SW-OVA接种家兔血清抗体变化的研究

试验将苦马豆素(SW)与鸡卵白蛋白(OVA)合成人工抗原SW-OVA后免疫家兔,通过酶联免疫吸附法(EUSA)检测抗体变化规律,为免疫学检测和治疗家畜疯草中毒奠定基础.将8只家兔随机分成对照组(4只)、试验组(4只),试验组家兔每2周免疫1次,共免疫4次,第1次免疫后第21天开始采血,以后每周采血1次,每次采血1 mL,分离血清,ELISA检测抗体效价.结果发现:SW-OVA能够诱导机体产生很高效价的SW抗体,且高效价的抗体保持时间长,在免疫学检测和治疗家畜疯草中毒方面具有广阔的应用前景.     

苦马豆素人工抗原对家兔的免疫原性研究

试验分析了苦马豆素人工抗原SW-BSA对家兔的免疫原性,通过免疫学指标的评价,为免疫学检测和防治动物疯草中毒奠定基础。将18只家兔随机分为对照组(6只)、免疫Ⅰ组(6只)、免疫Ⅱ组(6只),免疫组依次进行首免和加强免疫,然后通过IHA和ELISA法分析血清抗体的变化规律,同时检测试验家兔E-玫瑰花环率的变化。结果显示,SW-BSA可以诱导机体产生高效价的抗SW抗体,而且高效价保持时间较长,机体E-玫瑰花环率也有所上升。表明合成的SW-BSA具有较好的免疫原性。     

苦马豆素单克隆抗体的制备与鉴定

本试验采用苦马豆素（swainsonine,SW）人工抗原SW-OVA免疫接种BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株能稳定分泌SW单克隆抗体的杂交瘤细胞1F10,杂交瘤细胞染色体数目为45~50对。经间接ELISA检测,该株细胞培养上清中抗体效价为1：25 600,诱生腹水效价为1：80 000。单克隆抗体的亚型为IgG1,亲和力解离常数为1.14×10¹⁰,腹水抗体纯化后纯度可达98%,回收率80%,SDS-PAGE凝胶电泳可见单克隆抗体的轻链、重链分子质量分别为25和50 ku,Western blotting检测抗体能特异性的识别SW。其线性检测范围为4~128 μg/mL（R²=0.9969）,与BSA、明胶、多聚赖氨酸、α-甘露糖苷等无交叉反应。本试验制备的SW单克隆抗体为免疫学检测SW和免疫学防制家畜疯草中毒奠定基础。     

苦马豆素抗血清治疗家兔小花棘豆中毒

通过检测苦马豆素（swainsonine,SW）抗血清治疗小花棘豆中毒家兔血清免疫和生化指标变化,评价SW抗血清对家兔小花棘豆中毒的治疗效果。将18只家兔随机分为对照组（6只）、攻毒组（6只）和攻毒治疗组（6只）,攻毒试验兔按干重拌料饲喂10g／（kg·d）小花棘豆草粉,攻毒组试验兔出现死亡时（第70天）停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW抗血清,每只兔每天0．5mL,连续注射4d。以攻毒试验开始进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW含量显著高于对照家兔（P〈0．05）;第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔（P〈0．05）,血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔（P〈0．05）;第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU含量显著高于对照家兔（P〈0．05）。攻毒治疗组家免注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性及BuN、CRE、GLU、SW含量较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E～玫瑰花环率显著上升。结果表明,SW抗血清可有效治疗家兔小花棘豆中毒。     

家兔感染豆状囊尾蚴后抗体的消长

为研究感染豆状带绦虫犬排出的虫卵对家兔感染豆状囊尾蚴后抗体水平的影响,将4只家兔分别攻虫卵0个、1 000个、2 000个、3 000个,定期采血,用ELISA方法,检测感染后不同时期家兔体内抗体变化趋势。结果表明,3只感染豆状囊尾蚴的家兔体内抗体逐渐上升,第5周和第6周上升明显,达到了极显著水平(P0.01)。随着攻虫数量的增加,家兔体内抗体水平逐渐上升。     

