绵羊卵巢组织石蜡切片制作条件优化研究

为观察绵羊正常卵巢组织的形态结构，采用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin ，HE）染色法制作绵羊卵巢组织石蜡切片。结果显示，在切片制作过程中存在的问题主要包括染色不均、染色对比不明显、过度染色、染色过浅和切片出现斑点等。在试验过程中可通过充分分化、蓝化、充分水洗等因素的控制来提高切片的染色效果，该方法可为动物卵巢及卵泡染色切片制作提供技术指导。     

生地黄与马兜铃配伍缓解马兜铃毒性的研究

试验旨在探究生地黄与马兜铃配伍对鸡肝脏和肾脏的影响，为中药配伍解毒提供现代理论依据。将80只雄性雏鸡随机分为10组，分别为对照组，马兜铃高、中、低剂量组，生地黄高、中、低剂量组，马兜铃与生地黄配伍高、中、低剂量组。各组中药经过煎煮、过滤、离心去除杂质，制成煎液。每日灌服给药，连续28 d。采用试剂盒检测谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）肝脏和肾脏功能指标；利用试剂盒检测总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）。采集肝脏和肾脏并制备切片观察组织病理学变化。结果显示，与单用马兜铃组相比，马兜铃与生地黄配伍后机体的AST、ALT、Cr和BUN含量显著降低（P<0.05），马兜铃与生地黄配伍后能明显提高机体的T-AOC、SOD和GSH-Px含量；单用马兜铃能引起机体氧化损伤，导致MDA含量显著升高，生地黄与马兜铃配伍后能显著降低MDA含量（P<0.05），减缓马兜铃对机体的氧化损伤；病理结果表明，生地黄与马兜铃配伍后能显著降低马兜铃煎煮液对肝脏和肾脏造成的病理性损伤。综上，与单用马兜铃相比，马兜铃与生地黄配伍联用对鸡肝脏和肾脏造成的损伤有缓解作用，可提高马兜铃的用药安全。     

用补胎胶水作组织切片粘贴剂

用补胎胶水作组织切片粘贴剂马吉飞，王廷富，董淑珍（河北农业技术师范学院牧医系，昌黎０６６６００）组织切片需用粘贴剂，将切成的蜡带粘附在玻片上；而且经染色和各种处理后要保证不脱落。常规切片染色用蛋白甘油作粘贴剂即可，但在一些特殊组化染色，如免疫组化往往...     

大蚕、蛹组织切片核酸特异染色技术的探讨

本文对大蚕、蛹的石蜡切片制作及其核酸特异染色方法进行探讨，针对虫体大和蛹体壁高度丁质化特点，对组织固定，脱水、透明、透蜡的时间相应的增加和固定前蛹皮剪开，在截位时要考虑切片段两头保留一段仅用来起保护作用的部分，并采用了二种核酸特异染色方法染色。结果表明：制片设计方案基本可行，部分细节需进一步改进；甲基绿-派罗宁（昂纳-帕彭海姆）染色法的切片组织颜色层次分明，DNA含量丰富的丝腺组织呈紫黑色，其它组织的DNA呈紫红色，RNA呈淡红色，改良的甲基绿一派罗宁染色法的切片组织颜色偏淡；孚尔根染色法的切片组织颜色层次分明，核酸呈紫红色，其它无色，能较好的以颜色的深浅来判断核酸的丰度。更理想的染色方案还有待进一步摸索。     

生物芯片技术在动物疫病及畜产品安全检测中的应用

1 基本概念 生物芯片技术是随着“人类基因组计划”的进展而发展起来的,它主要是指通过微加工和微电子技术等方法,将大量生物大分子比如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等等生物样品有序地固化于支持物（如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等载体）的表面,构建微型生物化学分析系统,组成密集二维分子排列,然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交,通过特定的仪器比如激光共聚焦扫描或电荷偶联摄影像机（CCD）对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析,从而判断样品中靶分子的数量,完成对生命机体生物组分准确、快速、大信息量的检测。     

