猪体细胞核移植研究进展

动物克隆技术对于优良种畜的复制、减少实验用动物数目、动物遗传多样性保存及濒危动物挽救、转基因动物培育以及人类疾病的治疗都具有重要的意义。文章主要介绍了影响体细胞克隆猪的几个因素,涉及胞质受体的选择与去核、供核细胞的选择与移植、激活、重组胚移植以及供体细胞与受体卵母细胞的细胞周期的同步化等。     

供体细胞对哺乳动物体细胞核移植的影响

哺乳动物体细胞核移植技术(克隆)在农业、生物技术、医药生产和濒危动物保护等方面具有很大的潜力和应用价值,已成为目前发育生物学研究的重要方法.文章依据近年来国内外在动物克隆技术方面的资料,分析了供体细胞类型、供体细胞动物年龄、供体细胞所处细胞周期、体外传代次数以及供体动物性别等因素对克隆动物效率的影响及可能原因.     

转基因克隆牛的研究进展

转基因动物在畜牧业生产以及生物医学上具有广阔和诱人的应用前景,生产转基因的方法也很多,本文就体细胞棱移植生产转基因牛的供体细胞种类、转染方法和转基因牛的应用作一综述。同时也指出了转基因牛存在的不足,并展望了其发展前景。     

动物克隆技术研究的历史、现状与展望

动物克隆技术对于优良种畜的复制、减少实验用动物数目、动物遗传多样性保存及濒危动物挽救、转基因动物培育以及人类疾病的治疗都具有重要的意义。尽管早在1938年HansSpemann就已提出了胚胎细胞核移植的设想,但直到20世纪50和60年代才在两栖类和鱼类获得成功。而哺乳动物的胚胎细胞核移植起步更晚,直到20世纪80年代才开始有成功的报道。自1997年Wilmut等人培育出体细胞克隆绵羊Dolly以来,哺乳动物克隆技术有了迅速发展;先后获得了体细胞克隆小鼠、牛、山羊、猪、猫和兔,供核细胞的种类也在不断拓宽。然而,目前体细胞克隆的成功率还很低,一般只有1%～3%。一般认为,造成克隆成功率低的原因主要是供体核后成性基因程序再编不当。尽管最近的实验证明,端粒长度和X-染色体灭活等程序再编正常,但于配子发生期间形成的后成性信息(如配子基因印迹)在核移植之后并不能恢复。     

FSH 、LH对猪卵母细胞核成熟及体外成熟时间对去核效率的影响

克隆动物(核移植)的原理就是将卵裂球或体细胞核移人去核的卵母细胞或受精卵中,采用各种激活方法使之激活,发生卵裂,移植受体后产生个体。猪的体细胞克隆效率与其他动物(牛、羊)相比较低,需     

体细胞克隆牛的研究进展

体细胞核移植是目前生物技术领域研究的热点之一,具有重大的科学意义和应用价值.牛有产奶量高等独特优势,具有巨大的应用潜力,不同国家已相继诞生了体细胞克隆牛及转基因牛.本文回顾了牛体细胞核移植简史,对体细胞核移植方法、体细胞供核细胞的种类、受体卵母细胞去核方法、重构胚的激活、体外培养体系以及限制牛体细胞核移植应用的因素等进行了综述,并展望了牛体细胞核移植的应用前景.     

动物体细胞克隆技术的研究进展

本文就体细胞克隆技术的研究现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术目前存在的问题及其在制作转基因动物上的应用等方面,概述了体细胞克隆技术的研究进展.     

