不同生态型的11个柳枝稷品种组织培养反应评价

以美国从南到北11个不同生态型柳枝稷（Panicum virgatum L.）品种的成熟种子为外植体,进行愈伤组织诱导和分化,对其愈伤组织各种形态及比例进行统计分析,以评价不同生态型柳枝稷的组织培养反应。结果表明：低地型品种Alamo和Performer的种子发芽率和愈伤诱导率均较低,但组织培养中结构松脆、生长旺盛、色泽鲜亮、增殖较快、容易分化成苗的Ⅱ型愈伤组织比例高,容易再生成苗;虽然高地型品种Dacotach,Blackwell和Nebraska28等的愈伤诱导率和种子发芽率较高,但较难挑选出Ⅱ型愈伤组织,不易获得组培再生苗。本研究结果为柳枝稷的遗传改良和生物技术育种奠定基础。     

枫杨砧木与核桃嫁接接合部愈合过程的解剖学研究

[目的]揭示核桃/枫杨嫁接组合嫁接愈合过程组织细胞学特征。[方法]以2年生湖南本地枫杨实生苗为砧木,以“中核短枝”核桃品种的1年生枝条为接穗,采用改良的方块芽接技术嫁接,取其嫁接接合部位组织,运用解剖学方法,通过光学显微镜及透射电镜进行嫁接愈合过程的组织细胞学观察。[结果]通过嫁接口愈合过程的显微结构解剖学观察,发现其愈合过程经过了隔离层形成期、愈伤组织形成期、形成层环形成期、维管组织分化形成期四个时期；通过超微结构观察发现,嫁接初期出现嫁接切口面附近细胞线粒体、淀粉粒数量增加,出现转运物质的壁旁体、多泡体等,细胞质呈现油滴现象等系列愈伤反应。[结论]嫁接后的前20d左右形成愈伤组织桥、形成层环、维管束桥,是嫁接成活的关键时期。形成层不是产生愈伤组织的唯一来源,皮层也可形成愈伤组织。嫁接初期隔离层两边的细胞会出现细胞器变化,内膜系统重组,物质转移等系列愈伤反应。     

不同诱变处理对芒多倍体诱导效果的研究

以芒（Miscanthus sinensis）种子为外植体诱导出愈伤组织,对愈伤进行处理,探讨秋水仙素、诺考达唑、安磺灵3种不同诱变剂在相应条件下对芒多倍体诱导的作用效果。通过流式细胞仪进行DNA含量测定、染色体制片技术进行染色体数目鉴定和比较四倍体与二倍体叶片中气孔保卫细胞大小和密度等手段检测再生植株的倍性。结果表明：在对芒的愈伤进行处理时,最佳组合为安磺灵浓度10 μmol·L^-1,温度5℃,1.02 mmol·L^-1的Ca²⁺浓度,处理15 min,其诱导率为35.19%。诱变剂对材料的毒害作用表现为秋水仙素毒害作用最大;诺考达唑和安磺灵对材料的毒害作用次之,且二者无显著差别。     

黑麦草愈伤组织诱导影响因素研究

研究了品种、培养基、激素和碳源等不同因素对黑麦草愈伤组织诱导效果的影响。实验表明：品种“沃土”的愈伤组织诱导率与其余4个供试品种的差异极显著;B5的愈伤组织诱导率与其余4个供试培养基的差异极显著;激素中2,4-D、NAA、IBA三者比较,以2,4-D效果最好,NAA次之,IBA最差;碳源对愈伤组织诱导影响不明显,以2％蔗糖组的效果略好,诱导率为58．5％。     

紫花苜蓿花药愈伤组织和幼苗诱导技术的研究

在不同时期、不同花药低温预处理时间及热激处理、不同培养基、不同激素浓度组合、不同培养条件下对苜蓿花药进行了培养,结果表明：9月份较7月、8月份选取的花药愈伤组织诱导率高;花药低温预处理24～48h较72h处理对愈伤组织诱导的效果好,低温预处理与热激处理相结合比单用低温预处理其花药愈伤组织诱导率高;NB培养基对愈伤组织的诱导效果比B5培养基好,2,4-D浓度0.5～2.0mg/L、NAA浓度0.1～1.0mg/L、6-BA浓度0.5～1.0mg/L、KT浓度1.0～3.0mg/L都能诱导出愈伤组织,其最佳的浓度组合为NB＋2,4-D 0.5mg/L＋NAA 0.2mg/L＋ 6-BA 0.5 mg/L＋KT 3mg/L;暗培养结合光照培养较直接光照培养愈伤组织诱导率低,但绿苗率较高.     

