间接共培养下柔嫩艾美耳球虫对MDBK细胞凋亡抑制的研究

为研究鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenlla)在间接共培养条件下对于宿主细胞凋亡的抑制作用,采用显微镜、分光光度法研究柔嫩艾美耳球虫与马-达氏牛肾细胞(MDBK细胞)间接共培养时对其凋亡的影响。将柔嫩艾美耳球虫纯化的裂殖子与MDBK细胞通过Transwell小室间接共培养;分别在共培养3,6,9,12 h时测量细胞培养体系中的凋亡因子Caspase2,Caspase3,Caspase6,Caspase8,Caspase9的活性。结果表明,测定的共培养组的5种凋亡因子的水平均低于对照组,说明在间接共培养开始到12 h时,MDBK细胞的凋亡受到了抑制,可以推断球虫裂殖子可能会分泌抑制凋亡的物质作用于宿主细胞,而究竟是何种物质或作用机制使得宿主细胞凋亡受到抑制仍有待进一步的研究。     

柔嫩艾美耳球虫感染对鸡血清凋亡蛋白的影响

为了研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染对鸡血清细胞凋亡相关蛋白的影响,探讨柔嫩艾美耳球虫与宿主相互作用,将240只体重接近的7日龄海兰灰公雏鸡分为4组:A组为不感染不诱导凋亡组;B组为不感染诱导凋亡组;C组为感染不诱导凋亡组;D组为感染诱导凋亡组。诱导凋亡的处理方法是采血前2.5 h按6.4 mL/kg体重灌服40%酒精诱导凋亡,不诱导凋亡的处理则同时灌服与40%酒精等体积的生理盐水替代。于柔嫩艾美耳球虫感染(每只鸡感染1×10~5个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊)后第24、48、72、96、120 h,每组抽取10只鸡心脏采血,制备血清,采用ELISA法检测血清中细胞色素C(Cyto-C)、半胱氨酸蛋白酶(Cas)-9、Cas-8、Cas-3、B细胞淋巴瘤/白血病(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-XL、BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)的浓度。结果显示,感染后24、48、72、96 h D组Cyto-C、Cas-9、Cas-8、Cas-3的浓度均低于B组,感染120 h D组Cyto-C、Cas-9、Cas-8、Cas-3的浓度均显著高于B组(P0.05),感染24、48、72、96 h D组Bcl-2/Bax和Bcl-XL/Bid值均高于B组,感染120 h D组的Bcl-2/Bax低于B组,Bcl-XL/Bid值高于B组。说明柔嫩艾美耳球虫感染早期通过Bcl-2/Bax值、Cyto-C、Cas-9、Cas-8、Cas-3浓度的增加来抑制宿主细胞凋亡,感染中晚期通过Bcl-2/Bax值、Cyto-C、Cas-9、Cas-8、Cas-3浓度的降低促进宿主细胞凋亡。     

柔嫩艾美耳球虫感染对鸡血清凋亡蛋白的影响

为了研究柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）感染对鸡血清细胞凋亡相关蛋白的影响，探讨柔嫩艾美耳球虫与宿主相互作用，将240只体重接近的7日龄海兰灰公雏鸡分为4组：A组为不感染不诱导凋亡组；B组为不感染诱导凋亡组；C组为感染不诱导凋亡组；D组为感染诱导凋亡组。诱导凋亡的处理方法是采血前2.5 h按6.4 mL/kg体重灌服40%酒精诱导凋亡，不诱导凋亡的处理则同时灌服与40%酒精等体积的生理盐水替代。于柔嫩艾美耳球虫感染（每只鸡感染1×10⁵个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊）后第24、48、72、96、120 h，每组抽取10只鸡心脏采血，制备血清，采用ELISA法检测血清中细胞色素C（Cyto-C）、半胱氨酸蛋白酶（Cas）-9、Cas-8、Cas-3、B细胞淋巴瘤/白血病（Bcl）-2、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Bcl-XL、BH3结构域凋亡诱导蛋白（Bid）的浓度。结果显示，感染后24、48、72、96 h D组Cyto-C、Cas-9、Cas-8、Cas-3的浓度均低于B组，感染120 h D组Cyto-C、Cas-9、Cas-8、Cas-3的浓度均显著高于B组（P<0.05），感染24、48、72、96 h D组Bcl-2/Bax和Bcl-XL/Bid值均高于B组，感染120 h D组的Bcl-2/Bax低于B组，Bcl-XL/Bid值高于B组。说明柔嫩艾美耳球虫感染早期通过Bcl-2/Bax值、Cyto-C、Cas-9、Cas-8、Cas-3浓度的增加来抑制宿主细胞凋亡，感染中晚期通过Bcl-2/Bax值、Cyto-C、Cas-9、Cas-8、Cas-3浓度的降低促进宿主细胞凋亡。     