动物体细胞克隆技术的研究进展

体细胞克隆绵羊“多莉”(Dolly)的诞生,表明成年哺乳动物体细胞具有基因组的全能性。本文从“多莉”诞生的背景、体细胞克隆技术的研究现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术目前存在的问题及其在制作转基因动物上的应用等方面,概述了体细胞克隆技术的研究进展。     

动物体细胞克隆技术的研究进展

体细胞克隆绵羊“多莉”（Dolly）的诞生，表明成年哺乳动物体细胞具有基因组的全能性。本文从“多莉”诞生的背景、体细胞克隆技术的研究现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术目前存在的问题及其在制作转基因动物上的应用等方面，概述了体细胞克隆技术的研究进展。     

体细胞克隆猪的研究进展

哺乳动物克隆不仅可以保护濒危动物，而且与干细胞工程技术相结合能应用于克隆性治疗，是目前生物技术领域研究的热点之一，具有重大的科学意义和应用价值。由于体细胞克隆猪在人类器官移植方面具有巨大的应用潜力，已成为当今体细胞克隆研究的热点。从2000年开始，在不同国家相继诞生了体细胞克隆猪及转基因猪，但是其成功效率很低（1％～2％）。主要综述了影响体细胞克隆猪的几个因素，涉及胞质受体、供核细胞、显微操作、激活以及重组胚移植。     

哺乳动物的无性生殖

导言无性生殖亦称克隆（Clone），无需单倍体的精子和卵子受精发育产生新的个体，而是由正常的二倍体细胞通过无性系培养、发育和胚胎移植获得后代。现已研究成功的无性生殖技术有：胚胎分割、嵌合体、卵裂球纯系培养和细胞核移植。细胞核移植又包括胚胎细胞、胚胎干细胞、胎儿细胞和成年动物体细胞核的移植。近期在国内外开展大讨论的克隆技术是指通过细胞核移植产生克隆动物。研究此技术对发展畜牧业、医学和药学有重要意义。通过细胞核移植，可克隆出优质高产的畜群；加速品种改良，培育出生长快具抗病性的家畜；是保护动物资源和增加珍…     

克隆动物的端粒长度研究进展

端粒是真核染色体分子末端的DNA区域,是由重复的DNA序列和端粒结合蛋白形成的DNA-蛋白复合物,对于染色体的复制和稳定起着重要作用。近年来研究结果表明,端粒长度的缩短与人类疾病和衰老密切相关。同时,体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)作为一种有效的无性生殖手段,越来越多的在科研和生产中得到应用。由于体细胞核移植通常采用体细胞作为核供体细胞,因而供体细胞的端粒长度、核移植后重组胚的端粒在胚胎早期是否会被修复、端粒长度是否有变化等问题,对于研究克隆动物的重编程、发育生物学都有着重要的指导意义。作者将对端粒的结构和端粒长度的机理研究、在克隆哺乳动物中对端粒长度的探索研究,以及近几年来关于端粒方面的一些研究进展加以阐述。     

体细胞冷冻保存技术及其在动物遗传资源保护中的应用研究进展

体细胞冷冻保存技术是指将体细胞置于超低温条件下,新陈代谢几乎停止,从而长期保存体细胞的一种技术,该技术对于体细胞克隆、诱导性多能干细胞等具有重要意义,同时也是建立动物体细胞库的关键技术。本文综述了体细胞冷冻保存原理与冷冻损伤机制、新型冷冻保护剂、冷冻保存方法以及冷冻保存技术在动物遗传资源保护上的应用,以期为体细胞冷冻保存技术的研究与应用提供参考。     

世界首次：我国科学家培育出猪干细胞

近日，我国科学家在世界上首次把来自猪的体细胞（不是精细胞或卵细胞的细胞）诱导转变成多能干细胞一这种细胞就像胚胎干细胞一样，有能力发育成身体中的任何类型的细胞。这也是全世界首次使用有蹄类动物的体细胞培育出多能干细胞，可能为建立人类遗传病模型、培育供人类器官移植的转基因动物以及开发耐受猪流感等疾病的猪开创一条道路。     

体细胞克隆猪胚胎的研究进展

自"多利"羊问世以来,体细胞克隆研究已取得了很大进展,相继获得了牛、山羊、鼠等克隆动物.相对而言,猪的体细胞克隆研究进展较慢,其主要原因是猪的生殖细胞、胚胎体外显微操作难度较大;妊娠维持有别于其他家畜,需具备一定量的胚胎数.所以直至2000年才有所突破,获得了体细胞克隆后代.然而,猪体细胞核移植的效率很低,用占移植卵母细胞的比例来衡量,只有1%～2%.本文主要就猪体细胞克隆的关键技术加以简要论述,供参考.     

