优化组合用药对提高DLV虫苗防治球虫病效果的研究

本文介绍对广东顺德市两个球虫病重病区鸡场的苗鸡进行了两批试验,每个场的试验苗鸡均分为3个组,组1应用DLV虫苗(为球虫病三价双重致弱活疫苗)拌料口服免疫,不再服药。组2于服苗后期采用优化组合配伍用药连续2天,优化组合用药, 为球R0.5×10-6 氨丙啉合剂(20 2)×10-6, 为球R1.0×10-6 巴卡巴嗪80×10-6。组3为空白对照组。结果:两批试验中两组用苗组不用药的死亡率分别为4.5%、4.3%;两组用苗免疫后再连续2天分别应用 、 两种优化组合药后,即完全控制了球虫病。结论:在虫苗免疫效果较差的鸡中给予短期小剂量优化组合用药即可提高DLV虫苗防治球虫病的效果。     

黄芪多糖、淫羊藿多糖对鸡新城疫疫苗免疫增强作用的研究

60羽14日龄罗曼雏鸡随机分成三组,每组20羽。对照组颈部皮下注射用生理盐水稀释的ND—Lasota弱毒冻干苗0．2mL／羽,试验I组颈部皮下注射用10％黄芪多糖(APS)溶液稀释的ND—Lasota弱毒冻干苗0．2mL／羽,试验Ⅱ组颈部皮下注射用10％淫羊藿多糖(EPS)溶液稀释的ND—Lasota弱毒冻干苗0．2mL／羽。分别于免疫后第10、20、30、40天采血测定ND血凝抑制(HI)抗体。结果表明,试验用药鸡血清中HI抗体效价比对照鸡明显提高,而且雏持时间延长。此外,T淋巴细胞ANAE阳性率与HI抗体效价有相应的消长趋势。由此可见,黄芪多糖、淫羊藿多糖对鸡新城疫疫苗者明显的免疫增强作用。     

鹅源副黏病毒HN基因真核表达质粒的构建及基因疫苗的研究

本试验通过FCR技术从pGEM-HN质粒中扩增出了HR基因，构建了真核表达质粒pcDNA3-HN。真核表达质粒pcDNA3-HN肌肉注射免疫鸡后，HI血清抗体效价较空白对照组高，攻毒后鸡发病、死亡均少于空白对照组，有27%-36％的鸡耐过。但血清抗体效价较灭活苗组低，发病率和死亡率较灭活苗组高。试验结果表明HN基因在鸡体内，得到了表达，并使鸡获得了一定的免疫力，但保护作用不及鹅副黏病毒油乳剂灭活苗。     

蛋鸡首免乙型脑炎病毒后卵黄抗体变化规律的研究

本试验旨在研究疫苗、免疫剂量和注射方式对卵黄抗体效价规律的影响,探讨制备抗猪乙型脑炎病毒卵黄抗体蛋鸡的最佳免疫程序。选用无免疫褐羽蛋鸡180只,随机分成18组,每组10只。1、2组均为对照组,注射无菌生理盐水;3~10组采用皮下和肌肉两种注射方式,并依次注射灭活苗0.2、0.5、1.0和1.5 mL;11~18组同样采取两种注射方式,依次免疫相同剂量弱毒苗。各试验组分别于免疫前1 d、免疫后第3、7、10、14、18、21和28天采集当日鸡蛋6枚,提取卵黄抗体,测定效价。试验结果显示,1~6、11、12组卵黄抗体效价均为0,未产生明显免疫应答;7~10组注射灭活苗后7 d,平均卵黄抗体效价达到峰值,抗体持续时间为14 d;13~18组注射弱毒苗后14 d达到最高值,抗体持续时间为21 d;注射剂量相同但注射方式不同的两组之间比较,卵黄抗体效价差异不显著（P>0.05）;相同注射方式,相同疫苗的各试验组间,随着免疫剂量的增加卵黄抗体效价逐渐加强,且差异显著（P<0.05）。以上结果表明,肌肉或皮下两种注射方式,蛋鸡产生明显免疫应答至少需要免疫灭活苗1.0 mL或弱毒苗0.5 mL。比较弱毒苗与灭活苗,灭活苗刺激机体产生的抗体速度较快,但维持时间较短;较少剂量弱毒苗就可刺激机体产生抗体,但速度慢、维持时间长。     