柔嫩艾美尔球虫在易感和非易感鸡的原代肾细胞培养中发…

易感和非易感来航鸡对柔嫩艾美尔球虫（下简称球虫）感染的抵抗力相差６倍，本研究在确定能否用宿主肾细胞来测定不同品种鸡球虫的抵抗力，球虫在宿主细胞培养中可避免体流和细胞免疫的影响，从而可以在细胞水平上研究宿上遗传因素对球虫发育的影响，接种后４８和９６小时，检查两种细胞系培养对球虫发育的影响，以及宿主细胞开始感染到出现裂殖生殖所需时间，通过液态闪烁计数测定其差别，结果证明，球虫在两个发育阶段在易感鸡宿主     

鸡球虫对机体的致病作用研究进展

球虫在鸡体内进行生命活动的同时对鸡体产生不同程度的损害,球虫感染后的致病性和病理学反应是球虫与宿主机体相互作用的结果.本文就鸡球虫致病作用及其对宿主细胞代谢的影响、及影响球虫致病性的因素的研究进展予以综述,对鸡球虫病的防治具有一定的指导意义.     

鸡球虫对机体的致病作用研究进展

球虫在鸡体内进行生命活动的同时对鸡体产生不同程度的损害，球虫感染后的致病性和病理学反应是球虫与宿主机体相互作用的结果。本文就鸡球虫致病作用及其对宿主细胞代谢的影响、及影响球虫致病性的因素的研究进展予以综述，对鸡球虫病的防治具有一定的指导意义。     

猪球虫病和隐孢子虫病的诊断及防控

正1猪球虫病球虫病是由在宿主细胞(主要是肠道细胞)内生活、繁殖的被称为球虫的小寄生虫引起的疾病。感染猪的球虫有3种类型:艾美耳球虫、等孢球虫和隐孢子虫。该病主要是由猪等孢球虫导致的,常见于哺乳期仔猪且分布广泛,偶见于大到15周龄的猪。母猪和大龄猪通常是艾美耳球虫而非等孢子球虫的宿主。1.1生活史被感染的微卵状结构称为卵囊,排入粪便中,随粪便进入环境中进一步发育为孢子。温度在25～35℃时,     

商品蛋鸡泌尿道隐孢子虫病

隐孢子虫是一类球虫性寄生虫,可感染许多宿主,包括哺乳动物、鸟、爬行动物和鱼.这类寄生虫属隐孢子虫属,艾美尔亚目.它们与其它球虫不同在于它们是在上皮细胞的微绒毛的边缘寄生增殖.在光镜下可见虫体常在宿主细胞的细胞膜表面.     

球虫和其他原虫

正1球虫目(猪等孢球虫和艾美尔属球虫)球虫(Coccidia)是专性细胞内寄生的寄生性原虫,其中艾美尔球虫属(Eimeria)、等孢球虫属(Isospora)、隐孢子虫属(Cryptosporidium)、弓形体属(Toxoplasma)和住肉孢子属(Sarcocystis)是哺乳动物和鸟类的重要寄生原虫。家畜可感染多种球虫,但是通常仅有几种球虫对某一特定宿主是致病性的。目前,可以有效感染猪的肠道球虫种数尚不得而知,因为仅了解大多数球虫的孢子化卵囊阶段。Levine     

柔嫩艾美耳球虫侵入相关抗原研究进展

鸡球虫作为胞内寄生原虫给禽类养殖业的发展带来严重危害。论文详细介绍了柔嫩艾美耳球虫微线蛋白、棒状体蛋白、表面抗原、折光体蛋白及热休克蛋白等侵入相关抗原,并对其侵入宿主细胞的相关机制进行了阐述。同时,概述了宿主感染虫体后所发生的细胞及体液免疫应答,并对未来鸡球虫病的相关研究做了展望。     

