细胞病变观察法检测人参皂苷及其衍生物抗马立克氏病病毒的作用

为探讨人参皂苷及其衍生物体外抗马立克氏病病毒的作用机理,采用体外细胞培养法,在药物安全浓度范围内,测定人参皂苷及其衍生物对马立克氏病病毒(MDV)感染鸡胚成纤维细胞(CEF)的保护效果。结果显示,修饰前的人参皂苷和修饰后的衍生物7具有较好的抗病毒效果。表明人参皂苷和衍生物7可以减轻病毒对CEF细胞的损伤程度。     

人参皂苷及其衍生物体内抗马立克氏病毒的间接免疫荧光观察与PCR检测

为了探讨人参皂苷及其衍生物体内抗马立克氏病毒的作用机理.用马立克氏病毒人工感染雏鸡模型,采取人参皂苷及其衍生物口服,通过间接免疫荧光试验动态观察人参皂苷及其衍生物能否减少MDV抗原在组织中的分布;通过PCR检测看人参皂苷及其衍生物能否减少MDV的出现.结果显示:人参皂苷组、衍生物组被检组织的阳性细胞数量明显比盐酸吗啉胍阳性对照组被检组织的阳性细胞数量少;MDV病毒核酸的PCR检测显示,药物没有阻止病毒对组织的感染.结果表明,人参皂苷及其衍生物抗马立克氏病毒效果要优于盐酸吗啉胍.     

人参皂苷及其衍生物抗马立克氏病毒的作用

用马立克氏病毒(Marek′s disease virus,MDV)人工感染雏鸡为疾病模型,采取人参皂苷及其衍生物口服,通过间接免疫荧光试验动态观察人参皂苷及其衍生物能否减少MDV抗原在组织中的分布。结果人参皂苷组、衍生物组被检组织的阳性细胞数量明显比盐酸吗啉胍阳性对照组被检组织的阳性细胞数量少。表明人参皂苷及其衍生物抗MDV效果要优于盐酸吗啉胍。     

分子修饰前后人参皂苷体外抗马立克氏病毒鸡胚成纤维细胞模型的建立

用雏鸡将马立克氏病毒(MDV)血毒复壮,分离发病鸡淋巴细胞并接种于鸡胚成纤维细胞,观察其病变。获得适应鸡胚成纤维细胞(CEF)的MD强毒,通过电镜观察、琼脂扩散实验进一步鉴定病毒,并建立了MDV感染CEF细胞模型,为研究人参皂苷及其衍生物的体外抗病毒作用及其机制奠定基础。     

人参总皂苷及其衍生物抗Ⅰ型马立克氏病毒作用的电镜观察

应用透射电镜负染技术，观察人参总皂苷及其衍生物对Ⅰ型马立克氏病毒（MDVI）作用后病毒颗粒结构改变情况，旨在深入探讨人参总皂苷及其衍生物抗MDV的作用机理。结果显示，病毒颗粒变形，大小不均匀．核心缺损或均质化，包膜裸露或破损以及病毒颗粒凝集融合成块，结构模糊不清。在相同条件下衍生物比人参总皂苷对MDV的破坏作用强。提示人参总皂苷及其衍生物在体外对MDVⅠ（MDV—Ⅰ）病毒颗粒的形态结构、表面成分和分散均有破坏作用，而衍生物作用更加显著。     

马立克氏病毒感染鸡胚成纤维细胞模型的建立

用雏鸡将马立克氏病毒（MDV）血毒复壮,分离发病鸡淋巴细胞并接种于鸡胚成纤维细胞,观察其病变。获得适应鸡胚成纤维细胞（CEF）的MD强毒,通过电镜观察、琼脂扩散实验进一步鉴定病毒,并建立了MDV感染CEF细胞模型,为研究人参皂苷及其衍生物的体外抗病毒作用及其机制奠定基础。     

人参皂苷及其衍生物体内抗鸡马立克氏病毒的病理组织学观察

为探讨人参皂苷及其衍生物体内抗马立克氏病毒的作用机理,试验用马立克氏病毒人工感染雏鸡模型,口服人参皂苷及其衍生物,动态观察雏鸡的组织病理学变化,并比较治疗组和病毒对照组的病变差异.结果人参皂苷和衍生物治疗组的组织结构病变程度均低于病毒对照组.说明人参皂苷及其衍生物可以降低病毒对组织的损害程度,增强雏鸡对病毒的抵抗力.     