牛支原体P48蛋白卵黄抗体的制备

为了研究牛支原体P48抗原蛋白的免疫学功能及相应卵黄抗体的生物学特性,探究其抗体效价随免疫时间的变化规律,试验采用牛支原体P48蛋白疫苗免疫健康产蛋母鸡,定时采血并收集鸡蛋,用水稀释法结合硫酸铵盐析法制备特异性卵黄抗体,利用间接ELISA法检测血清抗体(IgG)和卵黄抗体(IgY)效价。结果表明,低、中、高剂量组均能诱导蛋鸡产生有效免疫应答,血清抗体效价与卵黄抗体效价的变化趋势基本一致,但卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,在首次免疫后8~10周Ig Y效价达到峰值,其中中剂量组的免疫效价最高,最高效价为1:212。经SDS-PAGE检测,制备所得的纯度达86%以上,得率在8.6 mg/m L以上。说明采用牛支原体P48蛋白免疫蛋鸡可制备高效价、高纯度的抗牛支原体P48蛋白卵黄抗体,从而为卵黄抗体在牛支原体的检测与防控方面的研究奠定了基础。     

家兔校验猪伪狂犬病灭活疫苗免疫效果的初步研究

用2种猪伪狂犬病(PR)油乳剂灭活疫苗免疫PRV抗体阴性家兔,每组免疫3只,并设不免疫兔作为空白对照.定期采血,用乳胶凝集试验和中和试验测定抗体效价.乳胶凝集试验在免疫后7 d检测到抗体,中和试验在免疫后21 d检测到抗体.家兔于免疫后28 d攻毒,免疫组均无明显临床症状,空白对照组全部死亡,证明家兔免疫后乳胶凝集效价≥1:45.3或中和试验抗体效价≥1:8时,可以抵抗强毒的攻击.     

苦马豆素人工抗原免疫山羊的安全性试验

试验通过分析疯草毒素人工抗原(疫苗)SW BSA免疫山羊时对机体肝功、肾功的影响,进行安全性评价。将30只羊随机分为对照组(6只)、免疫A组(12只)、免疫B组(12只),免疫组依次进行基础免疫、首免、加强免疫,每次免疫前进行采血,分析血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、尿素氮(BUN)、α苷露糖苷酶(AMA)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化,同时检测尿液中有无SW。结果表明,免疫组与对照组的血清GPT、GOT、BUN、AMA、AKP、LDH差异均不显著(P>0.05),尿液中未检查出SW。     

苦马豆素人工抗原接种和田羊的免疫学研究

为了探索苦马豆素(SW)人工抗原SW-BSA免疫接种后对和田羊的保护作用,试验通过间接血凝试验(IHA)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)分析SW-BSA免疫和田羊后血清抗体效价的变化,并检测试验羊血清E-玫瑰花环率的变化,以及血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-甘露糖苷酶(AMA)、肌酐(CRE)活性的变化,同时检测试验组尿液和血液中有无SW。结果表明:SW-BSA可以诱导和田羊产生高效价的抗SW抗体,而且这种高效价保持的时间较长,机体E-玫瑰花环率显著上升;试验组与对照组比较,血清中AST、ALT、AKP、LDH、AMA、CRE水平均差异不显著(P0.05),尿液和血液中均未检查出SW。说明合成的人工抗原SW-BSA具有较好的免疫原性和安全性。     

ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较

比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与细胞培养病毒中和试验(FAVN)检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体.将40只犬免疫兽用狂犬病疫苗后,第14 d静脉采血分离血清,分别采用ELISA法和国际贸易指定试验FAVN法检测血清样品,试验犬免疫第21 d攻击狂犬病毒BD06株.结果表明,两种方法检测结果差异不显著(p≥0.05,p=0.19),FAVN、ELISA法检测狂犬病抗体与攻毒试验结果的阳性符合率均为100%.     