禽流感——新城疫重组二联活疫苗不同免疫方法效果对比试验

选昌伟农贸公司健康鸡400只(试验前抗体监测新城疫抗体效价小于或等于1∶32,禽流感抗体效价小于1∶16的鸡为试验鸡)分4组,分别用滴鼻1羽份、肌肉注射1羽份、饮水2羽份、肌注1羽份3周后饮水2羽份加强免疫4种方式免疫,结果显示:禽流感-新城疫重组二联疫苗滴鼻、肌肉注射免疫的抗体效价合格率显著高于饮水免疫的抗体效价合格率(P<0.05),肌肉注射3周后饮水加强免疫一次能显著延长有效抗体持续期,能够产生更好的免疫效果。一次滴鼻、肌肉注射和饮水免疫仅能维持1个月左右的高抗体水平,加强免疫方式能维持2个月以上的高抗体水平。     

较高母源抗体对雏鸡ND Ⅳ系苗首次免疫效果的影响

8日龄雏鸡 70只随机分为 A、B组 ,每组 35只。A组 ,转移因子稀释 ND 系苗。B组 ,生理盐水稀释 ND 系苗。免疫途径为点眼、滴鼻。分别在免疫前 (0 d)和免疫后 2 ,4 ,6 ,8,10 ,12 ,14 d和 16 d采用 β-微量法测各组鸡 ND抗体效价。免疫后 2 6 d用 F48E9毒株攻击各组鸡。试验结果表明 ,各组鸡免疫后的抗体水平均呈下降趋势 ,且 A组鸡与 B组鸡免疫后抗体效价在整个免疫期间差异不显著 (P >0 .0 5 )。攻毒试验结果显示 :A组的死亡率为 4 2 .3% ,B组的死亡率为 5 9.3%。 A组与 B组的保护率呈极显著差异 (P <0 .0 1)。     

鸡传染性法氏囊病三价治疗苗的研究

将鸡传染性法氏囊病病毒HBD、HS和HD78 毒株分别适应于鸡胚成纤维细胞,病毒滴度均高达1.0 ×108PFU/ml 以上,以适当比例混合制成鸡传染性法氏囊三价细胞苗。以1.0 ×107PFU/ 只的剂量,经滴鼻、口服途径,分别免疫5 日龄、10 日龄SPF雏鸡,观察一周,无IBD临床症状,迫检可见,法氏囊组织无异常变化。以5.0×105PEU/ 只的剂量,滴鼻、口服免疫10 ～15 日龄雏鸡,7 天后检出琼扩抗体,15 天后血清抗体阳转率达80% 以上,15 天后攻强毒,保护率为100% 。不同疫苗的免疫保护效率比较试验证明,三价细胞苗免疫后的血清抗体阳转率、对强毒的保护率都明显优于双价苗、2512( 国产) 、B2( 美国)、D78(荷兰)、CT(国产)等IBD疫苗,现地应用已逾3000 万羽份,获得良好的效果     

鸭坦布苏病毒高免卵黄抗体的研制

将鸭坦布苏病毒浓缩后制备灭活苗,免疫试验鸡制备卵黄抗体,鸡胚中和试验表明,第3次免疫后15d,卵黄抗体中和效价为1：10^3.5,雏鸭攻毒保护试验结果表明,预防组和治疗组的保护率分别达到90％和78％,说明本试验制备的卵黄抗体对鸭坦布苏病毒病有着显著的预防和治疗作用。     

鸡球虫病多价疫苗免疫试验

通过鸡球虫病多价疫苗(DLV疫苗)临床应用试验,测试此多价疫苗的免疫效果,为解决球虫病的临床预防提供理论支持。试验应用饮水方法免疫1头份鸡球虫DLV型疫苗,免疫8d后用1.5万～2万个混合卵囊感染试验鸡,免疫组的病变分值和血便堆数、死亡率都明显低于非免疫组,说明通过DLV疫苗免疫的鸡对球虫病抵抗力强。     

鸡马立克氏病免疫失败的报告

现将我市某蛋鸡场外购的两批雏鸡因免疫失败致临近开产时发生鸡马立克氏病的诊断报道如下：１发病情况该场分别从两个种鸡场购入两批不同品种蛋鸡苗。２０００年１１月１０日从江苏某种鸡场购进绿壳蛋鸡苗５０００羽，１４０日龄时开始发病，发病率１０％，死亡率４％，２００１年２月１５日从上海某种鸡场购进海兰蛋鸡苗１００００羽，１００日龄也开始发病，发病率为６％，死亡率为３％。２临床症状两批病鸡的临床表现比较相似，均表现精神萎靡，饮、食欲停止，躯体消瘦，羽毛松乱、翅下垂，个别病鸡呈现一腿伸向前方，另一腿伸向后方。３…     

