清远麻鸡重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗免疫程序的优化

为了优化重组禽流感病毒(H5+H7)二联三价灭活疫苗在黄羽肉种鸡的免疫程序,本研究对广西玉林一大型养鸡场的清远麻鸡群进行两种免疫程序的比较试验。首先将鸡群分为A、B两组,A鸡群在11日龄进行首免,肌肉注射重组禽流感病毒(H5+H7)二联三价灭活疫苗,0.3mL/只,然后在33日龄进行第二次免疫,0.5mL/只;B鸡群使用同种疫苗相同剂量分别进行免疫,首免在14日龄,二免在28日龄。鸡群免疫当天和免疫后不同时间分别采血,并用血凝抑制试验(HI)检验血清中相应H5和H7亚型的抗体效价。结果表明,B鸡群在14日龄进行首免,28日龄进行二免时,抗体平均效价上升较快,两个亚型在56日龄的抗体合格率均达到100.0%,而A鸡群要达到同样合格率则需要到61日龄。本试验研究证明,采用B鸡的免疫程序效果更佳。     

鸡免疫疫苗后H7N9亚型流感病毒抗体消长规律研究

为了解鸡免疫重组禽流感(H5+H7)二价疫苗后,H7亚型禽流感病毒(Re-1株)抗体的消长规律,在一个蛋鸡场进行临床免疫试验。实验鸡群在181天龄开始首免重组禽流感(H5+H7)二价疫苗,分别在181d、188d、195d、202d、209d和256d采集血清进行H7N9亚型流感病毒抗体检测,结果为,鸡群在181d、188d、195d、202d、209d和256d的抗体滴度中位数分别为0.74log_2、3.30log_2、7.74log_2、5.37log_2、8.52log_2和8.93log_2。结果表明,鸡群免疫重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗后,能够诱导产生H7N9亚型流感抗体,一免后14d,抗体滴度达到较高水平,随后抗体滴度开始下降,二次免疫后抗体滴度持续上升,在二免后54d还能维持较高的抗体滴度,抗体阳性达到88.89%。     

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗对鸡和鸭的免疫效果观察

H7N9流感变异毒株的出现给我国家禽养殖业造成了严重的疫情风险。为了解和评估新型重组禽流感H5+H7二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)的免疫效果和抗体消长规律,我们开展了鸡、鸭现场免疫试验。监测结果表明,该疫苗对蛋鸡和蛋鸭都具有良好的免疫效果,H5和H7亚型免疫抗体水平在免疫后2周均能达到100%的免疫合格率。对雏鸡也具有较好的免疫效果,免疫一次时H5和H7亚型抗体合格率分别在一免后3周和2周达到70%以上,并维持到一免后13周;进行二次免疫后,H5和H7亚型抗体合格率在二免后1周都达到100%。对雏鸭的免疫效果相对较差,一次免疫的H5亚型抗体水平不能达到70%的免疫合格标准,二免后1周H5和H7亚型抗体合格率均能达到80%以上,必须加强免疫一次才能达到满意的免疫效果。     

雏鸭重组禽流感（H5+H7）三价灭活苗母源抗体消长规律

为探究雏鸭重组禽流感(H5+H7)三价灭活苗母源抗体消长规律,确定最佳首免日龄,将试验分为A组(种鸭免疫H5N1 Re-11+Re-12株、H7N9 H7-Re-2株、H5N2疫苗)和B组(种鸭免疫H5N2 rSD57株+rFJ56株、H7N9 rGD76株疫苗);选其孵化后的雏鸭各300羽,分别于1、7、14、21、28日龄时采血,每组随机采集100份样品,通过血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验进行禽流感母源抗体检测。结果显示:两组各亚型母源抗体在1日龄时平均滴度均达最高水平( 7.27log2),且离散程度低( 0.22)。两组雏鸭的禽流感母源抗体阳性率均随日龄增长而逐渐下降,7日龄时,平均滴度在4.26log2以上,群体抗体阳性率在76%以上,其中B组阳性率略高于A组;14日龄时,平均滴度都下降到2.55log2以下,群体抗体阳性率下降到25%以下;21日龄时,平均滴度均在0.43log2以下,群体抗体阳性率下降至1%以下。结果表明,高抗体水平种鸭能够使后代雏鸭具有较高水平的禽流感母源抗体,但母源抗体保护时间较短,重组禽流感(H5+H7)三价灭活苗的最佳首免时间为7～14日龄。本研究为鸭禽流感疫苗免疫策略制定提供了参考。     

