乳酸菌高密度培养技术研究进展

乳酸菌高密度培养是制备高活性乳酸菌发酵剂的核心技术.影响乳酸菌高密度培养的因素主要有以下几个方面:培养基成分、培养条件、培养模式及培养过程中抑制性代谢产物的调控等.本综述从以上几个方面讨论了乳酸菌的高密度培养技术,并对其前景进行了展望.     

饲用乳酸菌高密度培养的研究进展

高密度培养是提高微生物产量的有效途径和手段。将高密度培养技术应用于饲用乳酸菌的生产,可以大大提高生产率,降低生产成本,并且加速乳酸菌制剂的商品化进程,使其能够更好地满足市场需求,本文就乳酸菌高密度培养的主要影响因素及培养方式进行了综述,为饲用乳酸菌的高密度培养提供参考。     

猪源乳酸菌对致病性大肠杆菌的体外抑制作用

对从健康仔猪肠道分离的12株乳酸菌菌株进行耐酸试验和耐胆盐试验,筛选出4株有效菌株。分别将这4株乳酸菌单独、混合与K88共培养;取4种乳酸菌单独和混合培养的菌液、发酵滤液和菌体用牛津杯做K88抑制试验;分别将培养滤液经过乳酸脱氢酶和碱处理做K88抑制试验。结果表明:4种乳酸菌皆具有抑菌功能,但相互之间有差异;用乳酸脱氢酶或碱处理后抑菌能力明显下降,说明乳酸菌是通过产生有机酸尤其是乳酸对K88进行有效抑制。4种菌混合培养的抑菌能力强于单独培养。     

分泌抗金黄色葡萄球菌细菌素乳酸菌的分离鉴定

为分离和筛选产抗金黄色葡萄球菌乳酸菌素的优势乳酸菌,利用乳酸菌分离培养基MRS从收集的各种腌制菜汁中分离培养乳酸菌,通过细菌培养特性、革兰氏染色特点、生理生化特性初步鉴定,同时根据Genbank中乳酸菌的16SrDNA序列设计特异性引物,采用PCR方法进一步鉴定,并以金黄色葡萄球菌为指示菌对乳酸菌的发酵上清液进行抑菌特性研究。结果表明,从腌渍菜汁中分离获得90株产酸菌,通过形态学、生理生化特性和PCR鉴定,结果73株产酸菌为乳酸杆菌;分泌产物抑菌试验表明,有10株菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性,经酸排除和过氧化氢排除试验,仍然有5株乳酸菌的分泌产物具有抑制金黄色葡萄球菌活性。可见,从腌渍菜汁分离到的乳酸菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性的特性,主要是通过分泌乳酸菌素来发挥作用。     

乳酸菌与大肠杆菌相互作用的研究

本文研究了保加利亚乳杆菌L5和嗜热链球菌G7共培养物对大肠杆菌的抑制作用和大肠杆菌对乳酸菌的影响.结果表明,乳酸菌对大肠杆菌的抑制作用强弱受其活力和大肠杆菌浓度的影响.乳酸菌活力高抑制作用强,大肠杆菌浓度低抑制作用强.同样,大肠杆菌可以影响乳酸菌的产酸、产香、生长、产粘、水解蛋白等能力.     

蝌蚪源乳酸菌的人工高密度培养条件的优化

本文研究了蝌蚪源乳酸菌生长繁殖的环境条件(温度、接种量、起始pH等)和培养基组成(氮源、碳源等),优化确定了蝌蚪源乳酸菌密度培养的适宜培养条件起始pH6.5,培养温度37℃,培养基配比为麦芽糖∶乳糖(1∶1)2%、牛肉浸膏10%、缓冲盐A0.5%,NaCl0.25%,MgSO40.1%,接种量5%,结合优化的培养条件,可使蝌蚪源乳酸菌活菌数得到进一步提高。     

肉牛阴道益生乳酸菌功能性评价

本文旨在从肉牛阴道中分离筛选益生乳酸菌,并对其功能进行评价,为开发微生态制剂治疗生殖道感染疾病奠定基础。采用传统培养方法从肉牛阴道中分离乳酸菌,并对其抑菌能力、抑菌物质、产酸能力和抗生素敏感性进行检测,通过16S r DNA序列分析方法对乳酸菌分离株进行鉴定。结果表明,通过体外试验获得4株乳酸菌,坚强肠球菌Y1抑菌能力最强,乳酸杆菌Y5的产酸能力强于其他菌株,4株乳酸菌均对氨苄西林和万古霉素敏感。研究结果表明,4株乳酸菌可作为潜在的益生菌株治疗母牛生殖道感染疾病。     

玉米青贮饲料乳酸菌检测培养基中放线菌酮添加量的优选

通过在MRS培养基、马丁培养基中添加放线菌酮0、5、10、20、40、80、160、320mg/L和640mg/L的5个试验,研究了玉米青贮饲料乳酸菌检测中放线菌酮在培养基中的适宜添加量。结果表明:添加放线菌酮40mg/L以上时能够极显著(P<0.01)抑制青贮玉米霉菌的生长。因此,确定40mg/L为检测或纯化培养青贮玉米乳酸菌时的适宜添加量;鉴于青贮玉米中乳酸菌是真菌的100倍以上,在乳酸菌培养时通过加大接种液的稀释倍数可达到避免样品真菌污染的目的。     

杂交构树青贮饲料中优良乳酸菌的分离与鉴定

本试验对杂交构树(Broussonetia papyrifera)青贮饲料中附着的优良乳酸菌进行了分离培养,利用传统微生物培养和16S rDNA序列分析对分离的乳酸菌进行鉴定,以期为提高杂交构树青贮品质提供乳酸菌资源.试验最终分离得到8株优良乳酸菌,其中菌株G4,G7,G9被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus...     

