实验感染肝片吸虫山羊的病理生理学Ⅰ．血液生理生化指标及抗体动态

给山羊分别实验感染肝片吸虫囊蚴200、500个／只，感染后每周颈静脉采血1次，测定血液生理生化指标和抗体动态的变化。结果表明，山羊实验感染肝片吸虫后，血液中RBC、Hb明显下降；WBC和嗜酸性粒细胞数显著增加；血清中谷－草转氨酶（AST）从第2周开始上升，第8周和第9周达到峰值；γ-谷氨酰转肽酶（GGT）于感染后第7周和第8周开始升高，第10周和第11周达高峰；以ELISA检测抗体表明，2个试验组山羊感染后血清中IgG分别在第9周和第6周达峰值，随后均稍有下降，一直呈波动趋势，但在整个试验期内，一直高于对照组（P＜0．05或P＜0．01）。分析认为，山羊感染肝片吸虫后表现的贫血是正细胞正色素型，伴有低白蛋白性，肝脏损伤明显，体液免疫反应增强。     

一氧化氮在山羊感染肝片吸虫过程中的作用

山羊人工感染肝片吸虫后,用硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(NO)含量,感染组山羊(n=5)在羊感染后第1周明显低于对照组山羊(n=4),第2～6周或高或低呈波动趋势,自第6周后明显高于对照组,其中第7～8周达高峰(93.73±17.233μmol/L),第7周P＜0.01,第8、10周P＜0.05;用间接ELISA最早在感染后第2周就可检出IgG抗体,并从第4周起保持高水平,第8～9周达最高峰.血清中NO含量与IgG水平的相关系数r=0.511(P＜0.05,差异显著),而对照组的NO与IgG的相关系数r=0.25(差异不显著);感染山羊在整个试验期间嗜酸性粒细胞(EOS)明显升高,差异明显,其中第8周达峰值(P＜0.01).本试验结果表明NO、IgG和EOS在山羊感染肝片吸虫过程中的变化趋势基本一致,呈正相关,且与虫体在宿主体内的移行、发育密切关联,显示NO、IgG和EOS共同参与宿主抗肝片吸虫感染的作用.     

一氧化氮（NO）在山羊感染肝片吸虫过程中作用

8～12月龄雄性山羊(n=5)人工感染肝片吸虫后,每周定时颈静脉采血1次,用硝酸还原酶法检测血清中一氧化氮(NO)的动态变化,并观察了NO与IgG抗体、嗜酸性粒细胞(EOS)之间的相关性.结果,山羊在感染后第1周,NO含量明显低于对照组,第2～6周或高或低呈波动趋势,自第6周后明显高于对照组,其中第7～8周达高峰,即(93.73±17.233)μmol/L,第7周与对照组相比P<0.01,第8、10周P<0.05;IgG抗体用间接ELISA最早在感染后第2周就可检出,并从第4周起保持高水平,第8～9周达到最高峰,血清中NO含量与IgG水平的相关系数为r＝0.511(P<0.05),而对照组的NO与IgG相关系数为r＝0.25(P>0.05);感染山羊在整个试验期间的EOS明显升高,其中第8周达峰值(P<0.01).本试验结果表明,NO、IgG和EOS在山羊感染肝片吸虫过程中的变化趋势基本一致并呈正相关,且与虫体在宿主体内的移行、发育密切关联,显示NO、IgG和EOS共同参与宿主抗肝片吸虫感染的作用.     

应用肝片吸虫ES抗原检测实验感染山羊IgG的动态水平

用肝片吸虫排泄分泌抗原 ( ESA g)的酶联免疫吸附试验 ( ELISA)检测人工感染肝片吸虫的山羊血清中特异性 Ig G抗体动态变化。ESAg用量为 13.8μg/孔 ,抗体稀释 10 0 0倍 ,二抗 1∶ 2 0 0 0稀释 ( 3.5μg/孔 ) ,HRP标记的葡萄球菌 A蛋白 ( SPA* )工作浓度为 1∶ 4 0。检测结果表明 ,2组实验山羊 (第 1组每只羊口服2 0 0个囊蚴 ,第 2组每只羊口服 50 0个囊蚴 )在感染后第 3周血清中的特异 Ig G即开始升高 ,呈现动态变化趋势 ;第 2组于第 6周 ( 42 d) Ig G水平升到高峰 ,随后稍有下降 ,第 1组于第 9周 ( 6 3d) Ig G水平升到最高峰 ,随后又稍有下降 ,一直呈波动趋势 ;在试验的 3～ 17周期间 ,总体上虽第 2组抗体水平比第 1组高 ,统计分析无显著差异 ( P >0 .0 5) ,但均比对照组保持较高的水平 ,有显著差异 ( P <0 .0 5或 P <0 .0 1) ,表明山羊在肝片吸虫入侵后 ,很快产生了高水平的体液免疫 ,而 Ig G的波动可能与虫体的移行有关 ,与虫卵数量则无关。     

