奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌基因多态性分型试验

利用随机引物AP-7,建立引物随机多态性扩增(RAPD)体系对71株引起内蒙古和贵州地区奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌分离株进行基因分型研究。结果表明,71株金黄色葡萄球菌均得到清晰的RAPD指纹图谱,扩增产物为2～9条带,产物大小为240～4 500bp。菌株共分为6个基因型,其中Ⅰ型17株(占23.9%)、Ⅱ型3株(占4.2%)、Ⅲ型33株(占46.5%)、Ⅳ型15株(占21.1%)、Ⅴ型2株(占2.8%)、Ⅵ型2株(占2.8%)。Ⅰ型为内蒙古地区的流行优势菌群,Ⅲ型为贵州地区的流行优势菌群。两地区各基因型菌株比例有明显差异,这可能与奶牛养殖业水平和环境差异有关。     

包头地区奶牛子宫内膜炎葡萄球菌致病菌的分离与鉴定

为了解包头不同辖区奶牛子宫内膜炎葡萄球菌致病菌的分离菌株及分离率,以期为指导该地区兽医临床合理用药提供科学依据,本试验从包头市所属昆区、青山区、九原区及石拐区的奶牛养殖场采集到子宫内膜炎患牛的子宫分泌物120份,对其进行了葡萄球菌分离试验,并采用形态学观察和分子生物学方法,对其进行了种属水平鉴定。从120份奶牛子宫内膜炎患牛的子宫分泌物中共分离到50株葡萄球菌(41.7%),结果显示:昆区、青山区、九原区及石拐区奶牛子宫内膜炎分泌物的葡萄球菌分离率分别为43.3%(13/30)、36.7%(11/30)、40%(12/30)、46.7%(14/30)。分离的葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌32株(64.0%),凝固酶阴性葡萄球菌18株(36.0%)。在凝固酶阴性葡萄球菌中,产色葡萄球菌8株(16.0%),腐生葡萄球菌5株(10.0%),表皮葡萄球菌2株(4.0%),头葡萄球菌2株(4.0%),溶血葡萄球菌1株(2.0%)。致病性试验结果显示,对小鼠腹腔注射40h内,10株分离菌株均能引起小鼠死亡,其中,致死率最高的是金黄色葡萄球菌(80.0%);致死率最低的是溶血葡萄球菌(40.0%);其他菌属的致死率在50.0%~70.0%之间。     

产后正常奶牛子宫内细菌的研究

研究不同产后时期正常奶牛子宫内细菌的数量变化、种类及细菌与子宫复旧的关系。实验发现 ,产后第 2 ,7,14,2 4d子宫内细菌平均数量为 (1.91±0 .44 )× 10 5,(3.93± 1.6 1)× 10 6,(3.40± 0 .94)× 10 3 ,(2 .49± 2 .92 )× 10 2 个/mg子宫样品 ,而产后 39d时子宫内细菌数量均小于 1× 10个 /mg子宫样品 ;共分离到细菌 5 7株 ,其中葡萄球菌 2 4株 (占 42 .1% )、大肠杆菌 11株 (占 19.3% )、链球菌 7株 (占 12 .3% )、芽孢杆菌 8株 (占 14% )及微球菌 7株 (占 12 .3% ) ;经直肠检查在产后 39d时所有受试牛均完成了子宫复旧。结果表明 :细菌从分娩前的无菌状态增加到最高点较迅速 ,约 7d左右 ,而下降比较缓慢 ,到复旧完成 (39d)时 ,才接近于无菌状态 ;产后奶牛子宫内的细菌有葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、芽胞杆菌和微球菌 ;产后子宫内一定数量的细菌对子宫复旧无显著影响。     

南宁市郊奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定

在南宁市郊两个奶牛场采集了45份奶牛子宫分泌物,其中10份来自健康奶牛,35份来自患子宫内膜炎奶牛,对其进行实验室细菌学分离鉴定及统计分析.结果共分离出69株病原微生物,其中金黄色葡萄球菌26株,占分离总数的37.7%;表皮葡萄球菌9株,占13.0%;链球菌10株,占14.5%;大肠杆菌14株,占20.3%;变形杆菌3株,占4.3%;绿脓杆菌1株,占1.4%;化脓放线菌4株,占5.8%;酵母菌2株,占2.9%,揭示了被检奶牛场奶牛子宫内膜炎病原菌的种类及比例.     