高寒草甸魏斯氏乳酸菌的分离鉴定及理化特性研究简

 本试验对青藏高原藏北嵩草附着乳酸菌进行了分离培养，并利用传统培养法和１６ＳｒＲＮＡ序列分析对分离乳酸菌进行了鉴定，以期探讨高寒地区乳酸菌的发酵生物学特性并分离筛选优良发酵乳酸菌。试验共分离得到１７株乳酸菌，其中有６株菌为食窦魏斯氏乳酸菌（Weissella confusa），其余均为融合魏斯氏乳酸菌（Weissella cibaria）。分离出的融合魏斯氏乳酸菌菌株均能在４℃条件下生长，其中有５个菌株能在ｐＨ值为３的培养基中生长，且分离的食窦魏斯氏乳酸菌均能利用半乳糖，１０株融合魏斯氏菌均能够发酵利用阿拉伯糖。体现出高寒地区分离出的融合魏斯氏乳酸菌菌株具有耐低温，耐酸性强和发酵利用碳源广泛的特征。     

微生物青贮添加剂菌种的优化

研究了乳酸菌与酵母菌的菌种特性，确定乳酸菌的最佳培养时间为12h，酵母菌为1～2d；乳酸菌的最适培养温度为30℃，酵母菌为28℃。试验还以秸秆为原料，进行了菌种复配、发酵，测定了产品的粗蛋白和粗纤维变化。确定了菌种的最佳工艺参数；乳酸菌最佳添加量为4％，乳酸菌：酵母菌最佳配比为1：3。     

植物精油产品对饲用微胶囊乳酸菌的影响及对大肠杆菌的抑菌效应研究

研究植物精油类产品动力源和RO对大肠杆菌的抑制活性,以及与饲用微胶囊乳酸菌同时使用时对微胶囊乳酸菌的影响。在相应的培养条件下对微胶囊乳酸菌和大肠杆菌进行培养,测定添加植物精油组和对照组菌量的差异,得出植物精油产品对大肠杆菌的抑制活性和对微胶囊乳酸菌的影响作用。结果表明,在一定添加浓度范围内,植物精油产品可以与微胶囊乳酸菌产品同时使用,而此时植物精油产品具有良好的抑制致病菌的作用。     

响应面法优化乳酸菌产抗真菌物质的培养条件

为提高实验室保存的乳酸菌N22产抗真菌物质的产量, 以毕赤酵母为指示菌, 产生的抑菌圈大小为评价指标, 通过响应面法优化乳酸菌产抗真菌物质的培养条件。对MRS培养基碳源、氮源进行优化, 考查不同温度、初始pH值和发酵时间对乳酸菌产抗真菌物质的影响, 温度、初始pH值和发酵时间是主要影响因素, 最后采用Box-Behnken试验设计和响应面法分析确定乳酸菌最佳培养条件为34.16 ℃、初始pH值为5.33、培养35.44 h, 此时, 最大抑菌圈直径为16.34 mm, 可取率为97.90%。经验证, 最大抑菌圈直径为16.58 mm。该培养条件增加了乳酸菌抗真菌物质的产量。     

青稞秸秆青贮饲料中优良乳酸菌的筛选及鉴定

为筛选出适合于青藏高原青稞秸秆青贮用的优良乳酸菌菌株,研发新型青贮添加剂。分离了青藏高原青稞(Hordeum vulgare)秸秆青贮饲料中的乳酸菌,利用传统微生物培养法和16S rRNA序列分析法对乳酸菌进行鉴定,探讨其生物学特性,并筛选出优良的乳酸菌菌株。共分离获得4株同型发酵乳酸菌菌株,其中HG24,LH2为植物乳杆菌(Lactobacillusp lantarum),LH9为乳酸片球菌(Pediococcusacidi lactici),LH7为戊糖片球菌(Pediococcusp entosaceus)。分离出的乳酸菌菌株均能在5～30℃,pH 3.5～7.0及3.0%和6.5% NaCl培养基中生长良好,其中HG24,LH2在pH值为3的培养基中仍能生长,体现出分离的乳酸菌菌株具有耐低温、耐酸性和耐盐性强的特征。4株乳酸菌菌株中HG24和LH2产酸能力强、生长速率快,最适宜于用作青贮乳酸菌菌种。     