黄芪注射液对兔病毒性出血症疫苗免疫效果的影响

将不同剂量的黄芪注射液与兔病毒性出血症(RHD)疫苗混合注射或分开同时注射,从接种到第180天,每隔15d采血1次,检测血凝抑制(HI)抗体;在180,240,300d时,试验组与对照组兔做攻毒保护试验。结果表明:试验组兔HI抗体明显高于对照组,差异极显著(P<0.01);不同剂量黄芪注射液和不同给药方法对免疫后的HI效价影响较小,差异不显著(P>0.05)。试验组疫苗保护期可延长60d,说明黄芪注射液可增强家兔接种RHD疫苗后的特异性免疫功能,增强RHD疫苗的免疫效果。     

“黄白散”对兔接种RHD疫苗后免疫功能的影响

在注射兔病毒性出血症 (RHD)疫苗后 ,30只兔随机分为 2组 ,试验组兔饲喂含 1 5 %黄白散的饲料。从接种到第 1 80天 ,每组取兔 8只 ,每隔 1 5d采血 1次 ,检测血凝抑制 (HI)抗体 ;在接种前 1天及接种后 5、 1 0、 1 7、 2 4、 31、 41、 5 1d ,每组取兔 1 0只 ,采血检测ANAE+淋巴细胞百分率 ;在 1 80、 2 4 0、 30 0d时 ,每组分别取兔 5只做攻毒保护试验。结果表明 :2组兔HI抗体峰值分别为 7 3log2和 9 8log2 ,差异极显著 (P <0 0 1 ) ;试验组疫苗保护期可延长 60d ;试验组ANAE+率从第 1 0天至 5 1天与对照组比较 ,差异极显著(P<0 0 1 )。所以黄白散可增强兔接种RHD疫苗后的特异性免疫功能 ,增强RHD疫苗的免疫效果。     

高致病性猪蓝耳病疫苗免疫抗体效价试验报告

本试验选用30日龄非免仔猪188头,随机分为3个试验组.每个试验组选用不同厂家猪繁殖与呼吸综合征疫苗,分别在30日龄对非免仔猪进行首免,首免前采用前腔静脉采血检测母源抗体,首免后28天采血检测免疫抗体,及时进行强免,于强免后28天采血检测免疫抗体.采用猪繁殖与呼吸综合征(美洲毒株)ELISA抗体检测试剂盒进行检测;结果:第1、3组猪瘟疫苗免疫效果优于第2组..要提高肉鸡经济效益,必须加强肉鸡的饲养管理.     

"疯草灵"解毒缓释丸预防绵羊黄花棘豆中毒试验

将8只绵羊随机分为试验组和对照组,每天按10 g/kg饲喂黄花棘豆Oxytropis ochrantha鲜草,同时试验组投服疯草灵解毒缓释丸3丸,对照组不投服,以探索疯草灵解毒缓释丸对绵羊黄花棘豆中毒的预防作用.结果表明:对照组在试验第16-21天出现黄花棘豆中毒症状,试验组在试验第50-72天出现黄花棘豆中毒症状;实验室结果为2组羊血清谷草转氨酶(SGOT)、血清碱性磷酸酶(AKP)活性、尿素氮(BUN)含量比试验前明显升高(P＜0.05或P＜0.01).表明投服3丸疯草灵解毒缓释丸对绵羊黄花棘豆中毒具有预防作用,但还不能完全防止黄花棘豆对绵羊肝脏和肾脏等组织器官的损害.     

不同免疫方法对肉种鸡新城疫抗体水平的影响

将4000只父母代肉种鸡随机分为2组,即对照组和试验组,每组2000只。对照组按厂家提供的免疫程序免疫:18周龄时用新城疫油乳灭活苗腿部肌肉注射1次,免疫剂量0.5mL/只,同时滴鼻新支二联苗,剂量1羽份/只。以后每隔4周用新支二联苗饮水免疫1次,剂量加倍;试验组按照现行免疫程序:18周龄时用新城疫油乳灭活苗腿部肌肉注射1次,间隔4周用新城疫油乳灭活苗加强免疫1次。结果表明,对照组在灭活苗+二联苗免疫后60d进行的第1次测定中,效价较高,免疫合格。在免疫后140d,第2次测定中抗体效价下降。42周龄时用二联苗免疫,第3次测定后抗体效价又上升。试验组18周龄时用灭活苗免疫后,间隔4周用灭活苗加强免疫,27周龄进行第1次免疫抗体效价测定,效价较高;在免疫后140d进行第2次抗体测定时,效价进一步上升。44周龄第3次抗体测定时效价保持平稳,仍为6log2。     