子宫内膜炎不孕症奶牛子宫内细菌分离鉴定

在调查奶牛不孕症的基础上,进行分离鉴定临床确诊的子宫内膜炎不孕症奶牛子宫内细菌。普查了共853头奶牛,不孕症奶牛占普查牛11.8%,子宫内膜炎不孕症奶牛占不孕症奶牛的66.3%,其它原因不孕症奶牛占不孕症奶牛的33.7%。被测奶牛子宫内容物均有细菌存在。从临床确诊的子宫内膜炎不孕症奶牛的子宫内容物中,分离到细菌菌株119株,其中葡萄球菌36株、链球菌40株、大肠杆菌36株、变形杆菌4株、芽孢杆菌1株、化脓棒状杆菌1株。     

奶牛产后急性子宫内膜炎病原的分离与鉴定

通过研究奶牛产后急性子宫内膜炎致病微生物组成,揭示该病主要病原并为临床治疗提供依据。以产后6～10 d急性化脓性卡他性子宫内膜炎患牛80头为研究对象,对子宫内容物进行细菌和真菌的分离鉴定。共分离到195株细菌及真菌,其中35.4%具有溶血性,50.8%对试验动物有致病性;大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分离率较高,为83.75%和62.5%,其次是奇异变形杆菌(36.25%)、白色念珠菌(20%)和肺炎克雷伯氏菌(17.5%)。该病的90%为混合感染,细菌混合感染(70%)主要由大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和奇异变形杆菌组成;真菌与细菌混合感染占20%,均有白色念珠菌存在;细菌单一感染占10%。结果表明,奶牛产后急性子宫内膜炎主要致病菌是大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、奇异变形杆菌,20%受试牛存在着以白色念珠菌为主的真菌感染。     

奶牛子宫内膜炎主要病原菌的调查

为了掌握淮安地区奶牛子宫内膜炎主要病原菌的种类及分布情况,以便给淮安地区奶牛场制定科学的预防计划,在淮安的4个地区,按不同季节,采集32份患有子宫内膜炎的奶牛子宫分泌物,进行细菌学分离鉴定与统计分析。结果共分离出84株细菌。其中,金黄色葡萄球菌17株,占20.2%;表皮葡萄球菌9株,占10.7%;粪链球菌2株,占2.3%;化脓链球菌7株,占8.3%;大肠杆菌14株,占16.7%;变形杆菌7株,占8.3%;克雷伯氏菌7株,占8.3%;志贺氏菌3株,占3.6%;沙门氏菌7株,占8.3%;绿脓杆菌5株,占6%;白色念珠菌2株,占2.3%;化脓放线菌4株,占4.7%。经分析发现,奶牛子宫内膜炎病原菌的种类季节差异明显,夏秋以球菌感染为主,冬春季节以肠道杆菌感染为主。     

淮安地区奶牛子宫内膜炎主要病原菌的种类和分布情况

在淮安的4个地区,按不同季节,采集32份患有子宫内膜炎的奶牛子宫分泌物,进行细菌学分离鉴定与统计分析。结果共分离出84株细菌,其中金黄色葡萄球菌17株,占20.2%;表皮葡萄球菌9株,占10.7%;粪链球菌2株,占2.3%;化脓链球菌7株,占8.3%;大肠杆菌14株,占16.7%;变形杆菌7株,占8.3%;克雷伯氏菌7株,占8.3%;志贺氏菌3株,占3.6%;沙门氏菌7株,占8.3%;绿脓杆菌5株,占6%;白色念珠菌2株,占2.3%;化脓放线菌4株,占4.7%。经分析发现,奶牛子宫内膜炎病原菌的种类季节差异明显,夏秋以球菌感染为主,冬春季节以肠道杆菌感染为主。     