肝片吸虫感染对山羊机体自由基代谢影响的研究

实验选择9只健康、6－10月龄雄性白山羊，经粪便学检查和Dot-ELISA检测，确认无肝片吸虫感染，随机分成感染组（n=5)和对照组（n=4)，试验组每只1次口服接种150个肝片吸虫囊蚴，每周定时从颈静脉采集感染前（0周）和感染后15周血液1次分离血清。测定血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（CAT）活性、丙二醛（MDA）和一氧化氮含量的变化，结果表明肝片吸虫感染后血清中GSH－Px活性除第8周试验组显著高于对照组，其他各周无显著差异；在整个实验期间，试验组山羊血清中SOD活性在1－5周呈波动状，以后两组基本处于同一水平；试验组山羊血清CAT活性在感染后第3周显著低于对照组，第6－15周时，试验组始终高于对照组，但各周差异均不显著；试验组山羊血清中MDA含量在整个实验期间始终呈波动状，而在第8、9周试验组显著高于对照组，中周与对照组相比无显著差异；感染后试验组血清中NO开始下降，并且显著低于对照组，至第3－6周时试验组显著高于或低于对照组，第6－15周，试验组一直高于对照组，并在第7、10周时显著地高于对照组。提示山羊感染肝片吸虫后，机体发生多种功能的改变，机体的自由基产生与清除处于相互对抗之中，机体的自由基代谢参与了肝片吸虫病的发展过程。     

实验感染肝片吸虫山羊的病理生理学——Ⅲ.细胞因子水平的变化

试验选择6只健康白山羊（经粪便学检查和Dot-ELISA检测，确认无肝片吸虫感染）随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组，其中Ⅰ、Ⅱ组山羊每只分别1次口服接种200、500个肝片吸虫囊蚴，Ⅲ组作为不感染对照组，每周颈静脉采血1次，连续11周，检测肝片吸虫感染后山羊血清中IL-2、TNF-α水平的变化和外周血淋巴细胞分泌IL-2的能力。结果表明，山羊试验感染肝片吸虫后，Ⅰ组山羊血清IL-2水平在感染后有所下降，而Ⅱ组山羊血清IL-2水平在感染后有所升高；感染不同剂量肝片吸虫的山羊血清TNF-α水平和淋巴细胞IL-2分泌水平均有不同程度的升高，在感染后第1周淋巴细胞就有反应，并且对非特异性刺激原和特异性刺激原的应答都有显著升高。这一结果提示，TNF-α可能参与肝片吸虫对肝的损伤过程，肝片吸虫感染剂量对宿主的IL-2含量影响较大，同时IL-2在宿主防御免疫中有重要作用。     

实验感染肝片吸虫山羊的病理生理学Ⅱ.血清NO和花生四烯酸代谢物的变化

选择 9只 6～ 10月龄健康雄性白山羊 ,经粪便检查和 Dot- EL ISA检测 ,确认无肝片吸虫感染 ,随机分成感染组(n=5 )和对照组 (n=4 ) ,试验组每只一次性口服接种 15 0个肝片吸虫囊蚴 ,感染前 (0周 )至感染后 2 3周每周从颈静脉采集血液 1次 ,分离血清 ,测定一氧化氮含量和花生四烯酸代谢物 6 -酮 -前列腺素 F1α(6 - keto- PGF1α)和血栓素 B2(TXB2 )的变化。结果表明 ,肝片吸虫感染后第 6～ 2 1周试验组血清中的 NO一直高于对照组 ,并在第 7、10周时显著地高于对照组 ;血浆中 TXB2 水平变化较为明显 ,在 1～ 3周与对照组相比无显著差异 ,从第 5周开始到试验结束 ,试验组血浆中 TXB2 水平均显著或极显著地高于对照组 ;在整个试验期间 ,血浆中 6 - keto- PGF1α水平变化不显著。这一结果提示 ,NO及花生四烯酸代谢物可能参与山羊肝片吸虫病的发生发展过程。     