不同苜蓿品种再生体系的差异性比较

以陇东野生紫花苜蓿、阿尔冈金、甘农1号、游客4个苜蓿品种的下胚轴为外植体,比较不同苜蓿品种外植体愈伤组织诱导、分化及再生能力的差异,研究不同激素浓度及配比对再生体系建立的影响。结果表明,4个苜蓿品种下胚轴诱导率依次为阿尔冈金甘农1号陇东野生紫花苜蓿游客;在愈伤组织诱导培养基MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA上诱导率最高;MS+0.5 mg/L KT+0.3 mg/L NAA为最佳分化培养基,分化率在84.5%~93.5%;适宜的生根培养基为1/2 MS+0.1 mg/L NAA,附加1%蔗糖,各品种再生植株的移栽成活率为100%。     

小麦成熟胚离体培养及植株再生技术优化

本实验利用冬小麦品种周麦27成熟胚进行了愈伤组织诱导和植株再生技术的优化,以提高小麦成熟胚离体再生频率,为以成熟胚进行遗传转化奠定基础。探讨了外植体不同接种方法、Dicamba浓度和细胞分裂素种类、转分化时间和愈伤组织干燥处理等因素对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明, 1)小麦成熟胚十字形切割法接种愈伤组织分化率较高,达到66.7%,分别是刮胚法和整胚接种的2.1和4.3倍;2)附加2,4-D 和Dicamba均可以高频率诱导成熟胚愈伤组织的形成,但Dicamba诱导形成的愈伤组织分化率高于2,4-D的达4倍之多,在Dicamba浓度为2.0~4.0 mg/L时愈伤组织诱导和分化效果较好;3)愈伤组织在附加2.0 mg/L 6-BA的分化培养基上分化率最高为45.8%,其次为在不含激素或含KT 2.0 mg/L时分化率分别达到38.5%和37.0%,而在附加TDZ和ZT时分化率较低;4)成熟胚外植体在诱导培养2~3周后进行分化培养,绿苗分化率最高;5)愈伤组织分化前干燥处理6 h愈伤组织分化率略有提高,但与未干燥处理的相比差异不显著,而干燥12 h后分化率却明显降低。     

新疆野生黄花苜蓿愈伤诱导及分化的研究

以新疆野生黄花苜蓿(Medicago falcata L.)为材料,通过愈伤组织诱导及分化途径获得再生植株;从种子硬实、外植体、激素(2,4-D和KT)、培养基方面探讨野生黄花苜蓿组织培养的影响因素。结果表明:4℃低温处理与浓硫酸浸种结合是破除黄花苜蓿硬实的较优方法,发芽率达90%;下胚轴为诱导愈伤组织的最佳外植体;MS培养基比改良的SH培养基对愈伤组织的诱导更有效,MS诱导培养基为MS+2,4-D 0.5 mg·L^-1+KT 0.8 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂粉7 g·L^-1,出愈率达到80%;浅绿色和浅黄色的愈伤组织在MS+2,4-D 0.2 mg·L^-1+KT 0.4 mg·L^-1+CH 1 g·L^-1+蔗糖20 g·L^-1+琼脂粉7 g·L^-1的培养基上分化较好,分化率为30%。研究结果将为黄花苜蓿生物技术育种奠定一定的基础。     

几种因素对日本结缕草愈伤组织诱导与生长影响的研究

研究了基本培养基、碳源、营养添加物、pH值、固化剂等几种因素对日本结缕草‘Qingdao’和‘Zenith’两个品种成熟种子为外植体诱导愈伤组织的影响。结果表明:蔗糖作为碳源、pH值5.4～6.0、以植物凝胶或脱乙酰吉兰糖作为固化剂有利于日本结缕草愈伤的诱导与生长,NMB培养基、NB培养基分别有利于Zenith及Qingdao胚性愈伤的形成;而营养添加物的加入虽可提高愈伤诱导率,却导致胚性愈伤率的下降。同时,根据愈伤组织生长曲线得出,愈伤组织最适继代周期为24～33天。     