Eimeria tenlla和E. acervulina对凋亡诱导抑制的研究

为了研究鸡艾美耳属球虫不同种在入侵细胞早期对凋亡诱导抑制的差异,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenlla)和堆型艾美耳球虫(E.acervulina)纯化的裂殖子入侵马-达氏牛肾细胞(MDBK细胞)1.5 h后,对被入侵的细胞计数并计算入侵率;加入含6%乙醇的完全培养基对细胞诱导凋亡3 h,检测细胞凋亡率。结果表明,E.tenlla裂殖子和E.acervulina裂殖子入侵率为21%和43%;凋亡诱导组的凋亡率是36.98%;柔嫩艾美耳球虫凋亡诱导组的凋亡率是25.77%;堆型艾美耳球虫凋亡诱导组的凋亡率是28.92%。柔嫩艾美耳球虫凋亡诱导组与凋亡诱导组之间差异极显著(P<0.01);堆型艾美耳球虫凋亡诱导组与凋亡诱导组之间差异极显著(P<0.01)。柔嫩艾美耳球虫凋亡诱导组与堆型艾美耳球虫凋亡诱导组之间差异显著(P<0.05)。结果提示,E.acervulina裂殖子入侵细胞并起到明显的抑制细胞凋亡作用,在入侵早期也许有类似于E.tenlla裂殖子抑制凋亡的机制;与E.tenlla裂殖子的抑制率相比略低,这可能与它的个体大小、致病能力有关。     

寄生性原虫影响宿主上皮细胞凋亡研究进展

凋亡是宿主与寄生虫长期进化过程中形成的调节机制之一，对寄生虫感染引起宿主先天免疫反应具有重要的调控作用。隐孢子虫、十二指肠贾第虫和芽囊原虫等寄生性原虫感染可诱导宿主胃肠道上皮细胞发生凋亡。NF-κB信号通路和非编码RNA等参与调控隐孢子虫感染诱导的宿主上皮细胞凋亡，已报道的凋亡途径包括Fas/FasL和TRAI/TRAIL途径；十二指肠贾第虫感染通过内、外两种凋亡途径调控宿主上皮细胞的凋亡，TNFR1信号通路参与细胞凋亡的调控；芽囊原虫和十二指肠贾第虫感染在诱导宿主上皮细胞凋亡水平上存在虫株间的差异。因此，探索隐孢子虫、十二指肠贾第虫和芽囊原虫诱导宿主上皮细胞凋亡机制，对研究寄生性原虫入侵机制及开发设计抗寄生性原虫药物和疫苗具有重要意义。     

鸡球虫病现状及其综合防治措施探讨

球虫病是一种全球性分布的寄生虫病,由一种或几种球虫寄生于肠黏膜上皮细胞而引起的一种急性流行性原虫病。球虫对宿主和寄生部位有严格的选择性,即各种家畜、家禽各有其专性寄生的球虫,互不感染,而且各种球虫只能在宿主的一定部位发育。感染鸡的球虫中,致病较强的球虫是寄生于盲肠的柔嫩艾美耳球虫和寄生于小肠的毒害艾美耳球虫。     

鸡球虫体外培养模型及应用研究进展

鸡球虫病是由艾美耳球虫寄生于鸡肠上皮细胞内所引起的一种寄生性原虫病，感染鸡体重减轻、营养不良、肠道损伤等，严重危害养鸡业的健康发展。球虫的生命周期包括从无性阶段到有性阶段的转换并局限于一个宿主。目前对球虫的研究主要包括在细胞生物学及其不同生命阶段的蛋白质表达和运输机制、宿主细胞入侵和宿主-寄生虫相互作用、新型药物靶标筛选等方面。鉴于研究问题的多样性，以及减少和取代动物试验的要求，建立高效的体外培养模型成为研究鸡球虫生物学特性、抗球虫疫苗和药物的基本条件。笔者重点阐述了鸡球虫体外培养模型及其在药物抗虫效果研究中的应用，包括鸡胚培养模型、二维培养模型(原代细胞培养模型、传代细胞系培养模型)及三维类器官培养模型。越来越多培养技术的突破为研究球虫生命周期阶段和干预策略开辟了新的途径，也为深入了解鸡球虫致病机制、抗球虫药物研发提供依据。     

