H3N2亚型犬流感病毒血凝及血凝抑制试验的研究

为优化H3N2亚型犬流感病毒(CIV)的血凝抑制(HI)试验方法,本研究应用不同种类红细胞进行CIV的血凝(HA)试验,应用不同种类红细胞和不同血清处理方法进行CIV的HI试验,评价其对HA和HI试验的影响。结果表明,H3N2亚型CIV对鸡和犬红细胞的凝集性最好,对小鼠、猪和牛红细胞的凝集性较差。HI试验应用鸡红细胞悬液效果最好,受体破坏酶(RDE)和高碘酸钾处理可以有效去除犬血清中非特异血凝抑制素,但高碘酸钾对血清特异性抗体有损耗。本研究筛选出H3N2亚型CIV HI试验的最佳方法,为犬流感的血清学诊断提供技术支持。     

水禽禽流感H5N1亚型改良HI抗体检测方法的研究

鉴于在采用1％鸡红细胞悬液作为指示细胞检测水禽血清的HI抗体效价水平过程中常出现非病毒性凝集情况,亟需要建立一种快速简便经济的适合水禽血清抗体效价检测的方法。本研究通过对未经处理与采用不同红细胞吸附处理被检水禽血清以1％鸡、鸭或鹅红细胞悬液进行测定其HI抗体效价的结果对比,结果表明建立采用1％与待检水禽血清同源1％红细胞悬液做指示细胞的改良HI试验比采用鸡红细胞悬液测定结果高1～1．5 log2,且可以有效避免非病毒性凝集情况的出现。     

简述影响禽流感HA和HI试验准确性的因素

为了提高禽流感HA-HI试验的准确性,笔者分析了可能影响禽流感HA和HI试验结果的9个因素:阿氏液和PBS液的配制、血凝板、待检血清、1%鸡红细胞悬液、冻融标准抗原和阳性血清、正确使用多道移液器、平行对照、抗原返滴和结果判定,以期为禽流感HA-HI试验研究提供参考。     

保存与现配红细胞悬液在新城疫血凝与血凝抑制中的对比试验

为了研究红细胞悬液保存时间对新城疫血凝与血凝抑制试验的影响,同时比较用卵黄和血清检测新城疫抗体水平的结果差异,笔者在不同地区随机选取72份鸡蛋（其中16份鸡蛋对应16份血清）,用保存1周的红细胞悬液和现配红细胞悬液进行了对比试验。结果显示：在新城疫血凝与血凝抑制试验中,保存1周的红细胞悬液HA试验的结果比现配红细胞悬液低2个滴度;用4单位工作量进行HA试验时,得到了相同的结果;用卵黄测得的新城疫抗体水平稍低于用血清测得的结果,但差异不明显。表明用保存1周的红细胞悬液测定卵黄中新城疫的抗体水平比用现配红细胞悬液所测得的抗体水平低接近1个滴度,并且可以用卵黄代替血清检测新城疫抗体水平。     

新城疫HA-HI试验中可用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞

在鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验中,将豚鼠红细胞用戊二醛醛化处理后配制成2%细胞悬液,与2%新鲜豚鼠红细胞、1%新鲜鸡红细胞获得的检测结果基本一致.经醛化的豚鼠红细胞在4℃或室温条件下也能长时间保存而不溶血.结果表明,在新城疫HA-HI试验中可以用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞.     

兔出血症的免疫诊断及防治

兔病毒性出血症又称兔瘟。自1984年在我国江苏南部地区首次暴发后,短期内迅速蔓延至全国20几个省(市),严重地威胁着养兔生产。为了有效地控制此病,不少院所进行研究并取得了较好效果。本文就我国对此病免疫诊断及防治方面的研究概况综述如下:兔出血症的免疫诊断一、血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验HA 和 HI 是目前诊断兔出血症最基本方法。刘胜江等(1984)使用高速离心的病兔肝悬液为待检物,以1%人○型红血球在96孔 U 型微量反应板上进行了 HA 和 HI 试验,对江苏南部地区暴发的病兔进行检测,证实本病在我国首次流行。张再清等(1989)用戍二醛处理人红细胞代替新鲜人红细胞     

“兔瘟”快速诊断的研究

瓷板HA试验与96孔微量板HA试验相比,微量板法HA价在1:320～1:49 930时,瓷板法阳性检出率为95.2～100％。本试验在15～25℃室温下,1～3分钟内判定结果。用瓷板进行HA和HI试验,用过的瓷板易于洗净擦干,即可马上重复使用,不影响再次检验的质量。     