转基因猪在农业和生物医学中的应用

早期方法制备转基因猪仅局限于外源基因的随机整合。胎儿体细胞同源重组技术与核移植技术相结合，使猪的基因组定位修饰成为可能。在人猪器官移植研究中，对引起超急排斥反应(HAR)基因进行敲除，首次实现了猪基因组的定位修饰。因为猪被广泛用作人类疾病模型，所以基因修饰为改变这些模型或创建更多模型提供了较好的途径。然而棱移植动物易出现表型异常。表型异常可能是外源基因改变而未被正常转入所致。虽然利用棱移植基因定位修饰技术已成功制备出转基因动物，但棱移植技术、体细胞培养条件及基因修饰技术尚待进一步完善。     

我国首例成体体细胞作为核供体的东北民猪克隆成功

10月12日，在哈尔滨市三元畜产实业有限公司种猪场，由东北农业大学刘忠华博士带领的《东北民猪体细胞核移植研究》课题组与哈尔滨市三元畜产实业有限公司合作，培育出的我国首例采用成体体细胞作为核供体的3头健康雌性克隆东北民猪以剖腹产的方式顺利出生．克隆猪各项形态特征与供核体细胞个体完全一致。     

哺乳动物体细胞克隆技术的应用前景

体细胞克隆的成功为农业、医学以及生物学基础研究提供了新的工具。体细胞核移植技术和转基因、胚胎干细胞等现代生物技术的相互渗透更是活跃。当前,尽管体细胞核移植效率仍然不甚理想,而且克隆后代成活率低、畸形率高,但人们还是对该技术的发展充满了憧憬,尤其希望借助这一手段在攻克一些长期困扰人类的疑难疾病上有所突破。作者则总结了体细胞核移植在上述各方面的应用价值,供同行参考。     

DNA甲基化酶抑制剂对体细胞染色体的影响

在动物的体细胞克隆过程中,供体细胞的细胞核要由高度甲基化状态转变为胚胎细胞的非甲基化状态,从而实现全能性的重新获得。试验利用DNA甲基化酶（5-aza-dc）抑制剂处理供体细胞,尝试建立一种既不影响染色体结构和数目,又能降低供体细胞细胞核的甲基化状态的最适浓度和方法,从而提供一种提高体细胞克隆动物效率的方法。在试验中,用不同浓度的甲基化酶抑制剂（5-aza-dc）处理奶牛成纤维细胞72 h,通过常规染色体核型分析方法制备染色体分裂相,检测其染色体数目、结构等的改变,结果显示,低浓度的甲基化酶抑制剂（0.005和0.01 μmol/L）处理,染色体没有发生明显的畸变（P＞0.05）,染色体能够保持正常的形态,高浓度（0.03与0.05 μmol/L）处理导致染色体畸变率显著增加（P＜0.05）,而0.1 μmol/L的5-aza-dc处理后染色体畸形率增加更为明显（P＜0.01）。总之,此试验的结果说明在对供体细胞做甲基化处理时用0.005和0.01 μmol/L的5-aza-dc处理不会影响细胞染色体结构和数目,但是高浓度处理则会导致染色体畸变率显著增加,不能用于体细胞克隆动物生产。     

克隆动物可能真的短寿

对于用体细胞核移植克隆的动物是否早衰 ,科学界已经争论了好几年。人们对克隆动物体细胞染色体端粒 (作为细胞寿命的一种标志 )长短的报道也不一致。最近 ,日本的科研人员以克隆小鼠为动物模型 ,对克隆动物的寿命首次作了直接的研究。它们比较了 12只克隆的雄性小鼠与 7只通过