雁门关地区奶牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定及其致病性

为给黄土高原舍饲养殖场科学防治奶牛子宫内膜炎提供理论依据,对该地区2市4县13个规模奶牛场和5个自然村,共77头患子宫内膜炎的奶牛子宫分泌物进行细菌分离鉴定,并对致病性不明的主要分离菌进行了大鼠子宫致病性试验。结果分离鉴定出12个菌属、23个菌种、108株细菌,主要细菌为芽孢杆菌(30.56%)、大肠埃希菌(14.81%)、肠球菌(12.96%)、葡萄球菌(9.26%)、乏养球菌(9.26%)、链球菌(6.48%)等;对主要分离菌的致病性研究发现除缺陷乏养球菌外,凝结芽孢杆菌、大肠杆菌(O20)、屎肠球菌等均可引起子宫内膜炎。表明引起该地区奶牛子宫内膜炎的致病菌主要为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、化脓链球菌、不动杆菌、凝结芽孢杆菌、大肠杆菌(O20)、屎肠球菌,可为有效治疗本地区奶牛子宫内膜炎提供可靠的理论基础。     

宁夏地区奶牛乳房炎源凝固酶阴性葡萄球菌的菌种分布及药敏试验

为了解宁夏地区奶牛乳房炎源性凝固酶阴性葡萄球菌的种类及耐药情况,从宁夏地区部分奶牛场(牧场、养殖小区)采集临床型乳房炎乳样94份、隐性乳房炎乳样70份,进行细菌分离鉴定和药敏试验。结果表明:细菌分离鉴定得到凝固酶阴性葡萄球菌33株,其中产色葡萄球菌13株(占39.4%),耳葡萄球菌4株(占12.1%),缓慢葡萄球菌4株(占12.1%),小牛葡萄球菌3株(占9.1%),中间葡萄球菌2株(占6.1%),松鼠葡萄球菌2株(占6.1%),腐生葡萄球菌2株(占6.1%),溶血葡萄球菌1株,马胃葡萄球菌1株,人葡萄球菌1株;凝固酶阴性葡萄球菌对庆大霉素、氧氟沙星、头孢曲松绝对敏感,对林可霉素耐药。     

奶牛隐性乳房炎葡萄球菌分离株药敏试验

为了解辽宁部分地区奶牛隐性乳房炎葡萄球菌的耐药性,采用生化鉴定试验对采集的奶牛隐性乳房炎阳性乳样进行了葡萄球菌的鉴定,采用肉汤微量稀释法测定葡萄球菌分离株对22种抗菌药物的敏感性。结果显示,31株奶牛隐性乳房炎葡萄球菌分离株对22种抗菌药物均产生了不同程度的耐药性,对氨苄西林、苯唑西林、青霉素、头孢氨苄、头孢唑林、林可霉素及磺胺甲噁唑耐药率为100%,对喹诺酮类药物敏感。100%葡萄球菌分离株同时耐5类以上(含5类)抗菌药物,以耐7类抗菌药物为主,占38.7%,其余依次为5耐、6耐及8耐,比率分别为35.5%、19.4%和6.5%。     

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌荚膜多糖主要血清型的鉴定

为了解内蒙古地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌荚膜多糖的主要血清型,试验从内蒙古地区9个牧场共采集236份奶牛乳房炎患牛的奶样,采用常规微生物方法、生物化学反应方法、动物试验和PCR方法对金黄色葡萄球菌荚膜多糖的血清型进行鉴定。结果表明:经常规微生物学检验分离得到162株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌(S.aureus)124株、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)29株、腐生葡萄球菌(S.saparophytics)9株。动物试验得到116株致病性S.aureus。PCR方法鉴定出荚膜多糖5型S.aureus23株,占致病性S.aureus的19.83%;荚膜多糖8型S.aureus61株,占致病性S.aureus的52.59%;荚膜多糖5型和8型S.aureus占致病性S.aureus的72.41%。说明5型和8型S.aureus是内蒙古地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌荚膜多糖的主要血清型。     