实验感染肝片吸虫山羊和大鼠血清花生四烯酸代谢物的变化研究

实验一选择9只健康、6-10月龄雄性白山羊，经粪便学检查和Dot-ELISA检测，确认无肝片吸虫感染，随机分成感染组（n=5)和对照组（n=4)，试验组每只一次口服接种150个肝片吸虫囊蚴，每周定时从颈静脉采集感染前（0周）和感染后23周山羊血液一次，分离血浆，实验二将60只大鼠随机分成感染组（n=30)和对照组（n=30)，感染组大鼠一次口服25个囊蚴，对照组不感染，于感染前（0周）和感染后（1，3，5，7，9周）采集血样，分别测定试验组和对照组羊和鼠花生四烯酸代谢物6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）和血栓素B2（TXB2）的变化。结果表明肝片吸虫感染后，山羊血浆中TXB2水平变化，在1-3周与对照组相比无显著差异，从第5周开始到实验结束，试验组血浆中TXB2水平均显著或极显著地高于对照组，大鼠血栓素水平在感染后前5周逐步下降，以后急剧上升，至实验结束时显著高于对照组；而整个实验期间，两种动物血浆中6-keto-PGF1α水平变化不显著，提示肝片吸虫感染后，机体发生多种功能的改变，花生四烯酸代谢物参与了肝片吸虫病的发展过程。     

山羊感染肝片吸虫后血浆肿瘤坏死因子-α和花生四烯酸代谢物动态变化初探

选用 6只健康雄性山羊 ,经粪便检查和 Dot- ELISA检测确认为无肝片吸虫感染。随机分成感染 组、感染 组和对照组 ( 组 ) ,每组 2只。 、 组山羊分别一次口服接种 2 0 0和 50 0个囊蚴 ,实验连续 1 7周。每周定时由颈静脉采血样 ,测定血浆肿瘤坏死因子 - α(TNF- α)和花生四烯酸代谢物水平动态变化及相互关系。结果表明 :山羊从感染后第 5周开始 TNF- α和 PGE2 逐渐上升 ,高于或极明显高于对照组直至 1 7周。山羊感染后第 3周 组 TXB2 明显高于对照组 ,以后呈波动性上升趋势直至第 1 7周的最大值 ,感染 组没有类似 组的表现 ,与对照组相近。在整个实验期里 ,感染组山羊血浆 6- keto- PGF1α水平低于对照组 ,但差异不显著。检验感染组的 TNF-α与几种花生四烯酸代谢物水平间的相关性发现 :感染 和 组的 TNF- α均与 PGE2 呈显著正相关。提示山羊急性感染肝片吸虫后 ,体内 TNF- α和一些花生四烯酸代谢物明显参与了山羊肝片吸虫病的发生发展过程 ,表现出山羊对肝片吸虫感染的耐受力和抵抗力较弱的特点     

Closantel缓释剂驱除山羊实验感染肝片吸虫的效果

选用 5只实验感染肝片吸虫山羊进行 Closantel(氯氰碘柳胺 )缓释剂驱虫试验。试验用山羊每只一次性口服肝片吸虫囊蚴 15 0个 ,感染后第 15周随机将山羊分成对照组 (n=2 )和驱虫组 (n=3) ,驱虫组每只羊口服 2丸 Closantel缓释剂 (含 15 .5 % Closantel,每丸 7.6 g) ,每周定时采集颈静脉血和进行粪便检查 ,每月称重 ,试验结束时剖检测量肝重和计数肝内虫体数 ,以驱虫前后山羊的红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞、血清抗体和一氧化氮的变化、体重变化、剖检时肝重 /体重之比、虫卵的变化以及虫体减少率作为衡量驱虫效果的指标。结果表明 ,投药后嗜酸性粒细胞在第 1、2、3周与对照组相比有显著下降 ,其他各项指标与对照组相比虽有一定差异但不显著。虫体减少率为 4 1.2 2 %。提示Closantel缓释剂对驱除实验感染肝片吸虫有一定效果 ,在虫体感染前投药会起到预防作用。     

Closantel缓释剂对实验感染肝片吸虫山羊机体自由基影响的研究

选用5只实验感染肝片吸虫山羊研究Closantel缓释剂对机体抗氧化功能的影响，实验用山羊每只一次性口服肝片吸虫囊蚴150个，感染后第15周随机将山羊分成对照组（n=2）和驱虫组（n=3），驱虫组每羊口服两颗Closantel缓释剂，每周定时采集颈静脉血液，检测血清抗氧化酶的变化，观察服用Closantel缓释剂对其的影响。结果表明投药后山羊血清中GSH－Px、CAT均有不同程度的升高，SOD变化不显著，而脂质过氧化产物MDA含量则下降，提示Closantel的缓释剂型对实验感染肝片吸虫山羊机体的抗氧化产生了影响，对机体有一定保护作用。     