鸡醛化红细胞在鸽Ⅰ型副粘病毒HA和HI试验中的应用

在血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验中，传统的方法采用新鲜红细胞。由于新鲜红细胞容易破碎，保存时间短，每次试验需临时准备，使用很不方便。本文采用醛化红细胞进行鸽1型副粘病毒的HA和HI试验，并与新鲜红细胞进行对照，结果表明，两种红细胞在鸽1型副粘病毒的HA和HI试验中的结果基本一致，而使用醛化红细胞更为便利。现将结果报道如下。1材料与方法l．l鸽1型副粘病毒（鸽A／PMV－1）；鸽A”MV－IZH株由本室鉴定保存，在9－11日龄鸡胚培养后收获尿囊液无菌检查后置4C保存备用。用于HI试验的病毒经0．2％甲醛37C灭活24小时后置…     

血凝、血凝抑制实验在生产中的应用详解

1血凝实验(HA)、血凝抑制实验(HI)简介一些禽病病毒如新城疫病毒、流感病毒、传染性支气管炎病毒(经浓缩和酶处理后)、腺病毒127株及几种支原体具有凝集红细胞的活性(血凝素-神经酸酶HN蛋白与红细胞表面受体结合)。这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所抑制,即血凝抑制实验(HI)。用该实验可检测鸡体注苗后抗体应答水平及证实是否曾受感染。HI实验的基本成分是血凝(HA)抗原,系列稀释的血清和红细胞悬液(0·5%~1·0%)。实验可在小试管或微量板(96孔V型板)中进行。生产中一般多用固定抗原稀释血清法(β-法),而很少用固定血清稀释抗原…     

血凝抑制试验的几点体会

很多研究者认为，红细胞的浓度对血凝抑制试验的结果有很大影响，一般红细胞浓度增加(从0．5％-1％)HA滴度下降，HI滴度有所上升。     

禽呼肠孤病毒ZJS株种毒的纯净性鉴定

将禽呼肠孤病毒ZJS株细胞毒(弱毒)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传代,对其CI、C2、C3代种毒进行了无菌和支原体污染检验,对C5、C8和C10代种毒进行了外源病毒污染检验,对C3、C8和C10代种毒还进行了特异性鉴定,以确定禽呼肠孤病毒ZJS株细胞毒(弱毒)作为种毒的可行性.结果显示,禽呼肠孤病毒ZJS株细胞毒(...     

Brucella melitensis infection in dog: a critical issue in the control of brucellosis in ruminant farms

Canine brucellosis is a contagious disease associated with health implications for humans as well as for a wide range of wild and domesticated animals. In this study, 173 dog blood specimens were sampled from herding dogs in three different provinces including Tehran (n = 127), Qom (n = 40) and Alborz (n = 6) provinces. The presence of Brucella antibodies was determined using Rose Bengal plate test (RBPT), slow agglutination test (SAT) and 2-mercaptoethanol (2-ME), respectively. The seropositive samples were further screened using blood culture and PCR tests to identify and differentiate the implicated Brucella species. According to our results, 24.3% (42/173), 13.8% (24/173) and 6.3% (11/173) of blood samples were tested positive using RBPT, SAT and 2-ME, respectively. However, among 42 seropositive samples, only 38.1% (16/42) and 14.2% (6/42) were positive by PCR and culture, respectively. Brucella melitensis biovar 1 and biovar 2 was isolated from the bacterial cultures of 6 blood samples and confirmed by biotyping, AMOS PCR and Bruce-ladder PCR assays. These findings highlight the potential risk of Brucella transmission from dog to humans along with other livestock and reflect the critical role of infected dogs in the persistence of Brucella infections among ruminant farms. This study stresses the need for further epidemiological investigations on canine brucellosis among herding dogs and suggests the systematic screening of the disease among companion animals such as dogs in order to improve brucellosis surveillance and control programs.     

鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感四联浓缩油乳剂灭活疫苗的研制

利用PALL滤器分别对鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征和禽流感4种病毒进行10倍浓缩,然后按照一定比例将抗原浓缩液与油佐剂配比,制备了四联油乳剂灭活疫苗。通过了实验室检查,田间试验表明:开产前种鸡免疫后第4周,新城疫和禽流感的HI抗体滴度在10.2log2以上、传染性支气管炎和减蛋综合征均大于9.5log2,且抗体高峰维持时间长;SPF鸡免疫后4周进行攻毒保护试验,结果免疫攻毒组保护率100%,对照组攻毒发病率100%。试验结果表明:采用抗原浓缩技术制备的四联苗抗体水平高,维持时间长,能够有效地保护鸡群。     

