抑制素(IB)主动免疫对牛超排效果的影响及机制

用猪精液抑制素 ( inhibin,IB)抗原主动免疫供体母牛 ,结合外源纯化 FSH超排处理 ,观察了抑制素主动免疫对牛超排效果的影响 ,并通过检测不同生理时期血液中相关生殖激素的水平 ,探讨了抑制素免疫影响牛超排效果的机制。选产后 50 d以上的 3～ 5岁荷斯坦母牛 1 2头和西杂青年母牛 1 2头 ,按其发情顺序随机分为试验组和对照组 ,每组 1 2头。试验组用完全福氏佐剂乳化的 IB抗原进行首免 ,间隔 2 0 d再用不完全福氏佐剂乳化的 IB抗原加免 1次 ,加免后 6 d开始采用纯化 FSH做超排处理 ,观察发情 ,适时进行配种 ,于配种后 7d进行非手术法采卵。对照组只是用纯化 FSH做超排处理。参试牛于不同生理时期颈静脉采血 ,分离血清 ,用放免法测定各生理时期血清中 FSH、LH、E2 、P4水平。结果表明 :( 1 )抑制素主动免疫可以提高牛超排效果 ,试验组头均胚胎数和头均可用胚胎数分别比对照组增加 2 .4枚和 1 .4枚 ( P<0 .0 5) ;( 2 )抑制素主动免疫可提高母牛血浆中 FSH水平 ,从而促使卵泡发育 ,增加胚胎数和可用胚胎数 ;( 3)在首免后到加免前 ,抑制素主动免疫对 LH、E2 、P4基础分泌基本无影响     

O型口蹄疫疫苗免疫牛抗体消长动态的LPB-ELISA检测

分别按一次免疫、首免后第15d加强免疫和首免后第60d加强免疫程序，对3组试验牛（每组牛20头）用O型口蹄疫疫苗进行了免疫。免疫后不同时间点用液相阻断ELISA（LPB-ELISA）测定了免疫牛O型口蹄疫抗体效价。结果，首免后第15d加强免疫牛和第60d加强免疫牛抗体水平较高，50％保护牛所占比例分别为56．3％和63．1％，完全受保护的牛所占比例分别为34．3％和29．5％。第60d加强免疫牛的保护率要高于第15d加强免疫牛和一次免疫牛的保护率。结果表明，首免后第60d加强免疫是最理想的免疫程序。     

澳洲和牛超数排卵与体内胚胎生产的影响因素研究

旨在研究不同发育阶段（青年和经产牛）、同期方法、促卵泡素（follicle-stimulating hormone,FSH）剂量、超排次数等因素对澳洲和牛供体超数排卵（简称超排）和体内胚胎生产效率的影响。本试验共选用38头青年和牛（16~20月龄）和42头经产和牛（胎次=1）进行超排处理,分别统计每头供体牛回收的总胚胎数、可用胚胎数、不同等级胚胎数以及不可用胚胎数,然后分别根据不同发育阶段、同期方法、FSH剂量以及超排次数对各试验组的超排效率、胚胎生产等数据进行比较分析。结果表明：1）经产牛的超排有效率（（95.46±2.58）%）显著高于青年牛（（77.55±6.02）%）（P<0.05）,胚胎总数（12.30 vs 10.37枚）、可用胚胎数（8.97 vs 7.66枚）、A级胚胎数（3.86 vs 2.50枚）均高于青年牛,但组间差异不显著（P>0.05）;2）超排前不同同期处理方法（自然发情、PG和埋植CIDR）的超排有效率差异不显著,但是自然发情组供体牛头均可用胚胎总数（（11.22±2.33）枚）显著高于PG处理组（（6.09±1.05）枚）（P<0.05）;3）不同剂量FSH可显著影响供体的超排效率和头均不可用胚胎数,青年牛120 mg FSH组的超排有效率（（55.56±17.57）%）显著低于200 mg FSH （（88.00±6.63）%）和220 mg FSH组（（73.33±11.82）%）（P<0.05）,经产牛220 mg FSH组的头均不可用胚胎数（（2.28±0.65）枚）显著低于250 mg FSH组（（5.00±1.38）枚）（P<0.05）;4）超排次数显著影响青年牛超排有效率和经产牛头均不可用胚胎数,青年牛第一次超排有效率（（70.27±7.62）%）显著低于第二次超排有效率（100%）（P<0.05）,经产牛第二次超排回收的不可用胚胎数（（4.44±0.92）枚）显著高于第一次超排（（2.39±0.40）枚）（P<0.05）。因此,在华北地区现有的生产管理水平下,和牛超排供体宜选用经产母牛,超排处理FSH总剂量宜为240 mg,这对和牛体内胚胎高效生产和核心群的建立具有一定的参考价值。     