急性感染肝片吸虫水牛的某些免疫反应研究

本实验选用12头体重为300－500kg，年龄2－3岁的雄性去势水牛，经粪便检查和Dot-ELISA检测确认为无肝片吸虫感染后，随机分为感染组（n=9）和对照组（n=3）。感染组每头水牛1次性经口感染1600个肝片吸虫囊蚴。实验期间由专人饲养，自由采食青干草和饮水。每周定时颈静脉采血，测定外周血淋巴细胞增殖反应、白细胞介素－2（IL－2）水平、T和B淋巴细胞比例、IgG水平以及血清蛋白总量和比例。结果表明：感染组水牛的T淋巴细胞刺激指数在感染后2－8周高于对照组，但刺激指数和IL－2与对照组均无显著性差异。感染组水牛的外周血T淋巴细胞比例从感染后第1周显著下降，以后一直在低于对照组水平波动，而淋巴细胞从感染后第1周开始显著升高，且一直在高于对照组范围内波动。感染组水牛的α-球蛋白、β－球蛋白与对照组相比均无显著性差异，而白蛋白从第5周开始显著下降，以后维持在低于对照组的水平范围波动；γ－球蛋白从第5周显著高于对照组，以后于对照组范围波动。感染组水牛的抗ES抗原（分泌－排泄抗原）的IgG抗体水平从第2周升高，并持续至实验结束。结果提示：体液免疫应答反应是水牛抗肝片吸虫感染的重要机制。     

实验肝片吸虫感染对大鼠机体自由基代谢影响的研究

通过大鼠感染肝片吸虫复制感染模型 ,研究肝片吸虫感染后血清抗氧化功能的变化。 60只大鼠随机分成感染组和对照组 ,每组 30只。感染组大鼠一次口服 2 5个囊蚴 ,对照组不感染。于感染前 (0周 )和感染后 (1 ,3,5,7,9周 )采集血样 ,检测感染后谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化物酶 (CAT)活性和丙二醛 (MDA)含量的变化。结果表明大鼠感染肝片吸虫后 ,感染组血清中GSH Px先升高后下降 ,SOD活性无明显变化 ,CAT活性在感染后下降 ,MDA含量在前 5周变化不明显 ;说明自由基参与了肝片吸虫病的发病过程     

应用肝片吸虫ES抗原检测实验感染山羊IgG的动态水平

用肝片吸虫排泄分泌抗原（ＥＳＡg）的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测人工感染肝 吸虫的山羊血清中特异性ＩgＧ抗体动态变化。ＥＳＡg用量为１３．８ug/孔，抗体稀释１ ０００倍，二抗１：２０００稀释（３．５ug/孔），ＨＲＰ标记的葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ＊）工作浓度为１：４０。检测结果表明，２组实验山羊（第１组每只羊口服２００ 个 囊蚴，第２组每只羊口服５００个囊蚴）在感染后第３周血清中的持异ＩgＧ即开始升高最     

感染两种蠕虫病的山羊血液生理生化指标比较

[目的]了解山羊自然感染肝片吸虫及自然感染捻转血矛线虫后血液生理生化指标的差异性.[方法]分别对10只自然感染肝片吸虫山羊、10只自然感染捻转血矛线虫山羊以及10只粪检蠕虫卵阴性的健康对照组山羊进行血液生理生化指标测定.[结果]2个试验组与健康对照组相比,白细胞总数(WBC)、粒细胞数(GRAN)、尿酸(UA)的指标均明显增高,差异极显著(P<0.01);白蛋白(ALB)、红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HCT)的指标降低,差异显著(P<0.05).肝片吸虫感染组的谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰胺氨基转移酶(GGT)、总胆红素(TBIL)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)等指标均明显高于捻转血矛线虫感染组,差异极显著(P<0.01);捻转血矛线虫感染组的红细胞总数和血红蛋白等指标低于肝片吸虫感染组,两组间差异显著(P<0.05).[结论]自然感染不同寄生蠕虫对山羊血液生理生化指标影响程度存在一些异同点,通过对比山羊肝片吸虫病和捻转血矛线虫病的血液生理生化指标,可为这两种寄生蠕虫病的间接诊断积累一些参考数据.     