复方杨黄灌注液对奶牛子宫内膜炎的药效试验

采用常规方法对奶牛子宫内膜炎进行细菌学检查;以液体培养基对倍稀释法测定复方杨黄灌注液对奶牛子宫内膜炎主要病原菌的最低抑菌浓度(MIC),并以双黄连注射液作对照,观察复方杨黄灌注液对奶牛子宫内膜炎的临床疗效。结果:37例患子宫内膜炎奶牛子宫中共分离到49株细菌,其中链球菌、大肠埃希氏菌和葡萄球菌分别占30.61%、28.57%和24.49%,其他菌的比例较低。复方杨黄灌注液对奶牛子宫内膜炎的主要病原菌均有不同程度的抑制作用,与对照药物双黄连注射液作用相仿。复方杨黄灌注液对奶牛子宫内膜炎的治愈率为88.06%,疗效优于对照药物(P<0.05)。     

宁夏地区奶牛子宫内膜炎主要病原菌的分离鉴定及药敏试验

为调查宁夏6个规模化牛场奶牛子宫内膜炎主要致病菌的种类及其耐药情况,采集78头患子宫内膜炎奶牛的子宫分泌物,分离培养细菌,根据各分离菌株的生化反应和16SrDNA序列遗传进化分析结果,对致病菌分类鉴定,并对其进行抗生素耐药性分析。结果表明,大肠埃希菌检出率为55.56%,金黄色葡萄球菌检出率为35.90%,其他菌株检出率为8.54%,单一菌株感染患牛占42.31%,混合菌株感染占52.56%。大肠埃希菌和金色葡萄球菌对青霉素G、氨苄西林、四环素、复方新诺明、链霉素、卡拉霉素耐药性较强(50%~100%),对万古霉素、头孢西丁、头孢噻肟较为敏感(耐药率小于20%)。宁夏6个规模化牛场奶牛子宫内膜炎主要致病菌为大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌,且以混合感染为主。该类病原对青霉素类、四环素类、氨基糖甙类和磺胺类抗生素耐药性较强,对万古霉素、头孢类较敏感。     

全自动微生物分析系统和16S rDNA序列分析技术对奶牛乳腺炎病原菌的鉴定

从四川成都、绵阳和眉山地区部分奶牛场共分离奶牛乳腺炎病原菌120株,采用VITEK全自动微生物分析系统和16S rDNA序列分析技术对分离菌株进行鉴定。研究发现引起四川成都、绵阳和眉山奶牛乳腺炎以细菌混合感染为主,主要致病菌有葡萄球菌、大肠杆菌、单胞菌属、鲁氏不动杆菌、吉氏库特氏菌和芽孢杆菌属。其中,葡萄球菌的感染最为普遍,检出率最高(33株,27.50%);其次为大肠杆菌(17株,14.17%)、单胞菌属(12株,10%)、鲁氏不动杆菌(11株,9.17%)、吉氏库特氏菌(9株,7.50%)和芽孢杆菌属(9株,7.50%);再次为巨型球菌(6株,5%)、阴沟肠杆菌(6株,5.00%)、产吲哚金黄杆菌(6株,5.00%)和链球菌属(4株,3.33%);最低的是棒杆菌属(3株,2.50%)、粪肠球菌(2株,1.67%)、弗氏志贺菌(1株,0.83%)和普通变形杆菌(1株,0.83%)。本研究为防治奶牛乳腺炎奠定了基础。     

内蒙古局部地区奶牛不孕症的调查及子宫内膜炎性不孕症奶牛子宫内细菌分离鉴定

在调查奶牛不孕症的基础上，对临床确诊的子宫内膜炎性不孕症奶牛子宫内细菌进行分离鉴定。共普查了853头奶牛，不孕症奶牛占普查牛的11．8％，子宫内膜炎性不孕症奶牛占不孕症奶牛的66．3％，其他原因不孕症奶牛占不孕症奶牛的33．7％。被测奶牛子宫内容物均有细菌存在。从临床确诊的子宫内膜炎性不孕症奶牛的子宫内容物中，分离到细菌菌株119株，其中葡萄球菌36株，链球菌40株，大肠杆菌36株，变形杆菌4株，芽孢杆菌2株，化脓棒状杆菌1株。     