细胞凋亡与病毒的抗细胞凋亡

病毒的侵入可引起机体宿主细胞的凋亡，细胞凋亡有利于机体清除感染的细胞，保护自身免受病毒的侵害，是机体对病毒侵入的防御机制之一。一些病毒具有许多抗细胞凋亡和抗CTL活性的机制，如编码免疫调节分子和凋亡调节分子，降低细胞凋亡基因的表达以延长感染细胞的存活期，以利于病毒的增殖。现对细胞凋亡及病毒抗细胞凋亡的机制进一综述。     

柔嫩艾美耳球虫裂殖子对侵入细胞凋亡抑制通路的研究

为了研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenlla)裂殖子入侵宿主细胞后对凋亡诱导的抑制通路,将纯化的裂殖子与牛肾传代细胞(MDBK细胞)共培养1.5 h。用含6%乙醇的完全培养基诱导细胞凋亡2.5 h,通过流式细胞术检测细胞凋亡率。采用标准试剂盒测定Cyto C,Caspase8,Caspase9,Caspase3的活性。流式细胞术结果显示,入侵裂殖子的细胞在诱导凋亡后其凋亡率为4.57%,而未感染的细胞其凋亡率达到23.69%,二者差异显著(P0.05),诱导凋亡的MDBK细胞早期凋亡率为19.50%,晚期凋亡率为4.19%,而感染裂殖子后诱导凋亡的MDBK细胞其早期凋亡率为3.53%,晚期凋亡率为1.04%,差异显著(P0.05)。结果表明,裂殖子的入侵不但可以抑制细胞凋亡,还可以延缓细胞进入早期凋亡的时间。试剂盒结果表明,裂殖子使Cyto C,Caspase8,Caspase9的活性下降,而Caspase3没有变化。根据上述结果初步判断,E tenlla裂殖子抑制MDBK细胞的凋亡是通过线粒体通路。     

鸡球虫入侵相关分子的研究进展

鸡球虫病是由艾美耳球虫寄生于肠道所引起的一种危害极其严重的寄生虫病,给养鸡业造成巨大的经济损失.艾美耳球虫属于顶复器门原虫,在入侵宿主细胞过程中需要通过入侵虫体顶端的顶复器分泌蛋白发挥作用.目前已报道与鸡球虫入侵相关的重要蛋白,包括微线蛋白、蛋白激酶、热激蛋白以及糖酵解酶等.这些蛋白主要参与了鸡球虫入侵宿主细胞以及在宿主细胞内的生长发育、参与了虫体的细胞周期活动以及参与了糖酵解提供虫体入侵需要的能量等,进一步对这些分子进行研究,对了解鸡球虫入侵宿主细胞的相关机理及发展抗球虫病疫苗和治疗药物将有积极的意义.     

动物球虫病的诊治

正球虫的功能性单位是孢子,一种能动的呈香蕉形或雪茄形的细胞,顶端尖后端圆。球虫靠孢子在宿主体内移动并侵入上皮细胞内,并且子孢子代表着球虫每个生活史的起点和终点。与生活史中特殊阶段的关系由前缀来表示。子孢子是在孢子化卵囊中出现的感染形态。大小配子体融合后形成卵囊,卵囊减数分裂形成子孢子。子孢子侵入宿主细胞后通过一种复分裂即裂殖生殖形成许多裂殖子,速殖子分裂快,慢殖子分裂慢,如此等等。     

兔球虫病的流行与防治

<正>球虫病通常是由艾美耳科球虫所引起,包括艾美耳属、等孢属、泰泽属和温扬属等。球虫为细胞内寄生虫,对宿主和寄生部位有严格的选择性,即各种畜禽都有其特异的虫体种类寄生,彼此互不感染,而且各种球虫只在宿主的一定部位寄生。球虫是否引起发病,取决于球虫的种类、感染强度、宿主年龄及抵抗力、饲养管理条件及其他外界环境因素。家畜中以鸡、鸭、兔球虫病危害严重,常导致大批死亡。兔艾美耳球虫文献记载共有13种,其中除斯氏艾美耳球虫寄生在胆管上皮细胞外,其余各     

球虫感染对宿主血细胞压积和血红蛋白含量的影响

球虫感染对宿主血细胞压积和血红蛋白含量的影响李玉焕导师吴兆敏（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所）球虫感染可引起宿主一系列生理生化变化。近来国外科学工作者研究表明，堆型、柔嫩和毒害艾美耳球虫等均能不同程度地导致感染鸡血液中一些敏感指标的变化［１，２，３...