人参皂苷及其衍生物抗马立克病病毒作用的超微结构和病理变化观察

为了探讨人参皂苷及其衍生物抗马立克氏病病毒的作用机制.采用马立克氏病毒感染的雏鸡作为模型,人参皂苷及其衍生物口服给药途径,动态观察不同时间段,试验鸡的器官病理变化和脾脏、法氏囊的组织超微结构改变.结果发现人参皂苷及其衍生物组的器官病变程度明显低于病毒对照组,法氏囊和脾脏的超微结构病变轻于病毒对照组,说明人参皂苷及其衍生物在体内可以通过保护机体免疫器官来发挥抗病毒作用.     

脂质体介导马立克病病毒DNA转染鸡胚成纤维细胞

利用粗提的马立克病病毒(MDV)CVI988感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)总DNA与脂质体包裹转染CEF,获得具有感染性的MDV。结果表明,使用3μg MDV感染的CEF总DNA转染CEF,6 d~7 d后可形成0~16个MDV特有空斑。     

企业

正大华农取得一项疫苗发明专利证书广东大华农动物保健品股份有限公司8月21日发布公告称,公司近日收到国家知识产权局颁发的一项发明专利证书,发明名称为"一株马立克氏病病毒疫苗株及其分离鉴定和应用"。大华农称,该发明在健康鸡场中分离到一株鸡马立克氏病病毒(MDV),命名为CVTR株。MDV CVTR株不会诱发鸡的肿瘤,对鸡群也没有免疫抑制作用。CVTR株病毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)上或鸡体内比目前广泛使用的CVI988/Rispens疫苗株增殖更迅速。将CVTR株用作马立克氏病活疫苗的生产毒株所制备的疫苗,预防超强毒MDV诱发的鸡马立克氏病,其保护力优于目前国内外市场上应用     

企业

<正>大华农取得一项疫苗发明专利证书广东大华农动物保健品股份有限公司8月21日发布公告称,公司近日收到国家知识产权局颁发的一项发明专利证书,发明名称为"一株马立克氏病病毒疫苗株及其分离鉴定和应用"。大华农称,该发明在健康鸡场中分离到一株鸡马立克氏病病毒(MDV),命名为CVTR株。MDV CVTR株不会诱发鸡的肿瘤,对鸡群也没有免疫抑制作用。CVTR株病毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)上或鸡体内比目前广泛使用的CVI988/Rispens疫苗株增殖更迅速。将CVTR株用作马立克氏病活疫苗的生产毒株所制备的疫苗,预防超强毒MDV诱发的鸡马立克氏病,其保护力优于目前国内外市场上应用     

鸡马立克氏病血清型

正所有的马立克氏病毒分离株可根据生物特性分为三个不同的血清型:1)血清1型:包括所有的致病性或致瘤性MDV及相应的致弱株。根据血清I型MDV诱发免疫鸡群MD病变的能力可将血清1型之MDV进一步分为:温和马立克氏病病毒(m MDV),强毒马立克氏病病毒(VMDV),超强马立克氏病病毒(VVMDV),超超强马立克氏病病毒     

中药黄芩苷体外抗马立克氏病病毒作用的研究

探讨黄芩苷体外抗马立克氏病病毒(MDV)作用,应用细胞病变观察法(CPE)观察MDV对鸡胚成纤维细胞(CEF)的影响,采用Reed-Muench法计算MDV细胞半数感染量(TCID50),以CEF为宿主细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法从黄芩苷对MDV的增殖抑制、感染阻断以及直接灭活3个给药途径探讨黄芩苷抗MDV作用。结果显示:MDV对CEF的TCID50为10-4.5/0.1 m L;3种给药途径下,黄芩苷浓度在312.5~78.13μg/m L范围都具有较好的抗MDV感染作用,并且感染阻断途径下黄芩苷浓度为312.5~156.25μg/m L时能够促进细胞的生长,直接灭活途径下黄芩苷浓度为312.5μg/m L时能够促进细胞的生长。其中感染阻断与直接灭活途径给药比增值抑制途径给药的抗MDV感染作用效果要好,直接杀灭途径给药时的病毒抑制率最高。     

硫酸化人参总皂苷对人工感染MDV鸡淋巴细胞活性的调节

鸡马立克氏病病毒（MDV）经腹腔注射感染8日龄雏鸡,攻毒15 d后检测硫酸化人参总皂苷对鸡外周血白细胞数和淋巴细胞增殖活性的影响,并利用半定量RT-PCR方法分析外周血淋巴细胞IFN-γmRNA的表达水平。结果表明,MDV感染能引起鸡淋巴细胞百分比相对增多（P〈0.01）,人参总皂苷及其硫酸化人参总皂苷不能改变MDV所致变化（P〉0.05）,且硫酸化人参总皂苷与人参总皂苷之间没有差异（P〉0.05）;MDV感染极显著抑制淋巴细胞增殖（P〈0.01）,人参总皂苷能明显改善MDV对感染鸡淋巴细胞增殖的抑制（P〈0.01）,硫酸化人参总皂苷促进了MDV所致的抑制状态（P〈0.01）;人参总皂苷及其硫酸化人参总皂苷均能增强MDV所致鸡淋巴细胞IFN-γmRNA的表达,与健康组相比,硫酸化人参总皂苷极显著增加IFN-γmRNA表达（P〈0.01）。结果提示,硫酸化人参总皂苷对人工感染MDV鸡的淋巴细胞活性具有调节作用,其作用比人参总皂苷的作用更强。     