抑制素pCIS基因免疫对黄牛卵泡发育和生殖激素的影响

分别用O(C)、0.75(T1)、1.50(T2)、2.25(T3)和3.0(T4)nag·头'-1的抑制素pCIS基因疫苗免疫58头黄牛,以探讨抑制素pCIS基因免疫对卵泡发育和生殖激素的影响.结果表明,抑制素pCIS基因免疫组的大卵泡(d≥10 mm)数显著高于对照组(P<0.01),中卵泡(7 mm≤d<10 mm)数和小卵泡(4 mm≤d<7 mm)数与对照组均没有显著差异(P>0.05),T1组左右两侧成熟卵泡大小与对照组差异不显著(P>0.05),其它3组两侧成熟卵泡均显著大于对照组(P<0.05).抑制素pCIS基因免疫黄牛的促卵泡素(FSH)平均含量高于对照组,且在加强免疫阶段差异显著(P<0.05);加强免疫后雌二醇(E2)和孕酮(P4)含量均显著增加,且均与对照组差异显著(P<0.05).这些结果表明,抑制素pCIS基因免疫可促进FSH分泌,进而影响黄牛卵泡发育和成熟.     

透明质酸缓释剂对日本和牛超排的影响

本试验旨在研究透明质酸(HA)作为缓释剂对和牛超数排卵的影响。供体和牛随机分为2组,每组10头,对照组为常规超排组,试验组为缓释剂组。对照组供体1天2次,连续4 d,逐日递减注射促卵泡素(FSH);试验组供体间隔48 h分2次注射含有10.0 mg/m L HA缓释剂的FSH。FSH注射剂量均为160 mg。结果表明,对照组和试验组供体获得的平均可移植胚胎数(3.8 vs 3.6)、平均退化胚胎数(1.1 vs 1.5)、平均未受精卵数(0.5 vs)和超排后供体卵巢平均黄体数(9.2 vs 9.9)均差异不显著(P0.05);在超排处理不同时间内(D0、D5、D7、D9和D16)对照组和试验组供体血清FSH浓度均差异不显著(P0.05)表明缓释剂组获得了与常规超排相一致的结果。说明HA作为缓释剂能够延长FSH在体内作用时间,减少了FSH注射次数。     

抑制素基因免疫对南阳黄牛生殖激素的影响

选择40头南阳黄牛，用3．0毫克抑制素基因重组质粒（PCIS，免疫组，n=30）或同剂量的生理盐水（对照组，n=10）间隔21天注射2次，分别在首次免疫当天、首次免疫后第10天和第21天、加强免疫后第10天和第45天收集血清，应用放射免疫法（RIA）测定处理后不同时期血清中激素水平。结果表明：在5个采血时间点内．加强免疫后第10天抗体阳性牛比率最高．为37．5％，与其他采血时间点有显著差异。免疫组促卵泡素（FSH）平均含量比对照组高，但差异不显著；17-β雌二醇（E2）和孕酮（P4）水平在加强免疫后2组有显著性差异。     