分泌抗伊氏锥虫单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立

通过3次sp2/0骨髓瘤细胞与免疫小鼠脾细胞间的融合试验,筛选出7株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中2G_6细胞株作了进一步的检定分析,用2G_6上清液对T.e抗原进行ELISA试验,显示出高度的特异性,与血吸虫、弓形虫均未出现交叉反应。效价为1∶5.1×10~3,诱生腹水抗体的效价为1∶1.6×10~7,免疫球蛋白类型属IgG_1亚美。该细胞株在外培养下,稳定地分泌特异性抗体已达6个月之久,在液氮冻存近8个日之后仍深持分泌抗体的能力。     

猪红细胞CD58分子的疫苗佐剂效应研究

用从木瓜酶修饰的猪红细胞提取的CD58分子协同NDⅣ疫苗 ,免疫 8日龄雏鸡 (分为试验A组、对照B组 ) ;用从正常猪红细胞提取的CD58分子协同NDⅣ疫苗 ,免疫 18日龄雏鸡 (分为试验C、对照D组 )。以 β_微量法测定ND抗体效价 ,以α_醋酸萘酯酶染色法检测鸡外周血T细胞的变化 ,并分别用F48E9强毒株在免疫后 2 4d攻击A组和B组鸡、39d攻击C组和D组鸡。结果表明 ,免疫前 ,8日龄雏鸡的ND抗体效价为 2 5.8,18日龄雏鸡的ND抗体均为阴性 ;免疫后 ,与对照D组比较 ,试验C组的ND抗体提前 4d达到 2 4.8,并且试验C组ND抗体效价显著高于对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,保护期延长 ;试验A组雏鸡体内ND抗体变化和对照B组相似 ,但试验A组雏鸡外周血T细胞数量显著高于对照B组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。攻毒试验结果显示 ,试验A组鸡死亡率为 33%、对照B组鸡死亡率为 6 3% ;试验C组鸡死亡率为 17% ,对照D组鸡死亡率为 5 3%。本研究结果表明猪红细胞CD58分子具有较好的疫苗佐剂效应。     

鸡新城疫Ⅱ系、Ⅰ系疫苗早期免疫的探讨及其免疫应答的形态学观察

本试验采用新城疫Ⅱ系苗对一日龄雏鸡进行滴鼻免疫,20日龄用Ⅰ系苗再作饮水免疫。通过对1000羽试验雏鸡血清HI抗体效价的连续检测和攻击强毒试验结果,证明雏鸡早期进行两次免疫后,HI抗体效价维持在较高水平,对强毒攻击具有怪强的抵抗力。 Ⅰ系苗饮水免疫后,经80天观察,未见鸡群出现任何明显不良反应,Ⅰ系苗免疫后3天,采取免疫鸡和同群感染鸡的脑,肺脏,脾脏,腔上囊和血液分别接种9日龄鸡胚,未能分离到Ⅰ系病毒。 实验中,对雏鸡免疫后各个时期腔上囊,脾脏,肠道淋巴组织及气管和肺等器官的免疫应答表现作了较为系统的观察。免疫后各器官淋巴细胞的明显增多,反映了HI抗体效价提高的相关免疫状态。气管和肺脏次级支气管上皮下大量淋巴细胞集聚和形成淋巴滤泡,提示采用滴鼻和饮水免疫途径可以诱导呼吸道的局部免疫力和增强局部抵抗力。     

禽流感H9亚型油乳剂灭活疫苗的改进

用新引进的6株禽流感病毒(AIV)H9亚型和现制苗用的AIV-H9毒株分别制备AIV-H9、AIV-H5、NDV二联三价油乳剂灭活疫苗，免疫5日龄和10日龄雏鸡，于免疫当日直至80日龄鸡出栏期间定期采血，用HI法检测相应的AIV-H9、AIV-H5和NDV抗体。结果表明，10日龄免疫鸡的AIV-H9抗体效价最高，5日龄和10日龄免疫鸡的AIV-H5抗体效价差别不明显；用引进的3号AIV-H9毒株制备的联苗对10日龄雏鸡免疫后20d产生AIV-H9保护性抗体，一直持续到80日龄以上，期间的抗体平均效价为6．72(1b)，而现制苗用的AIV-H9毒株制备的联苗免疫力较差；现制苗用的A1V-H5毒株制备的联苗免疫效力仍较好；分别接种0．25、0．30mL／只联苗的雏鸡AIV-H5抗体效价没有明显差别，而AIV-H9抗体效价以接种0．30mL／只剂量的为高；不同日龄、不同免疫剂量的试验鸡NDV抗体效价没有明显差异。     