桑树子叶愈伤组织的诱导培养

本实验以沙2×伦109一代杂交桑种的子叶为材料,在无菌环境下,采用MS培养基,添加各种不同浓度的生长素和细胞分裂素,对上述材料进行组织培养,诱导子叶产生愈伤组织。通过四种不同浓度的激素比例对照培养,发现第四种设计(2,4—D2mg/LNAA1mg/L6—BA1mg/L)效果最好,愈伤组织形成率最高,达87.5％。本实验旨在找到一种更简捷有效的培养愈伤组织的方法和最佳的激素比例,使愈伤组织培养更容易、成活率更高、质地更好,为桑树原生质体研究提供更多的材料。     

新农1号狗牙根愈伤组织诱导及再生研究

以新农1号狗牙根(Cynodon dactylon (L.) Pers.‘Xinnong No.1')成熟颖果为外植体,研究不同激素浓度组合对愈伤组织诱导、继代及分化的影响.结果表明:在愈伤组织诱导中,适宜的培养基为添加2.00 mg·L-12,4-D+0.01 mg· L-1 6-BA+500 mg·L-1脯氨酸的MS培养基,出愈率可达71.2％,愈伤形态为半透明水渍状且淡黄色颗粒较多;继代改造培养基中添加2,4-D 0.5 mg·L-1 +6-BA 0.5 mg·L-1+ABA 2.0 mg·L-1+ GSH 2.0 mg·L-1的MS培养基上培养4周后,愈伤组织增殖率可达41.3％;分化过程中,在不添加任何激素的1/2MS培养基中培养10 d后,将胚性愈伤组织转入添加6-BA 1.0 mg·L-1的MS培养基中,很快绿点变密,继而分化成苗,愈伤组织再生频率达25％,小植株形成的强度为16.7％.     

扁蓿豆愈伤组织诱导和分化条件的研究

以扁蓿豆3个品系的下胚轴和子叶为外植体,研究不同培养基、不同激素种类和配比对愈伤组织诱导的影响,以及不同分化培养基对愈伤组织分化的影响.结果表明:下胚轴的愈伤组织诱导率普遍高于子叶;品系B1、B2最佳愈伤组织诱导培养基为MS+0.5mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA,品系B3最佳愈伤组织诱导培养基为MS+0.5mg/L 2,4-D+0.7mg/L 6-BA;适宜分化的培养基均为MS+1mg/L KT+1mg/L 6-BA.     

匍匐翦股颖愈伤组织诱导及其分化的研究

以匍匐翦股颖Penn A-1和L-93的成熟种子为外植体,进行了愈伤组织诱导与分化的研究。结果表明:不同浓度2,4-D对Penn A-1和L-93愈伤组织进行诱导,L-93的诱导率都高于Penn A-1。当以2,4-D和6-BA不同浓度配比对愈伤组织进行诱导时,以MS+2 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA为Penn A-1和L-93最适的愈伤诱导培养基,诱导率较高;MSO培养基为适宜的分化培养基,分化率达90.9%;MSO+0.2 mg/L IBA为最佳生根培养基。     

噻二唑苯基脲对桑树愈伤组织诱导的影响

以2个主栽桑树品种为材料,探讨了噻二唑苯基脲(TDZ)等植物生长调节剂对桑树愈伤组织诱导的影响。结果表明,TDZ能够显著促进桑树愈伤组织的产生和生长。叶柄、幼茎愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.5mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA;子叶愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA。     

几种因素对日本结缕草愈伤组织诱导与生长影响的研究

研究了基本培养基、碳源、营养添加物、pH值、固化剂等几种因素对日本结缕草‘Qingdao'和‘Zenith'两个品种成熟种子为外植体诱导愈伤组织的影响.结果表明蔗糖作为碳源、pH值5.4～6.0、以植物凝胶或脱乙酰吉兰糖作为固化剂有利于日本结缕草愈伤的诱导与生长,NMB培养基、NB培养基分别有利于Zenith及Qingdao胚性愈伤的形成;而营养添加物的加入虽可提高愈伤诱导率,却导致胚性愈伤率的下降.同时,根据愈伤组织生长曲线得出,愈伤组织最适继代周期为24～33天.     