N-氨甲酰谷氨酸对奶牛超排效果及血液指标的影响

本研究旨在探讨饲喂N-氨甲酰谷氨酸（NCG）对奶牛超数排卵效果及血液生化指标的影响。选取荷斯坦育成牛16头，随机分为2组，每组8头，对照组饲喂基础饲粮，试验组在基础饲粮的基础上饲喂20 g/（d·头）的NCG，采用连续4 d递减注射FSH法测定NCG饲喂时间对供体牛超排效果的影响，分别在3次超排处理的第0、5、9天采集尾根静脉血测定激素指标及血清生化指标。结果表明，①NCG饲喂20 d时（第1次超排），试验组头均回收胚数、可用胚数、退化胚数、未受精卵数与对照组相比差异均不显著（P>0.05）；NCG饲喂50 d时（第2次超排），试验组头均回收胚数显著高于对照组（P<0.05）；NCG饲喂80 d时（第3次超排），试验组头均可用胚数显著高于对照组（P<0.05）；综合考虑3次超排效果，试验组头均回收胚数显著高于对照组（P<0.05）。②NCG饲喂时间对供体牛血清中促卵泡素、促黄体素、孕酮、雌二醇的浓度均无显著影响（P>0.05），说明NCG饲喂时间对奶牛生殖激素的分泌无影响或为次要影响因素，超排效果的变化与生殖激素变化无明显的关联作用。③NCG饲喂时间对供体牛血清中谷草转氨酶的浓度无显著影响（P>0.05）；在NCG饲喂13 d时，试验组供体牛血清中葡萄糖浓度显著高于对照组（P<0.05）；在NCG饲喂34 d时，试验组供体牛血清中尿素氮浓度显著低于对照组（P<0.05）；在NCG饲喂43和69 d时，试验组供体牛血清中一氧化氮浓度显著高于对照组（P<0.05）。综合考虑，在重复3次超排时，每头供体牛每天饲喂20 g NCG，可提高3次连续超排的回收胚数4.98枚及可用胚数1.8枚，进而降低胚胎的生产成本。     

促卵泡素超排效果比较试验

用宁波产促卵泡素(FSH)超排处理供体牛19头,共冲出156枚卵,每头平均8.21枚,其中可用胚胎为140枚,每头平均7.36枚,达到国内平均水平;用北京产FSH超排处理供体牛15头,共冲出98枚卵,每头平均6.53枚,其中可用胚胎为72枚,每头平均4.48枚.试验证明2个不同产地FSH的超排效果有显著差异.     

促性腺激素抑制激素基因疫苗pVAX-RFRP和抑制素基因疫苗pXAIS对水牛卵泡发育的影响

40头奶水牛分4组,每组10头。Ⅰ组:p VAX-RFRP质粒肌注+p XAIS质粒肌注+p XAIS活菌苗喷鼻;Ⅱ组:p XAIS质粒肌注+p XAIS活菌苗喷鼻;Ⅲ组:p VAX-RFRP质粒肌注;Ⅳ组:PBS肌注对照。研究抑制素基因疫苗(p XAIS)和促性腺激素抑制激素基因疫苗(p VAX-RFRP)对水牛发情和卵泡发育的影响。结果表明:Ⅰ组和Ⅲ组水牛很快发情,与Ⅳ组(PBS对照)差异显著(P0.05),Ⅱ组与Ⅳ组(PBS对照)差异不显著,3个试验组之间差异不显著。3个试验组总卵泡数都比对照组多(P0.05),Ⅱ组大卵泡数较多,与Ⅳ组(PBS对照)差异显著(P0.05),各试验组间大卵泡数不存在显著差异。结果表明,两种疫苗都显著促进水牛发情,并有利于大卵泡发育。     

郏县红牛同期发情及超数排卵的研究

[目的]探讨生产中郏县红牛同期发情及超数排卵的方法。[方法]筛选75头郏县红牛分组分批进行同期发情及超数排卵。[结果]显示,CIDR+PG法处理组母牛同期发情率(100%)显著高于PG二次法处理组(76%)(P0.05);用加拿大促卵泡素(FSH)超排时头均获胚数6.33枚,用中科院动物所促卵泡素(FSH)超排时头均获胚数为6.00枚,二者差异不显著(P0.05)。[结论]分析结果可知,CIDR+PG法处理比PG二次法对郏县红牛的同期发情效果好;进口促卵泡素(FSH)与国产促卵泡素(FSH)对郏县红牛的超排效果无显著差异。     