鸡减蛋综合征油乳剂灭活苗的免疫效果试验

随机选择20周龄产蛋鸡300羽，分为3组，每组100羽。A组接种国产新支减三联疫苗，B组接种进口新减二联苗，C组同时接种进口新减二联苗及新城疫Ⅳ系苗（2羽份滴鼻）。接种后第10d、20d、30d、60d分别采集血样检测HI抗体。结果A组鸡HI抗体效价上升最快，效价较高，下降速度也很快，适宜于紧急免疫接种。B、C组抗体效价上升较慢，但维持高抗体水平时间较长，适宜于预防免疫接种。C组数据显示，新城疫疫苗与减蛋综合征疫苗对鸡体产生免疫应答时可能具有协同作用。     

禽霍乱蜂胶灭活疫苗推广应用研究──对鸡的免疫区域试验和示范推广

本文报告禽霍乱蜂胶苗对鸡进行区域免疫试验和示范推广，证实禽霍乱蜂胶苗免疫鸡安全，对生产性能无明显影响，免疫期达１８０天以上。试验组鸡平均发病率为３．６１％，死亡率为２．６１％，致死率７２．３％。对照组平均发病率为１９．２５％，死亡率为１５．７６％，致死率８１．８８％。     

鸡产蛋减少综合症(EDS-76)油乳剂灭活苗免疫效力试验

用四批鸭胚尿囊液?羊水混合制备的鸡产蛋减少综合症油乳剂灭活疫苗,分别免疫35日龄非免疫鸡,每羽鸡肌肉注射0.5 mL,不定期采血,连续检测HI抗体的动态变化.这四批疫苗免疫后,10d均可产生坚强的免疫力(HI效价为7.5log2),到第30天血清中HI效价达到高峰(10.7log2),直到第180天,其HI效价仍为8.3log2?免疫后30 d用强毒攻击,观察15d,免疫组未见异常表现?而对照鸡于攻毒后第10天,产蛋下降,出现软壳蛋,说明四批疫苗对eds-76均有良好的保护性.     

新城疫3组基因亚单位疫苗的免疫原性试验

将3个融合表达重组菌pGHN/DE3、pGF/DE3和pGF/E.coli复苏后进行酶切鉴定，确认无误后均经1mmol/L的TPTG诱导，然后分组3次免疫鸡。试验鸡血清经血球凝集抑制试验（HI）和微量细胞中和试验（SN）来检测HI抗体和SN抗体。结果表明：重组菌pGHN/DE3所生产的亚单位苗免疫鸡后，可激发较高的HI抗体，但激发的中和抗体较弱。与I系NDV常规疫苗相比，3个重组大肠杆菌基因工程苗所诱发的中和抗体效价较弱，对各组中起关键作用的中和抗体进行方差分析表明，3个基因工程菌所诱发的中和抗体与常规疫苗免疫组和基础免疫对照相比，差异显著，因此，尽管3种基因工程苗产生了中和抗体，但中和抗体效价上升缓慢，HI抗体效价上升较快。     

鸡新城疫卵黄抗体效价动态变化情况研究

选取150日龄健康产蛋母鸡40羽,肌肉注射鸡新城疫Lasota疫苗2倍剂量/羽,10 d后再注射鸡新城疫油乳剂灭活苗4倍剂量/羽,自由采食和饮水。分别收集免疫前、免疫后10、20、30、40和50 d,母鸡所产鸡蛋提取卵黄抗体,测定不同时间卵黄抗体效价。结果发现免疫前卵黄抗体效价较低,鸡新城疫Lasota疫苗免疫后卵黄抗体效价开始缓慢升高,鸡新城疫油乳剂灭活苗加强免疫后卵黄抗体效价大幅度提高,并在二免后20 d卵黄抗体效价达到高峰,维持一段时间后卵黄抗体效价开始逐步下降。表明收集鸡新城疫疫苗二免后20 d左右的鸡蛋提取卵黄抗体效价高。     

鸡痘弱毒苗几种免疫途径的安全性及免疫效果

取鸡痘弱毒苗分别以饮水、滴鼻、点眼、肌肉注射、刺翼等5种途径各免疫7日龄非免疫鸡10只，剂量为10羽份／只，免疫后观察14d，检查不同免疫方式对鸡只的安全性；同时，用1个羽份的鸡痘弱毒苗采用上述5种途径各免疫32日龄非免疫鸡20只，接种后28天，连同对照鸡只，用鸡痘强毒攻击，观察21d，比较不同免疫途径鸡痘弱毒苗对鸡只的保护效果。试验结果表明，5种途径免疫的鸡只均安全；饮水、滴鼻、点眼、肌肉注射、刺等5种途径对强毒的攻击保护率分别为60％，60％，50％，60％和100％。