鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(耐热保护剂)活疫苗的研究

通过对不同保护剂基质与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT)相溶性的研究及冻干曲线的优化,成功研制出一种适宜HVT的耐热冻干保护剂。用其与相匹配的48h自然回温冻干曲线冻干的HVT耐热活疫苗,其病毒冻干损失比SPGA常规疫苗减少约50%,在2~8℃条件下可保存24个月,37℃保存10d病毒存活率达50.5%,而SPGA规程苗仅为31.6%。经约50万羽份的田间试验,证明安全有效并显示出良好的耐热性能,达到国外同类产品水平。     

不同保存方式对猪伪狂犬活疫苗病毒含量的影响

为了探究猪伪狂犬(Bartha-K61株)病活疫苗及专用稀释液的最佳保存温度及保存时间,试验取40瓶山东某生物公司生产的猪伪狂犬(Bartha-K61株)病活疫苗(批号为20190801,-20℃保存)进行试验,其中20瓶用专用稀释液稀释,20瓶不稀释,分别在4℃、37℃存放,并分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时测病毒含量;取不同温度(4℃、23℃、38℃)保存的稀释液对-20℃保存的疫苗进行稀释,每个温度稀释2瓶,当稀释后的疫苗温度为37℃时测定病毒含量。同时从-20℃保存的疫苗中取出2瓶作为对照,测定病毒含量。结果表明:疫苗在稀释前低温冷冻保存最好,如果4℃存放,不要超过8 h;稀释后的疫苗要及时使用,若不能及时使用,可于4℃保存,保存时间不超过8 h。室温保存尤其是天气炎热的夏季保存时间不要超过6 h。猪伪狂犬病活疫苗专用稀释液的保存温度以23℃为最佳。     

黄芪多糖注射液对猪瘟耐热保护剂活疫苗在兔体内免疫效果的影响

试验旨在研究黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)注射液作为猪瘟疫苗稀释液及黄芪多糖作为疫苗佐剂提供数据支持。用1%的黄芪多糖注射液、猪瘟疫苗专用稀释液、生理盐水3种不同猪瘟疫苗稀释液稀释兔源猪耐热保护剂活疫苗免疫兔体,比较免疫后不同时间段内血液中的淋巴细胞的活性及血清中的猪瘟抗体、白介素2(interleukin 2,IL-2)、白介素6(interleukin 6,IL-6)、γ干扰素(interferon γ,IFN-γ)、新蝶呤(neopterin,Npt)水平,综合评价3种不同猪瘟疫苗稀释液对兔源猪瘟耐热保护剂活疫苗在兔体内免疫效果的影响。结果表明,黄芪多糖能不同程度的提高抗体水平和多种细胞因子的含量。因此,黄芪多糖注射液可以作为猪瘟疫苗稀释液或改良现有猪瘟疫苗稀释液,黄芪多糖也可以作为猪瘟疫苗佐剂。     

不同稀释液对鸡马立克氏病活疫苗蚀斑数的影响试验

选用几种不同稀释液稀释疫苗后放置不同时间进行蚀斑计数,统计病毒存活率,确定一种有效的马立克疫苗稀释液。     

病毒保护剂在鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗生产中的应用

2种不同的病毒保护剂A和B,应用于鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗生产中,3批试验结果表明:裂解后SPGA4万倍稀释,保护剂B的蚀斑数比对照平均增加121%,保护剂A最低使减少14%。保护剂B的最佳添加浓度筛选试验结果表明:1次添加浓度为1%或2%,2次添加浓度为2%。3批病毒保护剂B扩大中试试验结果表明:裂解后SPGA4万倍稀释,试验组比对照组蚀斑数平均增加66.5%。HVT活疫苗(病毒保护剂B)特异性试验结果表明,马立克氏病标准阳性血清对其特异性识别;平行冻干后,试验组比对照组蚀斑数高200%;经37℃10d耐热试验表明,试验组比对照组蚀斑数高242%;试验苗免疫攻毒保护率为75%,对照苗为33.4%。     