实验感染肝片吸虫山羊血液T、B淋巴细胞比例及激素水平变化

为了深入了解动物感染肝片吸虫后免疫细胞和内分泌活动的变化，将6只健康山羊均分为感染Ⅰ、Ⅱ组及对照组。Ⅰ、Ⅱ组分别一次性口服感染肝片吸虫囊蚴200、500个／只，试验期17周，每周定时采血，测定血浆T、B淋巴细胞比例、皮质醇、胰岛素、甲状腺激素（T3、T4）等。结果表明，Ⅰ、Ⅱ组山羊T淋巴细胞（％）分别从感染后4、6周开始低于或显著低于对照组，直至17周；而淋巴细胞（％）变化与之相反。Ⅰ、Ⅱ组山羊血浆皮质醇变化较大，总体水平高于对照组；T3、T4水平从第4周开始逐渐低于对照组，且在极低的水平上变动；Ⅰ、Ⅱ组胰岛素水平与对照组相近。揭示山羊急性感染肝片吸虫后，内分泌活动紊乱，体内细胞免疫反应抑制，而体液免疫反应增加，表现出山羊对肝片吸虫感染的耐受力和抵抗力较弱的特点。     

山羊、水牛感染肝片吸虫后淋巴细胞自然杀伤活性动态变化

自然杀伤 (NK)活性是在细胞水平反映机体天然免疫力的重要指标之一。本实验以SP2 / 0细胞为靶细胞 (即效应细胞 ) ,采用乳酸脱氢酶(LDH)短程释放法测定人工感染肝片吸虫的水牛和山羊的外周血液中淋巴细胞的NK活性动态变化。从测定结果的相对值来看 ,发现山羊在感染肝片吸虫后NK活性有 2次高峰 ,推测与虫体的发育或感染山羊的免疫状态有关 ;2个感染组 (Ⅰ ,2 0 0个囊蚴 /只 ;Ⅱ ,50 0个囊蚴 /只 )的变化趋势表明 ,感染量与NK活性无相关关系。感染水牛的NK值仅略高于对照组 ,无明显的高峰。而绝对值结果又反映出不同动物的NK活性有差异 ,水牛的NK活性比山羊高 ,说明水牛对肝片吸虫的天然免疫力比山羊强     

多头绦虫抗原特性的研究——绵羊免疫后及感染后的抗体消长规律

用多头绦虫原头节，囊壁，囊液层析纯化抗原及原头节排泄分泌（ＥＳ）抗原对绵羊免疫及攻击感染多头涤虫虫卵后的血清进行ＥＬＩＳＡ检测，观察了血清抗体的消长规律，结果表明，绵羊在感染虫卵后第１周即可检测出血清抗体，感染后３～５周抗体效价达峰值，一直持续到试验结束，免疫组绵羊在免疫３次后，血清抗体效价迅速升高，第３次免疫后１～２周达到峰值，且抗体水平明显高于虫卵感染组，在攻击虫卵后抗体效价开始下降，但直到试     

大片吸虫感染水牛对宿主增重影响的初步研究

试验初步研究大片吸虫感染水牛对宿主增重影响。 1 0头 1 0 -1 2月龄本地与摩拉或尼里杂交一代水牛分为A、B两组 ,A组 5头作对照 ,B组5头每头经口感染 2 5 0个大片吸虫囊蚴。感染前和感染后每月称重一次。从感染后第 1 0 -1 9周检查大片吸虫虫卵。结果表明 ,水牛感染大片吸虫后第 1 4周检出虫卵。对照组水牛从感染后第0 -4个月的平均增重分别为 0 0 ,2 2 6,40 6,5 1 8和 72 6;感染组水牛的同期增重为 0 0 ,1 4 6,2 7 0 ,3 5 2和 5 2 6千克 ;感染组的增重从感染后第 2个月开始至感染后第 4个月 ,两组的增重有显著性差异 (P 0 0 5 )。     

大鼠感染肝片吸虫后某些免疫介质变化的研究

３０只成年大鼠随机分成感染组和对照组，感染组每只习一次口服２５个肝片吸虫囊蚴。通过整体和肝脏离体灌流的方法研究大鼠在感染肝片吸虫后机体免疫功能的变化以及一些免疫介质在抗肝片吸虫和诱导肝损伤中的作用。结果发现，大鼠抗肝片吸虫ＥＳ抗原特异抗体（ＩgＧ）从感染后第２周开始显著升高，第８周回落到与对照组相当水平。感染组大鼠血浆 和肝组织匀浆中ＮＯ水平虽高于对照组，但差异不显著（P〈０．０５），而离体肝脏灌流