超量添加矿物质对肥育猪生产性能及组织中某些微量元素含量的影响

本试验采用２５头６０～１０ｋｇ社长大肥育猪，随机分为５组、分别饲喂基础日粮添加０．５％（Ｉ组）、１％（Ⅱ）、２％（Ⅲ）、３％（Ⅳ）和４％（Ⅴ）的实用矿物添加剂，持续饲喂２７天，观察超量添加矿物添加剂对其生产性能及组织中微量元素含量的影响。结果表明，添加高于１％的本试验添加剂，使猪的日粮增重和日采食量明显降低，而料肉比明显升高；另外，使猪各组织钻含量明显升高（Ｐ＜０．０５），肝、脾硒含量明显升高（Ｐ＜０．０５），而肌肉、肾、心脏硒含量则明显降低（Ｐ＜０．０５），即机体内各组织中硒含量的分布发生改变。     

猪圆环病毒发病机理的研究

通过口／鼻和静脉注射途径，用猪圆环病毒（ＰＣＶ）实验性感染未吮初乳仔猪，检查其病毒和抗原的分布，分别用病毒分离和冰冻切片间接免疫荧光抗体技术检查ＰＣＶ和抗原。结果，在机体组织中都检出了ＰＣＶ抗原，特别是在脾、胸腺和肺。中枢神经系统的组织中未检出ＰＣＶ抗原或病毒。检查自然发生流产／死胎母猪的胎儿，结果从同一农场两窝死产仔猪的２份血清和１份脾脏病料中分离出３株ＰＣＶ；检查１６０份胎儿血清，未检出ＰＣＶ     

动物组织块染色石蜡包埋制片法

动物组织块染色石蜡包埋制片法任成林（张家口农业高等专科学校河北张家口０７５１３１）组织块染色石蜡包埋制片法，是将组织的染色，改放在组织包埋切片之前进行，组织切片后不再染色，直接贴片至封固，即成永久标本。这种方法的优点是，简化了切片制作程序，节省药液。...     

玛多牦牛红细胞血清及组织中乳酸脱氢酶活性的测定

乳酸脱氢酶（lactate dehydrogernase，LDH）存在于机体各组织器官中，主要分布于细胞的胞质液中，是机体能量代谢中参与糖酵解的一种重要酶。LDH在体内可逆地催化丙酮酸和还原性辅酶Ⅰ（NADH2）转变为乳酸和氧化性辅酶Ⅰ（NAD），进而参加机体的能量代谢，因此LDH质与量的改变，直接影响到机体的能量代谢。LDH在临床上也有重要的诊断意义，当机体各组织器官病变时，其组织器官本身的LDH要发生改变，并且可引起血液中LDH改变，主要见于急性心肌梗塞、病毒性肝炎、肝硬化、     

畜禽肠道组织H.E.染色石蜡切片制作要点及关键技术

通过研究畜禽肠道的发育,能够更好地了解机体的生长发育状况,对研制科学的饲粮配方具有指导意义。而组织切片就是检验肠道发育的一种基础且常规的实验室技术。近年来,虽然研究者对传统组织切片技术进行了全面的研究,但是因为动物品种和组织的差异、取样方法的不同,不同人制作的切片质量参差不齐。笔者参考大量文献资料,结合在试验过程中积累的经验,对畜禽肠道组织苏木精-伊红(H.E.)染色石蜡切片制作程序及各程序的注意事项进行综述,以期提高肠道组织切片的质量。     