黄芪多糖对新城疫活疫苗免疫效果的影响

分别用0.25%、0.5%及1%的黄芪多糖、新城疫疫苗专用稀释液稀释新城疫Ⅳ系耐热保护剂活疫苗免疫鸡,比较免疫后不同时间段内血液中的淋巴细胞的活性以及血清中的新城疫抗体、IL-2水平,评价黄芪多糖对新城疫耐热保护剂活疫苗免疫效果的影响,为临床应用提供理论依据。结果表明,黄芪多糖作为疫苗稀释液可以提高新城疫疫苗的免疫效果,综合评价0.5%黄芪多糖效果最佳。     

新城疫活疫苗(lasota株)溶解在不同温度水中病毒含量变化情况

通过试验检测鸡场常用的高端和低端两种新城疫(lasota株)活疫苗初始病毒含量(EID50/羽份),并模拟饮水免疫,将两种疫苗稀释后分别放在10℃、20℃和30℃温度中水浴中1 h、2 h和3 h,检测在不同温度、不同水浴时间下疫苗病毒含量(EID50/羽份)的变化,为生产中饮水免疫提供理论依据。结果表明:高端和低端新城疫活疫苗初始病毒含量分别为106.5 EID50/羽份和106.0 EID6.050/羽份,高端疫苗病毒含量高于国家标准(10 EID50/羽份)3.2倍,低端疫苗和国家标准一致;放置在水浴中的疫苗病毒含量随着时间增加呈下降趋势,水温越高下降越快;高端疫苗在10℃3 h、20℃2 h和30℃1 h条件下可以保证病毒含量(EID50/羽份)不低于国家标准,而低端疫苗无论溶解在哪个温度的水中后,进行免疫的病毒含量(EID50/羽份)都低于国家标准。     

猪伪狂犬病活疫苗（Bathar-K61株）免疫佐剂的筛选

为筛选到一种适合猪伪狂犬病活疫苗的免疫佐剂,本研究通过稳定性试验、病毒效价测定、安全性试验、效力试验对5种不同类型免疫佐剂(AD01、AD02、AD03、AD04和AD05)进行了比较筛选.稳定性试验结果表明,AD01、AD03、AD04和AD05 4种佐剂稀释疫苗后6h不分层,表现出良好的稳定性,而AD02佐剂稀释疫苗1h后出现分层;病毒效价测定结果表明,AD01、AD03、AD04 3种佐剂稀释后疫苗病毒滴度为106.25-6.50TCID50/100 μL,与对照组病毒滴度无差异,而AD05佐剂稀释疫苗后,测得的病毒滴度低于对照组,仅为103.5～5.17TCID50/100 μL,对病毒效价有干扰;安全性试验表明,用AD01佐剂稀释疫苗免疫猪群后,猪只体温升高,平均体温为(40.3±0.2)℃,20％(2/10)的猪只出现呕吐,40％ (4/10)的猪只出现食欲下降和精神不振的临床症状,AD03、AD04佐剂稀释疫苗免疫猪群后,临床表现无异常,与对照组一致;效力试验结果表明,剩余的AD03、AD04两种佐剂稀释疫苗后在第7天均可检测到中和抗体,第60天抗体中和效价平均值达到高峰,分别为69.8±3.3和69.5±2.8,高于对照组的57.8±7.0.筛选结果说明,AD03、AD04两种佐剂均适用于猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株),此研究为提高猪伪狂犬病活疫苗(Bathar-K61株)的使用效果进行了有益的探索.     

不同稀释液对马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗效力的影响

通过不同稀释液对鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗进行稀释后,按照<中华人民共和国兽药典>第三部(以下简称<药典>)方法用营养琼脂覆盖,37℃培养5～7d,进行蚀斑计数,最后通过对各稀释液所稀释疫苗病毒含量检测的分析,得出不同稀释液对疫苗效力的影响.     

鸡新城疫耐热冻干保护剂活疫苗试验

用耐热冻干保护剂冻干的鸡新城疫（LaSota系）活疫苗，在37℃环境下放置14d，疫苗的病毒含量EID50由10^9.1下降为10^8.1，在4℃环境下放置1年半，疫苗的病毒含量基本不变。