不同浓度6-BA对黑麦草种子出愈率的影响

研究了不同浓度6-BA对多年生黑麦草4个品种夜影、蒙特利Ⅲ、高帽和德比极品的种子愈伤组织诱导率的影响。结果表明,在一定的浓度范围内,6-BA能够提高多年生黑麦草愈伤组织的出愈率,但随着浓度的增加反而会降低黑麦草愈伤组织的出愈率。夜影品种愈伤组织诱导的浓度为0.1、0.3mg/L;诱导德比极品品种愈伤组织的浓度为0.2、0.3mg/L都适宜;诱导蒙特利Ⅲ品种成熟种子愈伤组织的浓度以0.1mg/L为佳;高帽品种成熟种子诱导愈伤组织的浓度为0.1、0.2mg/L。     

激素对高羊茅愈伤组织诱导及其分化的影响

用不同种类培养基及不同浓度2,4-D、BA对高羊茅种子进行愈伤诱导,结果表明培养基种类对愈伤诱导无明显效果;MS培养基下不同浓度2,4-D对高羊茅愈伤诱导时间及出愈率差别很大,以9mg/l效果最佳,愈伤诱导率达66.7%左右;过高浓度的2,4-D、BA对萌芽和愈伤的形成均有负作用;愈伤组织分化以MS+BA2.0mg/l+NAA0.5mg/l为佳.     

白羊草真叶愈伤组织诱导和植株再生

以7日龄白羊草(Bothriochloa ischaemum(L.)Keng)真叶作为外植体,进行愈伤组织诱导和植株再生研究,筛选较合适的激素组合,以建立白羊草再生体系。结果表明:在愈伤诱导阶段KT的作用明显,其与2,4-D的交互作用优于ABA与2,4-D,也高于单独使用2,4-D,在2,4-D1.0 mg/L+KT0.5 mg/L时诱导率最大,达到93.45%;分化阶段6-BA0.1 mg/L与NAA 0.04-0.06 mg/L的激素组合中分化率差异不明显。     

紫花苜蓿花药愈伤组织和幼苗诱导技术的研究

在不同时期、不同花药低温预处理时间及热激处理、不同培养基、不同激素浓度组合、不同培养条件下对苜蓿花药进行了培养,结果表明:9月份较7月、8月份选取的花药愈伤组织诱导率高;花药低温预处理24~48h较72h处理对愈伤组织诱导的效果好,低温预处理与热激处理相结合比单用低温预处理其花药愈伤组织诱导率高;NB培养基对愈伤组织的诱导效果比B5培养基好,2,4-D浓度0.5~2.0mg/L、NAA浓度0.1~1.0mg/L、6-BA浓度0.5~1.0mg/L、KT浓度1.0~3.0mg/L都能诱导出愈伤组织,其最佳的浓度组合为NB 2,4-D 0.5mg/L NAA 0.2mg/L 6-BA 0.5mg/L KT 3mg/L;暗培养结合光照培养较直接光照培养愈伤组织诱导率低,但绿苗率较高。     

多年生黑麦草高频再生体系的建立及优化

从外植体预处理方式、基本培养基、激素浓度等方面着手,对多年生黑麦草愈伤组织诱导、继代、不定芽分化及再生过程中的影响因素进行了研究,提高了再生频率。结果如下：切取胚端半粒种子,经75%乙醇处理1min,0.1%HgCl处理15min,在经无菌水清洗4～6次后接种方式较好;愈伤组织诱导培养基以MS＋2,4—D 8.0 mg/L（或另添加甘露醇25 g/L）为佳;愈伤组织接种于MS＋2,4—D 8.0mg/L＋甘露醇25 g/L上进行1～2次继代后于NB＋6—BA2.0 mg/L上进行分化;不定芽转接至MS＋6—BA2.0 mg/L上进行扩繁或于1/2MS＋NAA0.5mg/L＋IAA0.5mg/L上进行生根。