用微量和平板血凝与血凝抑制试验诊断鸡新城疫

用微量和平板血凝与血凝抑制试验诊断鸡新城疫王正平（江苏盐城市郊区家畜改良站２２４０１５）目前，确诊鸡新城疫的常用手段仍为鸡胚接种。这种方法虽可靠，但显然不符合简单、快速的要求。荧光抗体和酶联免疫吸附试验虽然准确、快速，但在基层较难推广。为此，作者试用...     

应用进口ELISA试剂盒检测鸡传染性支气管炎抗体

鸡传染性支气管炎（IB）是由传染性支气管炎病毒引起鸡的一种急性高度接触性的呼吸道传染病，是严重危害我国乃至世界养鸡业的重要疾病之一。已有多种血清学方法可用于IB抗体检测，我国目前常用的方法有琼脂扩散试验（AGP）、血清中和试验（SN）、间接血凝试验（IHA）等。国内很多学者先后建立了ELISA方法检测IB抗体均取得理想结果，但仅限于实验室检测，在基层推广应用还有一定困难。作者在加04年7月至2004年11月应用美国Affinitech-IB抗体检测试剂盒对山东几个规模化养鸡场送检的血清样品进行了检测，现报告如下。     

血凝与血凝抑制试验4单位病毒抗原配置与标定

为了解决基层兽医实验室检测人员在血凝与血凝抑制（HA和HI）试验中4单位病毒抗原的配置和标定问题的困扰，本试验对GB/T 18936-2020《高致病性禽流感诊断技术》中规定的4单位病毒抗原的配置和标定方法进行了探讨，试验结果表明，通过标定调整的4单位病毒抗原准确性高，从而减少血凝抑制实验的误差。     

鸡群新城疫抗体检测出现误差的原因探究

鸡新城疫是由新城疫病毒引起鸡群的一种急性、败血性和高度接触性传染病。有血凝素（HA）的病毒能凝集人或动物红细胞，血凝现象能被相应抗体抑制称为血凝抑制试验，新城疫病毒粒子表面具有血凝素，可以用HA、HI试验进行新城疫抗体的检测。血凝抑制（HI）试验是监测ND免疫状态的一种简便、快速的血清学方法。但其检测结果的准确性受很多方面的影响：设备的选择及试验前的准备，红细胞悬液的制备、保存和使用，标准抗原、待检样品的准备，环境温度，结果判断方法等方面的影响。     

鸡新城疫病毒的简易纯化与电镜检测

用人Ｏ型红细胞吸附－释放病毒的方法纯化粪便中的鸡新城疫病毒（ＮＤＶ），然后再用电镜检查。结果表明，此法具有简便、快速、敏感等特点，可作为检测ＮＤＶ及其它具有血凝性病毒的常规方法推广应用。     

3种犬细小病毒感染诊断方法比较

本研究应用犬细小病毒抗原快速检测试剂盒、血凝/血凝抑制试验和PCR方法对120份具有腹泻/呕吐症状的患犬粪便样本进行了犬细小病毒检测。结果显示,3种方法检测阳性份数分别为60,49,68。犬细小病毒抗原快速检测试剂盒与血凝/血凝抑制(HA/HI)试验相比较,敏感性、特异性及总符合率分别为100.0%,84.5%,90.8%;与PCR法相比较,敏感性、特异性及总符合率分别为85.3%,96.2%,90.0%。从试验结果看,HA/HI法具有较高的特异性,但敏感性较低;PCR具有高度敏感性和特异性,但不适合临床推广;细小病毒抗原快速检测试剂盒,在正确操作下结果可靠,是临床诊断犬细小病毒感染的首选方法。     

影响血凝试验结果的主要因素

血凝和血凝抑制试验是新城疫、禽流感等疾病的诊断和研究工作中普遍应用的方法。某些病毒（如禽流感病毒和新城疫病毒）能凝集禽类的红细胞,这个现象称为病毒的血凝,可以用来检测样品中病毒的有无和含量的多少,并排特异性反应。因此,血凝和血凝抑制试验可用于鉴定病毒,流行病学调查,检测血清中抗体效价．动物群体疫情的监测等。     

禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验抗原国家参考品的研制

按照国家一级标准物质要求和禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程规定的抗原制备方法,研制了一批禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原国家参考品,用于检测禽流感病毒（H5亚型）制品生物效价和血凝抑制操作过程中的校验。该批抗原经过8家单位对其协作标定后对结果进行统计学分析,确定该批禽流感抗原的血凝效价为1：80。另对所研制的禽流感抗原均一性、稳定性、无菌检验、剩余水分测定、真空度测定等各项指标进行检测,结果均符合禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程和国家一级标准物质要求。说明该禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原可以作为国家参考品。     

山羊痘血清学诊断技术研究

本实验研制了山羊痘的五种血清学检测方法并进行了比较分析，结果表明：琼脂凝胶扩散试验（AGP）适于基层兽医开展山羊痘病例的诊断，对流免疫电泳技术（CIE）能提高对抗原或抗体的分辨能力，荧光抗体技术（FAT）能对感染细胞进行山羊痘病毒定位检测，反向间接血凝试验（RPHA）主要用于临床痘疹痂皮和感染细胞中山羊痘抗原的定量测定，而正向间接血凝试验（IHA）不失为一种山羊痘抗体的最佳监测方法。     

简述新城疫病毒的实验室检测方法

新城疫病毒的实验室诊断一般是接种SPF鸡胚分离病原，通过血凝抑制性实验（HI）或者快速实时逆转录聚合酶链反应试验（RRT-PCR）来进行确诊。众所周知，新城疫病毒可在鸡胚的尿囊腔内复制繁殖，而鸡胚平均致死时间（MDT）取决于病毒毒力的强弱。血凝抑制试验（HI）常被用来判断一种未知病毒是否属于新城疫病毒，单克隆抗体试验可进一步对新城疫病毒进行分型。当没有唯一的单克隆抗体来确定新城疫病毒的毒性时，可用一组单克隆抗体来区分病毒的差异，例如，可以从PPMV-1中区分出低毒力的新城疫病毒。此外，单克隆抗体试验对于快速鉴定Ⅰ型新城疫病毒的效果并不佳，绝大多数单克隆抗体已经过改良并适用于识别Ⅱ型新城疫病毒，但并不能识别Ⅰ型新城疫病毒。由于单克隆抗体直接作用于单一特异的抗原表位，因此它们检测不同病毒的能力往往是有限的。而其他血清学的方法，如ELISA也常用于实验室诊断，以用来评估疫苗接种后的抗体反应。不过，这对于疾病的监测和诊断方面的价值非常有限，主要因为家禽使用疫苗的情况非常普遍。     

酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接血凝试验检测猪瘟免疫抗体的比对报告

基层兽医部门实验室普遍采用正向间接血凝试验（IHA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测猪瘟免疫抗体,为了获得正向间接血凝试验和酶联免疫吸附试验两种检测方法之间存在的关系,笔者进行了本次猪瘟免疫抗体检测试验,并分别比较了2种方法的符合率和合格样品检出率。     

血凝抑制试验的影响因素

血凝抑制试验可用于测定免疫抗体效价、辅助诊断病毒性疾病等方面，在基层工作中微量血凝抑制试验（HI）最常用于新城疫、禽流感等免疫抗体的检测。尽管此法操作简便、快速、准确、实用，但在实践中也常常由于某些因素的影响，从而使试验结果不精确，有时甚至无法判定结果。下面笔者就试验中遇到的问题及采取的解决方法总结如下，希望与大家共同探讨。     

血凝抑制试验的影响因素

血凝抑制试验可用于测定免疫抗体效价、辅助诊断病毒性疾病等方面，在基层工作中微量血凝抑制试验（HI）最常用于新城疫、禽流感等免疫抗体的检测。尽管此法操作简便、快速、准确、实用，但在实践中也常常由于某些因素的影响，从而使试验结果不精确，有时甚至无法判定结果。下面笔者就试验中遇到的问题及采取的解决方法总结如下，希望与大家共同探讨。     

