三种底物在检测植酸酶酶活中的对比研究

试验采用完全随机的2×3×6试验设计,考察在不同pH(5.0、5.5)条件下应用3种底物(SigmaP0109、P8810和P3168),检测不同酶活水平(1000、3000、5000、6000、7000U/g和10000U/g)的植酸酶时,其检测值之间的对比关系。结果表明:不同pH条件下,P0109与P3168的检测结果之间差异均不显著,P8810与P3168的检测结果之间差异均极显著;底物P0109可以完全替代P3168进行植酸酶酶活测定;P8810与P3168的检测结果之间存在线性关系,线性方程为:y(pH5.5,P3168)=0.7649x(pH5.5,P8810) 152.18(R2=0.9963)、y(pH5.0,P3168)=0.8767x(pH5.0,P8810) 34.818(R2=0.9979),T检验分析曲线换算值和验证值结果差异不显著,证明两个线性方程可以作为底物P8810替代P3168进行植酸酶酶活测定的换算公式。     

不同来源植酸酶抗逆性的研究

本试验通过模拟饲料制粒过程及动物胃环境,对不同来源的植酸酶在经过高温和酸处理后酶活变化情况进行了对比分析,为植酸酶的实际应用提供理论依据。(方法)搜集到11种市售的植酸酶产品,编号为1~11采用湿热法,温度分别设置为75℃、80℃和85℃,处理时间为2.5min,p H处理值设定为4.0、3.0和2.5,处理时间为2h。结果表明,不同来源的植酸酶耐温性和耐酸性存在很大差异,从耐温性看,温度在75℃~80℃时,1号样相对酶活最高,而继续升至85℃时,11号样稳定性最好,10号样次之;从耐酸性看,p H值从4.0降至3.0时,10号样相对酶活最高,11号样次之,其他稳定性均比较差。因此,综合考虑,在模拟饲料制粒条件和动物胃环境下评定酶的作用效果,以10、11号样耐受性最好,4、5号样酶活稳定性最差。     

液体植酸酶的稳定性研究

此文研究了液体植酸酶在不同贮存温度下的酶活稳定性,以及不同稀释倍数和调节稀释后酶液的pH时液体棱酸酶的活性和物理性状的影响,同时探讨了液体植酸酶与液体木聚糖酶复配的稳定性能。试验结果表明：液体植酸酶在低温下贮存酶活稳定性较好;不同稀释倍数对液体植酸酶活性无明显影响,但稀释倍数较大显著影响？植酸酶溶液的物理性状;通过调节稀释后的植酸酶溶液的pH可以显著改善其物理性状。此外,与液体木聚糖酶复配无论是复配后酶液蛇活性还是其物理性状均具有很好盼稳定性。     

植酸酶包埋后酶活和热稳定性的变化规律研究

为了了解植酸酶在包埋状态下酶活及酶性的变化,分别对酶的释放情况和热稳定性进行了研究。结果表明,随着时间的延长,包埋酶释放出的酶活逐渐上升(P<0.01),60min时达到最大值;而未包埋酶释放出的酶活逐渐下降(P<0.01),60min时达到最小值。包埋酶和未包埋酶在30、40、50、60、70、80、90和100℃的条件下,随着温度的升高,残留的植酸酶活力下降(P<0.01)。对于包埋酶,当温度升高到70℃时,植酸酶相对酶活仍保持在93%(P>0.05);当温度升高到80℃时,植酸酶的相对酶活才明显下降(P<0.01),不过在100℃时,仍能保持67%的酶活(P<0.01)。对于未包埋酶,当温度升高到60℃时,植酸酶相对酶活明显下降(P<0.01);当温度升高到100℃时,植酸酶相对酶活仅有23%(P<0.01)。通过在统一温度条件下,对包埋酶和未包埋酶处理组的相对酶活的对比发现,在50℃以下时,二者差异不显著,当温度超过60℃时,包埋酶的相对酶活极显著高于未包埋酶。     

植酸酶包埋后酶活和热稳定性变化的规律研究

为了了解植酸酶在包埋状态下酶活及酶性的变化,分别对酶的释放情况和热稳定性进行了研究.结果表明,随着时间的延长,包埋酶释放出的酶活逐渐上升(P＜0.01),60min时达到最大值;而未包埋酶释放出的酶活逐渐下降(P＜0.01),60 min时达到最小值.包埋酶和未包埋酶在30、40、50、60、70、80、90和100℃的条件下,随着温度的升高,残留的植酸酶活力下降(P＜0.01).对于包埋酶,当温度升高到70℃时,植酸酶相对酶活仍保持在93%(P＞0.05);当温度升高到80℃时,植酸酶的相对酶活才明显下降(P＜0.01),不过在100℃时,仍能保持67%的酶活(P＜0.01).对于未包埋酶,当温度升高到60℃时,植酸酶相对酶活明显下降(P＜0.01);当温度升高到100℃时,植酸酶相对酶活仅有23%(P＜0.01).通过在统一温度条件下,对包埋酶和未包埋酶处理组的相对酶活的对比发现,在50℃以下时,二者差异不显著,当温度超过60℃时,包埋酶的相对酶活极显著高于未包埋酶.     