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗免疫效果评估

2017年7月,农业部决定对全国家禽开展H7亚型流感免疫。为评价重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对家禽的安全性及免疫效果,2017年10—12月以田间试验方式,常规养殖肉鸡(江村黄鸡)、樱桃谷白鸭、黑棕鹅各120只。按程序免疫:肉鸡9日龄首免(剂量0.3 mL),30日龄二免(剂量0.5 mL);樱桃谷白鸭15日龄首免(剂量1 mL);黑棕鹅15日龄首免(剂量1 mL)、50日龄二免(剂量1.5 mL)。定期采集血清测定抗体效价直至出栏,并每日观察禽群临床表现。试验结果显示:鸡首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为4.2 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为7.5 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于8 log2,抗体合格率均大于70%。鸭首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为5.1 log2,抗体合格率均大于70%,H7亚型HI抗体效价为5.6 log2,抗体合格率均大于70%,出栏前(47日龄)H5和H7亚型HI抗体效价均大于6 log2,抗体合格率均大于70%。鹅首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为3.9 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为5.2 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于7 log2,抗体合格率均大于70%。通过临床观察,未发现该疫苗有严重免疫副反应。试验结果表明,该二价灭活疫苗安全有效,但对于生长周期超过70 d天的家禽,应免疫两次。     

重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株)对雉免疫效果的研究

为评估重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株)对雉的免疫保护效果,选取30日龄的雉,按照免疫程序首免后21 d,加强免疫1次,分别于接种前和接种后定期采血,分离血清,检测H5、H7亚型HI抗体滴度。结果显示,免疫前,雉血清中H5、H7亚型HI抗体滴度均为0;免疫后14 d,H5和H7亚型抗体平均滴度分别达到7.0log2和7.07log2,49 d后平均滴度达到峰值,分别为8.04log2和9.20log2;H5亚型免疫有效期可达105 d以上,H7亚型可达189 d以上。结果表明,重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对雉具有良好的免疫保护效果且安全性良好,但疫苗免疫49 d后,H5、H7抗体效价逐渐下降,133 d后明显下降,群体免疫合格率低于70%,因此生产中推荐,30日龄首免后,51日龄和5月龄各加强免疫1次。本研究为珍稀禽的禽流感免疫疫苗选择和程序制定提供了参考。     

重庆市部分地区H5和H7重组禽流感病毒二价灭活苗免疫效果监测

2017年7月7日,农业部决定对全国家禽开展H7亚型流感免疫。为了掌握重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活苗的免疫效果,2017年8—9月,重庆市动物疫病预防控制中心进行了控制性试验和大面积临床监测。控制试验结果表明:首免15 d后,H7亚型禽流感抗体合格率可达70.00%,H5亚型抗体合格率仅为10.00%;首免22 d后,H7亚型禽流感抗体合格率达到93.33%,H5亚型抗体合格率达到60.00%;该疫苗未出现严重免疫副反应;H7亚型禽流感抗体产生的时间早于H5亚型。随机选取5个区县,采集414份免疫血清进行监测。结果显示:二价灭活苗免疫21 d后,H5和H7亚型禽流感抗体平均合格率分别为92.27%和76.00%;5个区县的抗体水平存在差异;蛋鸡抗体水平高于肉鸡。控制试验及临床监测结果提示,该疫苗免疫效果确实,但部分区县仍存在免疫抗体水平不高的养禽场。因此,在新旧疫苗交替使用期间,各地应高度重视高致病性H5和H7亚型禽流感防治工作,尤其是肉鸡。     