间接Dot-PPA-ELISA检测猪细小病毒血清抗体

猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是引起妊娠母猪繁殖障碍的主要病原之一。PPV还可引起仔猪的皮炎和腹泻。我国各省市猪场猪细小病毒血清阳性率也很高。目前对该病的诊断准确率高的方法有间接荧光抗体技术、银加强胶体金技术、聚合酶链式反应法等,这些方法技术条件要求高,难在基层推广应用。血清中和试验、血凝和血凝抑制试验等操作较为简便,但准确率不高。     

应用进口鸡传染性支气管炎ELISA试剂盒检测鸡传染性支气管炎抗体

鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒引起鸡的一种急性高度接触性的呼吸道传染病，是严重危害我国乃至世界养鸡业的重要疾病之一。已有多种血清学方法可用于IB抗体检测，我国目前常用的方法有琼脂扩散试验(AGP)、血清中和试验(SN)、间接血凝试验(IHA)等。国内很多学者先后建立了ELISA方法检测IB抗体均取得理想结果，但仅限于实验室检测，在基层推广应用还有一定困难。     

间接血凝试验检测鸡传染性支气管炎病毒抗体

间接血凝试验检测鸡传染性支气管炎病毒抗体江国托，徐宝春，王永坤（扬州大学农学院２２５００１）目前，鸡传染性支气管炎（ＩＢ）已成为国内养鸡业的主要疾病之一，虽然已建立的检测ＩＢＶ及其抗体的方法很多，如琼脂扩散试验、细胞中和试验、ＥＬＩＳＡ、血凝和血凝抑...     

应用免疫酶组化染色法快速诊断“兔瘟”的研究

免疫酶组化染色法诊断“兔瘟”具有特异性强、重复性好、方便快速的优点,与血凝试验的阳性符合率为100%,是便于基层推广应用的有效方法.目前用于诊断“兔瘟”的方法较多,临床上都利用兔瘟病毒具有凝集人红细胞的特性而应用血凝(HA)、血凝抑制(HI)试验及平板凝集试验。尽管这些方法简便、快速,但人红细胞购买不便、保存期短.难以做到标淮化,不利于在基层推广。为此,我们利用免疫酶组化染色法来诊断兔瘟.试验表明,该法简便、准确、稳定,是适用于基层的有效方法.     

禽流感血凝抑制试验的质量控制

禽流感血凝抑制试验（HI试验）的原理是禽流感病毒在适宜的条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,利用这种特性检测血清中禽流感抗体的试验就叫禽流感血凝抑制试验。禽流感血凝抑制试验的方法是将受检血清与标定好的抗原发生充分反应,再加入红细胞作用,因为其快捷、成本较低、便于操作、能够处理大量的样品,所以成为基层动物疫病实验室对禽流感诊断及免疫状态监测的重要手段,但禽流感血凝抑制试验能否成功,影响因素很多,如果不加强质量控制,极易造成试验结果偏差,甚至误判,给禽流感的防止工作带来不便。笔者在长期的实验室检测中积累了一些经验,愿与大家分享探讨。 1试验器材的质量控制     

玻片凝集试验快速检测兔出血热病毒的研究

本文进行了玻片凝集试验(SHA)快速检测兔出血热病毒的研究。通过对试验因素的优选,认为以样品稀释液pH7.2、试验温度4～22℃、选用人O或B型红细胞和摇动反应5min等条件为佳.另外,通过对比试验(与血凝试验、HA)、阻断试验和病毒样品及兔出血热疫苗的检测,认为本方法是一个特异性强、敏感性高、重复性好和便于推广应用的有效方法。SHA能在5min报告检测结果。     

浅谈血凝试验（HA）和血凝抑制试验（HI）影响因素及应用

血凝试验（HA）和血凝抑制试验（HI）是目前兽医实验室常用的检测方法，作为血清诊断技术之一，是利用某些病毒具有凝集红细胞的特性，且这种特性能被特异性抗血清抑制的原理，用于已知病毒检查血清中相应抗体状态和已知血清鉴定未知病毒的一种兽医实验室最常用的实验方法。HA和HI试验具有特异性好、操作方便、可同时进行大量样本试验、对试验环境要求不高等优点，