乳酸菌培养物对肉鸡生长性能及免疫功能的影响

试验旨在研究灭活乳酸菌培养物对肉鸡生长性能及免疫功能的影响。选择300只体重相近的健康1日龄AA肉仔鸡,随机分为5组,每组6个重复,每个重复10只鸡,雌、雄各半。其中对照组饲喂基础日粮,抗生素组在基础日粮中添加0.01%金霉素,乳酸菌培养物组分别在基础日粮中添加0.16%乳酸菌培养物L1、L2、L3。试验期42 d,分1~21日龄(前期)和22~42日龄(后期)2个阶段。结果显示,1~21日龄时,乳酸菌培养物L1组肉鸡平均日采食量极显著高于对照组和抗生素组(P<0.01),血清中白介素-2(IL-2)含量显著低于对照组(P<0.05),脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数均显著高于对照组(P<0.05);乳酸菌培养物L2组肉鸡脾脏指数、胸腺指数显著高于对照组(P<0.05);乳酸菌培养物L3组肉鸡平均日增重极显著高于对照组和抗生素组(P<0.01);抗生素组肉鸡血清中γ-干扰素(IFN-γ)含量显著高于乳酸菌培养物组(P<0.05)。22~42日龄时,乳酸菌培养物L1、L2组肉鸡平均日增重极显著高于对照组和抗生素组(P<0.01);乳酸菌培养物L2组肉鸡血清中免疫球蛋白G(IgG)含量显著高于抗生素组(P<0.05),血清新城疫抗体效价及脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数均显著高于对照组(P<0.05);乳酸菌培养物L3组肉鸡血清中免疫球蛋白A(IgA)含量及胸腺指数显著高于对照组(P<0.05)。由此可知,在肉鸡日粮中添加一定量的灭活乳酸菌培养物可在一定程度上提高肉鸡的生长性能、增强其免疫功能,其中,对于提高肉鸡的生长性能,试验前期添加L3效果较好,试验后期添加L1和L2效果较好;对于增强肉鸡的免疫功能,试验前期添加L1效果较好,试验后期添加L2效果较好。     

应用PCR-DGGE技术对发酵全混合日粮中可培养乳酸菌的调查

为了了解发酵全混合日粮(TMR silage)发酵过程中的乳酸菌的菌种变化,应用MRS琼脂培养基对新鲜啤酒糟和豆腐渣以及它们的发酵TMR(贮存0、14和56 d)的乳酸菌进行培养,所得的可培养乳酸菌应用PCR-DGGE进行筛选,对菌体DNA的碱基序列进行测定,在GenBank上检索相近的16S rDNA序列对其鉴定.结果表明:2种原料中的乳酸菌种类完全不同;加入相同的其他材料变成TMR后,优势乳酸菌发生改变;发酵初期(14 d)的2种发酵TMR中都有2种乳酸菌,并且有1种乳酸菌相同;发酵后期(56 d)的2种发酵TMR中都有5种乳酸菌,而且有4种乳酸菌相同.由此可知,采用不同食品废弃物所制作的发酵TMR,在发酵后期所含菌种趋于相同、种类增加.     

红茶菌中乳酸菌的筛选及其生长特性

红茶菌又名海宝,是一种由酵母菌、乳酸菌、醋酸菌等多种微生物发酵而成的传统酸性茶饮料。实验从红茶菌中对乳酸菌进行分离和纯化,然后对纯化所得乳酸菌进行鉴定。结果表明：从红茶菌中分离出的4 株菌（分别编号为XC、XD、XL和XQ）均为植物乳杆菌,且在培养14 h时达到稳定期;在4 株乳酸菌的生长过程中,pH值和滴定酸度均呈下降趋势;菌株XC、XD、XQ的最适接种量均为4%,菌株XL的最适接种量为6%;4 株乳酸菌的最适生长温度均为30 ℃,且均不耐盐;4 株乳酸菌对胆盐和酸度均有不同程度的耐受性,其中菌株XQ对     

产细菌素乳酸菌的分离与筛选

本试验从国内多种发酵材料中分离培养出5株乳酸菌(L1、L2、L3、L4、L5),该5株乳酸菌发酵上清液均对大肠杆菌(G-)、枯草芽孢杆菌(G+)有显著抑制作用。在排除有机酸、过氧化氢等因素对抑菌效果的影响后,初步确定5株乳酸菌发酵上清液中的抑菌物质为细菌素,且该细菌素对非蛋白酶类、温度和有机溶剂不敏感。     

蜜蜂消化道内含物乳酸菌群落组成的分析

从健康意大利蜜蜂肠道内经分离、纯化、培养,获得3株乳酸菌,对3株菌株进行菌落形态、革兰氏染色、生理生化特征研究,确定了3株乳酸菌中2株为乳杆菌;1株为双歧杆菌。     

不同种乳酸菌培养物预防雏白痢杆菌病效果的比较

不同种乳酸菌培养物预防雏白痢杆菌病效果的比较师守信，李海滨，沈宇微（东北农业大学动物医学系·哈尔滨·１５００３０）雏自用杆菌病流行的很广泛，为控制该病的流行需采取不同措施，乳酸菌培养物（酸奶）预防雏白痢杆菌病已有应用．本试验比较了嗜酸乳杆菌、保加利亚...