疯草内生真菌研究进展

疯草内生真菌Undifiumn oxytropis是由分布于我国西北地区的疯草中分离得到的一类内生真菌,其代谢产物苦马豆素(swainsonine,SW)具有良好的抗肿瘤活性,还能导致牛、羊疯草中毒,对我国草原畜牧业造成了严重的危害。论文对疯草内生真菌的分布、生长特性、SW抗肿瘤活性以及疯草内生真菌生物合成SW的研究进展做一综述,为有关研究提供参考     

吲哚美辛人工抗原及其多克隆抗体的制备

为了建立吲哚美辛(indomethacin,IDM)残留的免疫学检测方法,采用碳二亚胺法将载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)分别与IDM偶联,人工合成免疫原(IDM-BSA)和包被原(IDM-OVA)。通过紫外分光光度法、SDS-PAGE、ELISA等方法鉴定人工抗原的合成效果;将IDM-BSA免疫小鼠,利用iELISA和icELISA来测定抗体血清效价。结果显示:IDM能与BSA和OVA成功偶联,通过免疫小鼠获得高效价的多克隆抗体,效价可达1∶6.4×10~4,半数抑制率为27.23 ng/mL。本研究结果为建立动物源性食品中IDM残留的免疫学检测方法奠定基础。     

绵羊疯草慢性中毒的放牧行为和植物选择在成瘾性上的研究

嗜毒成瘾通常成为疯草(黄芪属Astragalus和棘豆属Oxytropis)中毒的临床症状。在本试验中,母羊在舍饲试验中对棘豆属植物的累进中毒并没有产生对疯草植物的嗜毒成瘾性。中毒后经过一年的恢复,把这些母羊放在疯草感染严重的草地上放牧,来测定它们是否残存有对疯草的嗜好或成瘾性。在放牧地上,疯草中毒组的家畜和对照组家畜都没有消耗足量的疯草,这是因为牧地上生长有丰富多汁而又旺盛的牧草,并且放牧压低得足以进行自由采食。疯草中毒了的母羊表现出对疯草并无残存的嗜好。然而,当疯草中毒组母羊要摄食少量疯草时,常显示出突然发作的癫痫症状:摇头,在摇摆运动中,将头钩于胸下,在家畜能进食之前眼睑振颤达几秒钟。疯草中毒母羊进食速度约比对照母羊低三分之一(P相似文献   

疯草内生真菌苦马豆素合成相关基因及其研究方法的进展

<正>豆科棘豆属(Oxytropis)和黄芪属(Astragalus)有毒植物统称为疯草。疯草的营养价值丰富,是潜在的优良牧草。但家畜长期或过量采食后,可发生以神经机能紊乱为特征的慢性中毒病,称之为疯草中毒病[1]。中毒家畜表现为共济失调、瘫痪、流产、不孕、出生缺陷和死亡等。疯草导致动物中毒的主要因素是疯草中的吲哚里西啶类生物碱—苦马豆素,它能特异性地抑制参与糖蛋白分解代谢的溶酶体α-甘露糖苷酶、高尔基α-甘露糖苷酶Ⅱ,破坏细胞内膜系统[2-     

肉鸡口服猪疫苗产生高免血清的可行性研究

卵黄抗体的产生主要通过注射免疫产蛋鸡获得,该方法不仅对鸡群的应激大,还会加重工作量。通过在肉鸡日粮中添加疫苗研究其体内产生高免血清的可行性,能为口服免疫产生高免卵黄抗体奠定技术基础。本试验设置两个试验组和两个对照组,以14日龄的肉鸡作为研究对象,在试验组日粮中连续5 d添加猪伪狂犬病活疫苗和猪圆环病毒2型灭活疫苗进行口服免疫。在免疫结束后第2 d进行采血,每隔5 d采血一次,连续采血4次。分离血清,用ELISA试剂盒测定抗体滴度。结果显示,用伪狂犬活疫苗免疫过的鸡群在免疫后第2周就能够产生抗体,用猪圆环灭活苗免疫过的鸡群始终没有检测到抗体。该试验表明,在日粮中添加疫苗对肉鸡体内抗体的形成是可行的,但还需要采取进一步的措施提高血清中的抗体滴度。