超排前有腔卵泡数对青年和牛体内胚胎生产效率的影响

为提高和牛体内胚胎生产效率,优化供体牛筛选标准,本实验选取68头青年黑毛和牛为供体,超排处理前使用B超检查两侧卵巢上直径为3～5 mm的有腔卵泡数,以卵泡总数10和20为临界值将其分为3组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组有腔卵泡数分别为<10、10～19、≥20个,以CIDR+FSH+PG法进行超排处理后人工授精,比较不同组间胚胎生产效率。结果表明:Ⅲ组黄体数(15.44)、回收胚胎数(13.13)及可用胚胎数(9.56)均显著高于其他2组(P<0.05),Ⅱ组黄体数、回收胚胎数及可用胚胎数显著高于Ⅰ组(P<0.05),即随着供体牛超排前有腔卵泡数增多,回收胚胎数及可用胚胎数随之增多;Ⅲ组胚胎可用率显著低于Ⅰ组,退化率显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05)。综上,有腔卵泡数对和牛胚胎生产效率有影响,可以作为供体牛筛选标准之一。     

抑制素基因免疫对京白鸡产蛋性能的影响

120只380 d京白鸡随机分为4组,分别腿部肌肉注射0、50、100、150 μg抑制素真核表达质粒pcISI,20 d后加强免疫1次.ELISA检测抗抑制素抗体水平,观察产蛋量,并进行鸡蛋品质测定.免疫4个月后全部捕杀,统计各级卵泡数.结果表明,抑制素基因加强免疫后抗体水平显著升高(P<0.05),3个剂量组间差异不显著(P>0.05).试验组全期产蛋量极显著高于对照组(P<0.01),大白泡和小白泡比对照组显著增多(P<0.05),优势卵泡、小黄泡和鸡蛋品质与对照组差异不显著(P>0.05).表明抑制素基因免疫京白鸡可产生抗抑制素抗体,并能提高京白鸡的产蛋性能.     

mC3d3-DINHα(1～32)基因免疫对大鼠卵泡发育和生殖激素的影响

选择32只60日龄雌性性成熟大鼠分为4组,分别肌肉注射pcDNA-DPPISS-DINH(试验组1) 50 μg,pcDNA-DPPISS-DINH-mC3d3 (试验组2) 50 μg,空载体pcDNA3.1 (对照组1) 50 μg,生理盐水(对照组2)1 mL.首次免疫20、40 d后各组分别同剂量同样免疫程序加强免疫注射1次.结果发现,试验1和2组卵巢的重量都显著高于对照组1和2,但试验1和2组之间的差异不显著(P＞0.05);试验2组卵巢成熟卵泡发育个数和FSH的浓度显著高于试验1组和对照1和2组(P＜0.05);加强免疫第40天,试验1、2组的E2的浓度分别显著高于本试验组免疫前第0天,免疫后第20天的激素浓度;试验组与对照组在各个免疫试验时间LH的浓度在统计上差异不显著(P＞0.05).结果证明,应用重组抑制素真核表达质粒pcDNA-DPPISS-DINH-mC3d3(试验组2)免疫动物可以促进大鼠卵泡的发育,可提高血浆FSH、E2水平,为抑制素基因免疫大动物提供了试验依据.     

超排技术在无角陶赛特羊胚胎移植生产中的应用研究

在胚胎移植生产中,用从新西兰引进的肉用绵羊品种无角陶赛特羊作供体进行规模化胚胎移植生产.超排结果表明:两次超排分别回收平均卵数为5.62枚和9.08枚;从不同年龄的无角陶赛特羊上获得总卵数差异不显著;配种后第7天冲取胚胎,以桑椹胚为最多,占总回收胚胎数的75.78%,配种后第8天回收的胚胎,以扩展囊胚和孵出囊胚数所占比例为最多,分别占总数的25.89%和31.75%;从两侧卵巢所观察到的黄体数和所回收的胚胎数差异不显著;用人工授精法比试验中的其它方法能显著提高所获得的有效胚胎数;用促卵泡素恒量注射、孕马血清两次注射法进行超排效果好,所获得的平均胚胎数为8.53枚,有效胚占回收总胚的百分率则增加到82.11%.     