奶牛急性乳腺炎病原菌的分离与鉴定

为了查明乳腺炎的主要致病菌, 试验对来自不同奶牛场的25头患急性乳腺炎奶牛进行了病原菌的分离与鉴定。从阜新、锦州两地6个牛场共分离出26株目的菌, 16株为金黄色葡萄球菌, 10株为B群链球菌。葡萄球菌和链球菌检出率分别占病原菌检出数的61 54% ( 16 /26 ) 和38 46% (10 /26)。     

甘肃、贵州地区奶牛乳房炎病原菌分离鉴定及耐药性调查

为了弄清引起我国不同地区奶牛乳房炎病原菌的种类及分布情况,研究致病菌的耐药性特征,为该地区及我国奶牛乳房炎的综合防治提供理论依据,本研究对甘肃和贵州地区部分奶牛场采得的临床型或亚临床型乳房炎患牛奶样169份进行细菌分离鉴定和病原菌药敏试验。结果表明,引起两地区奶牛乳房炎的病原菌主要为葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌。在检出的189株病原菌中,金黄色葡萄球菌65株,占34.39%;表皮葡萄球菌62株,占32.8%;无乳链球菌4株,占2.12%;停乳链球菌32株,占16.93%;乳房链球菌13株,占6.88%;大肠杆菌13株,占6.88%。各种病原菌在两地区所占的比例具有差异性。各病原菌对药物的敏感性多有不同,但大多对左氟沙星、环丙沙星和先锋霉素V较为敏感,而对其他药物均有不同程度的耐药情况,特别是对复方新诺明、青霉素和万古霉素产生了强耐药性。     

云南省奶牛乳房炎致病菌分离鉴定及耐药性分析

为了解云南省奶牛乳房炎的主要病原菌及耐药情况,提供试验依据与理论参考,对云南省5个地区30个奶牛场60份奶样进行细菌分离鉴定和药敏试验。结果表明:引起云南省奶牛乳房炎的病原菌主要是金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、乳链球菌、化脓棒状杆菌和大肠杆菌。在检出的70株病原菌中,金黄色葡萄球菌21株,占30.0%;柠檬色葡萄球菌7株,占10.0%;乳链球菌15株,占21.4%;大肠杆菌27株,占38.6%。各病原菌均对大环内酯类抗生素敏感,可以尝试作为预防与治疗云南省奶牛乳房炎的首选药物,但对青霉素、氨基糖苷类、磺胺类、头孢类、喹诺酮类抗生素产生了不同程度的耐药性。     

我国部分地区奶牛乳房炎主要病原菌的分离鉴定及药敏试验

为了解我国奶牛乳房炎病原菌的流行情况及其耐药性,对生鲜乳主产省区内蒙古、黑龙江、山东、上海、河北5省(市、自治区)共247批次患乳房炎病牛乳样,进行病原菌的分离鉴定和耐药性试验。结果表明,从247份乳样中分离到细菌175株,大肠埃希菌65株,占37.14%;金黄色葡萄球菌30株,占17.14%;粪肠球菌21株,占12.00%;克雷伯菌18株,占10.29%;链球菌13株,占7.43%;柠檬酸杆菌12株,占6.86%;腐生葡萄球菌5株,占2.86%;变形杆菌4株,占2.29%;黏质沙雷菌3株,占1.71%;表皮葡萄球菌2株,占1.14%;产色葡萄球菌1株,占0.57%;乡间布丘菌1株,占0.57%。耐药性试验结果显示,所分离得到革兰阳性菌对氨曲南的耐药率最高,达到了100%,其次为青霉素(80.56%)、氧氟沙星(43.06%)、头孢西丁(43.06%)及美罗培南(41.67%)耐药率均高于40%;耐药率低于10%的为万古霉素(全部敏感)、苯唑西林(全部敏感)、利奈唑胺(全部敏感)、奥格门汀(全部敏感)、复方新诺明(2.78%)、环丙沙星(6.94%)及氨苄西林(9.72%)。所分离得到革兰阴性菌对氨苄西林的耐药性最高,达到了83.50%,其次为氟苯尼考44.66%和四环素43.69%,耐药率均高于40%;耐药率低于10%的有美罗培南(全部敏感)、头孢西丁(5.83%)和氨曲南(9.71%)。该结果为奶牛乳房炎的防控和临床用药提供了参考依据。