水牛有腔卵泡颗粒细胞凋亡的生物形态学特征

为了解水牛有腔卵泡闭锁的起因和有腔卵泡中是否存在卵泡颗粒细胞凋亡，本研究选择青春期前水牛和成年（发情间期和发情期）水牛的卵巢，采用石蜡组织切片、HE染色技术进行光镜观察，并采用DNA原位末端标记（TUNEL）技术和透射电镜观察研究了卵泡颗粒细胞凋亡的特征。结果表明：青春期前水牛的健康有腔卵泡上无或仅有极个别凋亡的卵泡颗粒细胞（GCs），而闭锁有腔卵泡上存在有多量凋亡的GCs，凋亡的形式：GCs层内出现单个或多个凋亡细胞，卵泡腔内出现凋亡小体群。在成年水牛发情间期的闭锁大卵泡上，GCs层弯曲皱折，存在多量凋亡的GCs。发情期水牛成熟卵泡的GCs层也存在GCs凋亡，排卵前的GCs层细胞全部脱落到卵泡腔内。本研究首次在同一组织切片上先后分别应用HE染色和TUNEL检查细胞凋亡，且证实了水牛有腔卵泡GCs凋亡的存在。超微结构显示了GCs凋亡的核边集化、核浓缩及凋亡小体的形态。上述结果提示：在水牛闭锁有腔卵泡中存在着GCs凋亡，GCs凋亡是启动水牛有腔卵泡闭锁的潜在机理。     

番鸭小鹅瘟病直接荧光诊断试剂的研制

将抗番鸭GPV单抗腹水采用透析法标记异硫氰酸荧光素（FITC）,制备成抗GPV荧光抗体,研制检测GPV抗原的直接免疫荧光诊断方法。结果显示GPV荧光抗体仅与GPV阳性的组织切片或细胞呈现特异性荧光,与番鸭细小病毒（MPV）、番鸭呼肠孤病毒（MDRV）、鸭副粘病毒（DPMV）、鸭病毒性肝炎病毒（DHV）和正常番鸭组织切片不反应;与间接荧光方法的符合率为92．9％。表明GPV荧光抗体具有较好的特异性、敏感性和准确性,可用于临床快速诊断番鸭小鹅瘟病。     

桑花子房、花药整体染色透明技术的研究

桑花子房、花药整体染色透明技术的研究许晓风，宋红生，赵正龙（安徽农业大学蚕桑系）观察植物子房、花药等生殖器官内部构造及发育过程的传统方法一般是采用石蜡切片法。该法的优点是能较好地显示和分辨组织器官内部的细微构造，缺点是操作繁冗，只能显示观察对象的某一...     

祖代肉用鸡群禽白血病病毒感染的实验室诊断

对疑似J亚群禽白血病病毒（ALV－J）感染的祖代肉用型种鸡群进行病原微生物学的实验室诊断。组织病理学检测结果表明，病鸡脾、肾病理组织切片上有大量增生的髓细胞，呈典型的髓细胞瘤病理显微变化。肾组织触片和组织切片用抗ALV－J特异性单克隆抗体G2进行间接免疫荧光反应（IFA）检测，结果呈阳性。病料接种鸡胚成纤维细胞（CEF）盲传3代后，分离到1株病毒（JS－Nt），经鉴定为ALV－J。这些结果证明该鸡群存在ALV－J的感染。     

鸡睾丸组织移植初步研究

本文对鸡睾丸组织的自体移植和异体移植作了初步的研究。将50日龄广西土鸡睾丸组织（0．3mm^3）自体移植到腹腔和腹部皮下，将30日龄竹丝鸡的睾丸组织（0．2mm^3）异体移植到新生广西土鸡的腹部皮下，在不同时间段（自体移植分为3周、1个月、2个月和3个月，异体移植定为3个月）取出移植物，检测移植组织的体积和重量，并通过组织切片观察曲精细管形成和精子发生情况。结果表明，自体和异体移植组织分别在移植后1个月和3个月内都保持生长状态，体积和重量明显增加。其中自体移植组织切片观察发现移植后3周、1个月时都有形态正常的精予形成，在异体移植组织切片中发现组织中有明显的曲精细管形成，但没有完整的精子发生。这初步证明，在鸡中进行睾丸组织自体或者异体移植是可行的。     