西门塔尔牛超数排卵研究

分别用国产的促卵泡素(FSH-P)、加拿大生产的促卵泡素(Folltropin-v)和PMSG对西门塔尔牛进行超排处理。结果表明:用Folltropin-v超排处理所获得的可用胚数(8.71±2.62)枚多于其他2组,且差异显著(P<0.05)。对Folltropin-v注射次数的比较研究结果表明,每天注射2次Folltropin-v(总剂量400mg)和每天注射1次(总剂量350mg和300mg)可以获得同样的超排效果。     

不同FSH对和牛超数排卵效果的影响

[目的]以16~18月龄青年日本和牛为供体,研究不同FSH和剂量对青年日本和牛超排效果的影响。[方法]超排采用CIDR+FSH+PG方法进行。[结果]进口FSH和国产FSH超排和牛后头均获胚胎数、头均获可用胚胎数、头均退化胚胎数和头均未受精卵数差异均不显著(P0.05);3种不同剂量的国产FSH处理日本和牛,头均获胚胎数、头均获可用胚胎数、头均退化胚胎数和头均未受精卵数差异均不显著(P0.05)。[结论]进口FSH和国产FSH超排青年和牛效果相当,同时适当降低国产FSH注射总剂量不影响青年和牛供体超排效果。     

娟姗牛与荷斯坦青年母牛超排效果比较

本试验对56头娟姗牛与179头荷斯坦青年母牛进行超排处理,分别获得可用胚胎227枚和1242枚;可用胚率分别为57.80%和70.65%,娟姗牛和荷斯坦牛超排黄体数无明显差异(P>0.05),但采胚数明显低于荷斯坦牛,娟姗牛的超排结果明显低于荷斯坦牛的结果(P<0.05),移植受体牛270头,怀孕157头。移植妊娠率分别达到52.54%和50.20%,同期娟姗牛胚胎与荷斯坦牛胚胎移植结果比较,无显著差异(P>0.05)。娟姗牛超排使用FSH剂量为9mg更为经济。青年荷斯坦牛和娟姗牛可用于胚胎生产,但青年娟姗牛的可用胚胎数低于荷斯坦牛。     

纯种和牛育成牛重复超排FSH制剂及最佳剂量筛选

为了解决国产促卵泡素(FSH)在纯种和牛育成牛重复超排过程中效果不稳定的问题,以进口FSH(FOLLTROPIN-V)和国产FSH进行对比试验,并将FOLLTROPIN-V设计成3个注射剂量梯度:400、260和200 mg组,以筛选出最佳剂量。试验结果表明:与国产FSH相比,进口FSH组的头均可用胚胎数有增多的趋势,头均未受精卵细胞数量有降低的趋势;FOLLTROPIN-V以200 mg组的头均可用胚胎数和头均总数最多,显著(P<0.05)高于260 mg组,也高于400 mg组。由该试验可以得出,纯种和牛育成牛重复超排FSH最佳制剂及超排剂量是:使用FOLLTROPIN-V 200 mg/(头·次),头均可用胚胎数达到6.5枚以上,能够达到高效超排和降低成本的双重目的。     

娟姗牛与荷斯坦牛超排效果比较

本试验对56头青年娟姗牛和179头荷斯坦青年牛进行超排处理,平均获得可用胚胎数4.05±4.20枚/头次和7.06±3.72枚/头次;可用胚率分别为57.80%和70.65%,娟姗牛和荷斯坦牛超排黄体数无明显差异(P>0.05),但采胚数娟姗牛明显低于荷斯坦牛。共移植受体牛310头,怀孕157头(50.65%)。娟姗牛胚胎与荷斯坦牛胚胎的移植妊娠率分别为52.54%(31/59)和50.20%(126/251),无明显差异(P>0.05)。结果表明,青年荷斯坦牛和青年娟姗牛可用于胚胎生产,但娟姗牛的可用胚胎数低于荷斯坦牛。     

优势卵泡对供体牛超排效果的影响

利用超声波活体采卵仪,去除具有优势卵泡的荷斯坦母牛卵巢上的优势卵泡,诱发新的卵泡波进行超排处理,并进行了:(1)与发情后9d处在黄体期的母牛进行的超排效果比较;(2)与利用CIDR、孕酮、雌二醇诱发新的卵泡波进行的超排效果比较;与具有优势卵泡但没有去除而进行的超排效果进行比较,从而探讨优势卵泡对奶牛超排效果的影响。结果表明,去除优势卵泡组与CIDR组以及自然发情组的超排结果,3组间头均获卵、受精卵数、可用胚胎数差异均不显著(p>0.05)。带有优势卵泡组超排结果与其他三组相比,头均获卵、受精卵数、可用胚胎数差异极显著(p<0.01),可见超排处理时优势卵泡的存在对超排效果的影响极大。