转植酸酶基因玉米植酸酶稳定性的研究

试验以转植酸酶基因玉米(PTC)为原料,通过烘箱高温处理,研究PTC的耐热性能;通过在不同挤压温度(60、80和100℃)和不同物料(750 U/kg PTC组和6 500 U/kg PTC组)组合下,研究PTC在制粒加工工艺中的稳定性。结果表明:PTC具有较好的耐热性能,120℃烘箱处理5 min,其植酸酶酶活损失率为13.38%;但在制粒温度上升时,植酸酶酶活损失率呈明显上升趋势,当制粒温度达到100℃时,PTC的植酸酶酶活损失率在90%以上。     

饲用植酸酶酶活测定过程中底物的影响研究

参照国标法测定饲用植酸酶活性,研究不同来源的底物植酸钠、底物浓度、底物pH对饲用植酸酶活性的影响。结果表明,以P8810为代表的植酸钠盐水合物作为底物,其测定出的植酸酶酶活显著高于使用以P3168为代表的植酸钠作为底物所测定的植酸酶酶活。以P8810作为底物时,其反应浓度在高于6.6 mmol/L时,会产生底物抑制效应。以P8810作为底物时,调节底物pH至国标中定义的5.5与未调节pH所测得的植酸酶酶活相比较,差异并不显著,且在低底物pH条件下,某些植酸酶同样能够释放出最大催化活性。因此现有的国标法测定饲用植酸酶活性已与实际应用有一定的差别,不能照搬国标方法测定现有饲用植酸酶产品。     

使用植酸酶的五个注意事项

<正>植酸酶作为一种新型微生物饲料添加剂,不仅能提高植酸磷的利用率,促进蛋白质、氨基酸和矿物质等营养素的消化吸收,促进动物生长发育,而且能够减少磷、氮等元素的污染,大大提高养殖业的经济和社会效益,但使用植酸酶时还应注意以下问题。1选择酶活性高的合格产品植酸酸酶是一种微生物制品,商品制剂多由曲霉菌发酵而获得。植酸酶的主要指标是单位酶活性(1单位酶活(IFTU)是指在37℃、pH值     

6种商品植酸酶对热和pH的耐受性比较

本试验测定了六种商品植酸酶(A、B、C、D、E和F)分别在不同的温度和pH条件下的酶活性,以比较这6种商品植酸酶对不同温度和pH的耐受性。试验结果表明,A、B、C、D、E和F等6种植酸酶产品经40℃水浴处理15h后残留的相对酶活分别为88%、83%、93%、76%、51%和43%;经80℃水浴处理1min后残留的相对酶活分别为97%、96%、69%、84%、67%和98%;经95℃水浴处理5min后残留的相对酶活分别为83%、76%和22%;在偏离pH5.5时,6种植酸酶的相对酶活均呈大幅下降,其中在pH6.0时均下降到60%以下,在pH2.0时分别下降至43%、42%、24%、30%、45%和52%。     

水浴法测定饲用植酸酶耐热性方法的研究

试验研究不同条件对植酸酶水浴耐热性的影响。分别稀释4种植酸酶酶活力40、20、10、2 U/mL,测定80℃和85℃水浴5 min的耐热性。结果表明,稳定性强的植酸酶受酶浓度的影响较小,稳定性较差的植酸酶受影响较大,当处理液酶活力低时,耐热性结果较高。取3种植酸酶样品,分别使用缓冲液Ⅰ、缓冲液Ⅱ、水为耐温稀释缓冲液,测定85℃水浴5 min耐热性,结果表明:缓冲液Ⅰ作为稀释缓冲液测定的耐热性结果最高,其次是缓冲液Ⅱ,水作为稀释缓冲液时测定的耐热性结果最低。取3种植酸酶样品,分别在pH值5.5和5.0缓冲体系中测定85℃水浴5 min耐热性,结果表明,植酸酶在与最适pH值相近的条件下进行耐热性处理,测定的耐热性结果相对较高。研究表明,本试验的3种条件对水浴法测定植酸酶耐热性的结果均有影响,制定检测标准时需要明确测定条件。