外源核苷酸对动物肠道发育和免疫功能的影响

核苷酸（NT）是组成细胞的主要成分，是DNA和RNA的基本组成单位，在细胞结构、代谢、能量和功能调节等方面起重要作用。过去人们认为，动物机体能由内源从头合成各种核苷酸，而且又没有特异性的缺乏症．所以一直将其视为非必需营养素。但近年来对大鼠、小鼠的研究表明。机体许多生长代谢旺盛的组织（小肠、大肠、淋巴）和细胞（红细胞、白细胞、骨髓细胞）从头合成的核苷酸能力有限。尤其当动物处在受到免疫应激、肝损伤、饥饿及快速生长的情况下，内源合成的核苷酸不能满足机体的需要．需要补充外源核苷酸。研究发现，日粮核苷酸对维持免疫系统的正常功能、胃肠道的生长发育有重要作用。     

用免疫组织化学方法检测猪流感病毒

美国研究人员用单克隆抗体进行免疫组织化学试验（IHC）检测福尔马林固定石腊包埋组织中的猪流感病毒（SIV）。IHC使用的单克隆抗体（MAh）为抗SIV增富腹水，系用浆细胞致敏SIV株Phs。＊＊60及重组病毒＊3376的复合物生成；在所人的MAh稀释度门：l（y－－：2000）下，均在试验感染猪的肺切片中检出颗粒状褐色染色，以！：100（）的稀释度最好。对一于伪狂犬病病毒、巨细胞病毒、副粘病毒、猪生殖和呼吸道综合征病毒、猪冠状病毒或猪肺炎霉形体的现地病例，或者19大剖腹产不吃初乳对照仔猪的切片，IHC试验不产生染色Hi病态分离（V…     

气管给药法检测甲醛对小鼠肺组织氧化损伤的研究

为观察由甲醛引起的小鼠肺组织氧化损伤，采用气管给药法将不同剂量的液态甲醛通过气管直接给药，连续染毒处死后，摘取小鼠肺组织，测定肺表面活性物质相关蛋白A（SP-A）含量、肺组织SOD活力以及MDA含量；制作肺组织HE染色切片，观察小鼠肺组织病理变化。结果表明，高、低剂量组的SP-A含量及肺组织SOD活力均显著低于生理盐水对照组（P〈0.05），高、低剂量组的肺组织MDA含量均显著高于生理盐水对照组（P〈0.05）；光镜下观察可见高、低剂量组的肺泡间质细胞增多，且炎症细胞增多，发生炎性浸润。综上提示，甲醛可引起小鼠肺组织氧化损伤。     

Masson三色染色与HE染色在豚鼠牙齿组织石蜡切片中的比较研究及应用

针对牙齿组织形态学研究的难点,选择适宜固定液,用EDTA-2Na进行脱钙,完成了牙齿组织石蜡切片的制作。通过确定染色程序及各种染料的最佳作用时间,分别利用Masson三色染色法、传统的苏木精和伊红（HE）染色法对牙齿组织切片进行了染色观察。染色结果表明,与HE染色法相比,Masson三色染色更能使牙齿的各主要成分以不同颜色显现出来,色彩对比鲜明,亮丽润眼,为牙齿组织生理及病理组织形态学研究奠定了基础。针对机体中硬组织的相似特性,该试验方法可以在骨骼、软骨等硬组织的形态学研究中参考、改进并推广使用。     

高原地区皮肤标本制片要领

病理学诊断时，常需要制作组织切片进行病理组织学诊断，但在制作皮肤组织片时，因其细胞层次较多，组织结构致密，相对含水分少以及高原地区气候干燥，在制片过程中水分散失快，组织切片干脆易碎裂等因素而影响制片质量。针对这些问题，笔者摸索出以下经验，兹介绍体会如下： １．采皮肤样本要大，一般取 １ｃｍ２大小。 ２．用色音氏液固定１０－１２天，固定液尽量用旧液不用新配液。 ３．脱水要慢慢递进：５０％酒精６ｈ→６０％酒精６ｈ→７０％酒精６ｈ→８０％酒精（过夜）→９０％酒精（Ⅰ→Ⅱ各４ｈ）→９５％酒精与正丁醇等量混合…