紫花苜蓿种子活力测定方法的比较

采用标准发芽法、胚根突出法、低温发芽法、电导率法对紫花苜蓿(Medicago sativa)10个种子样品的种子活力进行了测定,结果表明,基于标准发芽法的发芽率和活力指数,可将10个种子样品的种子质量分为3级;基于胚根突出法中胚根突出数可将其分为6级,计数胚根突出数的最适时间为24和28h;基于低温发芽法的活力指数和发芽势可将其分为6级;而电导率法可将其分为7级。因而,电导率法作为紫花苜蓿种子活力评价指标最为敏感,其次为胚根突出法和低温发芽法,标准发芽法最不敏感。     

禽波氏杆菌病病原性的研究

从患眼炎、鼻窦炎的不同地点、不同时间、不同发病鸡群的病料共分离到１７株细菌，经形态学、培养特性、生化试验和动物回归试验等结果表明，该细菌能运动、无芽孢的革兰氏阴性小杆菌，即禽波氏杆菌。该菌在鲜血平板上产生β溶血，在麦康凯平板上生长良好，形成光滑中央突起的珍珠状菌落。不利用糖类，不能在６．５％ＮａＣｌ培养基中生长，尿素酶和硝酸盐还原试验均呈阳性，能凝集豚鼠和其他动物红血球。人工接种细菌均能使雏鸡发生相似于自然病例的临床症状和死亡，并且从病变部位回收到相应细菌。     

氟苯尼考悬乳剂的安全试验研究

通过试验研究对氟苯尼考悬乳剂的安全性进行评价。采用豚鼠和家兔分别进行本品的全身用药过敏性和肌肉局部刺激性、红细胞体外溶血性试验。结果显示本品临床给药剂量对豚鼠无全身过敏性、对家兔肌肉注射给药无明显局部刺激性、对家兔红细胞无体外溶血性。表明本品的安全性良好,为实际应用提供了依据。     

猪链球菌2型分离株的生物学特性试验

对从济南某猪场急性死亡的病例中分离得到的猪链球菌2型病原菌,进行生化试验、药敏试验及致病性试验研究。生化试验表明其各项指标均符合链球菌的标准,药敏试验结果表明该菌对多种抗菌素均有耐药性,对复方新诺明、氨苄西林、恩诺沙星等高度敏感,动物致病性试验表明能100%致死小白鼠。     

应用琼脂免疫扩散试验检测猪伪狂犬病抗体的研究

建立了ＡＧＩＤ用于猪伪狂犬病（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ,Ｐｒ）的诊断。对９８份被俭血清的ＡＧＩＤ结果与ＳＮ结果比较,当ＳＮ滴度大于１：８时两者的阳性检出符合率为１００％,ＳＮ滴度小于或等于１：８时,两者的阳性检出符合率为８７．５％,ＡＧＩＤ和ＳＮ总的阳性符合率为９４．４％,结果表明,ＡＧＩＤ对Ｐｒ可进行特异性诊断,流行病学调查和免疫动态监测。     

重组伪狂犬病病毒(rPRV-GP5)对绵羊的安全和效力试验

为了验证表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的重组伪狂犬病病毒(rPRV-GP5)的安全性和免疫原性,将10只5～6月龄健康绵羊分成三组,安检组(3只)肌注108.0PFU/只、效检组(4只)肌注106.0 PFU/只,3只作为不接种对照组.接种后14 d,效检组与对照组每只臀部肌注伪狂犬病病毒"双城系"猪源强毒S株103 LD50,结果效检组全部保护,对照组全部死亡,安检组未见异常.结果表明,重组病毒完全符合伪狂大病活疫苗制造及检验规程中对疫苗的安全和效力检验标准.     

Comparison between IMMUNODOT tests and the intradermal skin test in atopic dogs

This study evaluated a new perspective in the diagnosis of dermatitis in dogs with signs suggestive of allergic skin disease. The results obtained with CMG IMMUNODOT tests using the technique of allergen-specific strip tests, as employed for human allergy diagnosis, were compared with those obtained by the intradermal skin test (IDST). Forty-eight cases completed the diagnostic evaluation, which included IDST, flea-control program, exclusion of sarcoptes and, for some cases, a 1- to 2-month stabilization period on a restricted protein source diet and testing the serum in the presence of allergen-specific IgE and total IgE. The most common disorders included house and storage dust mites, allergic dermatitis and flea-allergic dermatitis together with atopy. This was confirmed serologically. In the case of positive IDST to pollens, Aspergillus spp. and cat epithelium, CMG IMMUNODOT strip tests were negative. A total of 25% of cases were considered to be primarily associated with food hypersensitivity, but only 4% were confirmed serologically. This study emphasizes the value of CMG IMMUNODOT tests as a support in the diagnosis of dog allergy.