡大肠杆菌抗体效价与攻毒保护率的平行关系试验研究

用与制造菌苗株一致的培养物制备检测抗原,检测30日龄雏鸡免疫后抗体效价,对不同抗体滴度的雏鸡进行了攻毒保护性试验.结果表明,抗体效价在3log2以下不具备保护力;抗体效价为4log2攻毒保护率≥60%;抗体效价为5log2时,保护率在80%以上;抗体效价在7log2时,保护率可达100%.     

An enzyme-linked immunosorbent assay for detection of antibodies against Escherichia coli: association between indirect hemagglutination test and survival

An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was modified for detection of antibodies against the two main pathogenic serotypes of Escherichia coli: serotypes O78:K80 and O2:K1. The ELISA was a more sensitive and repeatable test than the indirect hemagglutination test (IHT), which is a common method for detecting antibodies against E. coli. Cross-reactivity between the two strains was measured by reacting antisera of each serotype against homologous and heterologous antigens. The results suggest that aside from similar determinants expressed by the two serotypes, serotype O2:K1 expresses more strain-specific determinants than does O78:K80. Comparison of mean antibody titers of immunized chicks by IHT and ELISA along the primary response revealed that during the first 15 days after immunization with inactivated E. coli, the titers in both tests were parallel. After 15 days post-immunization, antibody titers measured by IHT decreased rapidly, whereas titers measured by ELISA decreased only slightly. In addition, a higher correlation was found between titers detected by ELISA and survival through challenge with E. coli than between titers detected with IHT and survival through challenge. The results suggest that the ELISA is a better test for detection of antibody in flocks suspected of being infected with E. coli.     

Virulence factors of avian pathogenic Escherichia coli strains isolated from chickens with colisepticemia in Japan

The virulence factors of avian pathogenic Escherichia coli (APEC) isolated in Japan were investigated. Serogroups O, serotypes K1 and K5, and genes cva C, iss, iutA, papA, tsh, and usp, which have been thought to be related to virulence, were examined for their association with E. coli strains isolated from diseased and healthy chickens. The frequently recognized serogroups O1, O2, and O78 were found in 56 of 125 (44.8%) strains of diseased chickens (APEC) versus 13 of 100 (13.0%) strains of healthy chickens (commensal E. coli), a significant difference at risk ratio < 0.01. Although iss, iutA, and tsh were widely distributed in the APEC irrespective of O serogroup, papA, usp, and the K1 serotype were detected in serogroup O2 of APEC. The kfiD gene related to the K5 capsule and VT, LT, and ST genes related to exotoxins were not detected in any strains examined.