姜黄素抑制马立克氏病病毒在CEF细胞中的复制

为探究姜黄素对马立克氏病病毒(MDV)在CEF细胞中复制的影响,在病毒感染的不同时间点加入姜黄素,通过real-time PCR、蛋白免疫印迹和病毒噬斑计数实验来检测姜黄素对病毒复制的影响。结果显示:姜黄素能够抑制MDV基因表达、蛋白合成以及病毒的增殖,且抑制作用具有剂量和时间依赖性;姜黄素还能直接影响MDV的感染性;姜黄素明显影响MDV感染细胞中IL-1β、IL-6等细胞因子的表达。该研究结果表明,姜黄素能体外抑制MDV的复制和增殖,具有开发为抗MDV临床药物的潜力。     

马立克氏病毒致病机理及其防治的研究进展

马立克氏病是由马立克氏病毒(MDV)引起的淋巴细胞增生性传染病。MDV在各种压力刺激下出现变异和毒力增强的现象,导致部分疫苗功效降低,给该病的防治带来了新的挑战。本文主要从的MDV分子生物学特征与致病机制、马立克氏病的流行病学及其防治等方面进行综述,为深入研究该病提供科学依据。     

双价苗中马立克氏病病毒含量

用显微镜观察和间接发荧光抗体试验（IFA）分别测定某马立克氏病病毒双价苗中所含两种814毒株和HVT毒株的空斑数。结果表明，IFA检测的空斑数显著大于显微镜观察的空斑数，且双价茵中两种病毒的含量与这两种病毒混合前加入的比例基本一致。这表明用IFA对双价苗中的MDV进行空斑计数从而分别测定MDV的含量是完全可行的。     

MDV Z_4和HVT Fc_(126)在不同遗传抵抗力的CEF上的生长特性及研究

马立克氏病(MD)疫苗 Z_4和 HVT Fe-126病毒在对MD 病毒(MDV)有高度易感性的 P 系鸡、有高度抵抗力的 O 系鸡和普通非免疫鸡的鸡胚成纤维细胞(CEF)上形成的病毒蚀斑大小和数量均无显著差异.说明,CEF 对MDV 的易感性不受遗传因素的影响.MDV 血清2型 Z_4毒株和血清3型 HVT Fc_(126)株在 CEF 上的生长特性比较表明,Z_4毒株生长速度慢,蚀斑小,培养10天蚀斑大小为0.23mm~2,相当于 Fc_(126)毒株培养第4天时的水平.     

miRNA干扰gM基因对马立克氏病病毒体外复制的抑制作用

用miRNA Target Finder分析软件预测干扰RB1B株马立克氏病病毒（Marek’s Disease Virus，MDV）gM基因翻译的潜在靶序列，从中筛选出3个作为干扰对象，根据干扰载体pRFPRNAiC特点，设计合成3对单链DNA序列，经PCR反应扩增出双链DNA，并将其插入干扰载体pRFPRNAiC，构建重组干扰质粒pRFPRNAiCgM1、pRFPRNAiCgM2、pRFPRNAiCgM3。将质粒pRFPRNAiCgM1以不同的剂量转染鸡胚成纤维（CEF）细胞，确定最佳转染质粒量，试验结果表明1μg转染剂量转染效果最佳。以1μg剂量将3种重组干扰质粒分别转染CEF细胞，24h后感染RB1B株MDV，72h后用空斑计数MDV在CEF细胞上增殖数量，以此判定miRNA干扰效果，结果显示，重组干扰质粒中质粒pRFPRNAiCgM2干扰效果较好，能有效抑制MDV在CEF上的生长繁殖。     

马立克氏病病毒Meq基因缺失株的保护性免疫作用

马立克氏病病毒(MDV)的致病性一直在不断增强中,甚至已出现了能抵抗CV1988/Rispens疫苗的特超强株。本实验室用BAC克隆技术构建了MDV中国野毒株的Meq基因缺失株,显示出在抗马立克氏病方面具有与美国Meq基因缺失株同样有效的保护性免疫效果,而且其自身没有明显的免疫抑制作用。对美国和中国的两个MDV的Meg基因缺失株的优缺点做了比较。