湘西自治州规模化鸭场H5、H7亚型禽流感病毒抗体水平的检测与分析

为了研究湘西自治州规模化鸭场的高致病性禽流感的免疫情况和潜在的感染风险,笔者于2008年从湘西自治州各县市采集了规模化鸭场血清标本共480份,采用血凝试验和血凝抑制试验对4个免疫了H5亚型禽流感病毒灭活疫苗的规模化鸭场的不同日龄家鸭进行了H5和H7亚型禽流感病毒抗体的检测。结果表明:4个规模化鸭场H5亚型禽流感病毒抗体合格率分别为65.56%(59/90)、67.78%(61/90)、53.33%(48/90)、47.78%(43/90),说明规模化鸭场的H5亚型免疫抗体水平还有待提高,以对家鸭提供确实的保护;H7亚型禽流感病毒抗体阳性率为0,规模化鸭场没有H7亚型禽流感病毒感染。     

两种重组禽流感病毒H5亚型疫苗免疫效果的研究

为了更好地评价禽流感疫苗免疫效果,有效预防高致病性禽流感的发生,选用两种重组禽流感病毒H5亚型疫苗(Re-6株、Re-6株+Re-8株)对14日龄雏鸡开展免疫效果的比较试验,结果表明:从免疫抗体水平来看,免疫Re-6株疫苗的A组鸡群在首免后90d抗体水平维持在7log2以上,之后逐渐下降;免疫Re-6株+Re-8株疫苗的B、C组鸡群在首免后28d达到高峰,随之下降,当C组在56日龄加强免疫后,至180d抗体水平仍维持在7.6log2以上。从群体免疫抗体合格率来看,A组免疫合格率至180d低于70%标准,B、C组免疫合格率一直保持70%以上,但C组比B组免疫合格率更高。H5亚型疫苗(Re-6株、Re-6株+Re-8株)均能产生较好的免疫效果,但(Re-6株+Re-8株)疫苗的有效保护期更长,尤其是加强免疫之后,免疫保护率更高。因此建议家禽免疫H5亚型(Re-6株+Re-8株)疫苗,蛋鸡适当加强免疫,从而达到有效预防禽流感的目的。     

禽流感灭活疫苗H5N2 D7株与H5N1 Re-6株对鸭的免疫效果研究

为评价禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)和重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6株)对鸭的免疫效果,根据兽医流行病学中利用比较率判断疫苗应用效果的样本量计算方法,得出所需的最小样本量;以田间试验的方式,常规养殖白鸭300只、番鸭240只,并对其进行随机分组;按程序免疫,从10日龄首免后2周开始,每周采集血清测定抗体效价,直至出栏(白鸭45日龄、番鸭66日龄)。结果显示,10日龄白鸭和番鸭的母源抗体分别为3.02 log2和0 log2,需进一步开展研究,以确定最佳首免时间。首免后2周,无论是白鸭还是番鸭,H5N2 D7株疫苗组抗体HI效价和抗体合格率均高于H5N1 Re-6株疫苗组;首免后3~5周,两种疫苗对白鸭和番鸭的HI效价均4 log2,抗体合格率均≥70%。二免后1周至出栏,两种疫苗对白鸭和番鸭均产生较好的免疫效果,HI效价均7 log2,抗体合格率均80%。是否采用对应亚型的血凝抑制抗原对抗体的检测结果有较大影响。研究表明:免疫两种疫苗后均能产生较好的免疫抗体,但相对而言,H5N2 D7株疫苗较H5N1Re-6株疫苗更适合于鸭的免疫;在鸭等水禽中推广使用该疫苗将能更有效地防控高致病性禽流感。     

蛋鸭重组禽流感病毒(H5N1亚型)灭活疫苗免疫试验

采用重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6株)和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(Re-6株+Re-4株)进行蛋鸭免疫试验,监测免疫鸭的抗体消长动态,旨在为鸭禽流感免疫程序的制定提供理论依据。基于试验结果,提出鸭禽流感免疫程序:2周龄首免,4~5周龄二免,开产前2~3周三免,此后每隔4~5个月加强免疫一次。     

不同剂量重组禽流感病毒二价灭活疫苗免疫效果对比

为了解重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)不同免疫剂量对黄羽肉鸡的免疫效果,将临床健康的黄羽肉鸡240羽随机分成A、B、C、D四个组,每组60羽,用同一种免疫程序同一时间、不同剂量进行免疫,采用血凝和血凝抑制的方法检测血清中的禽流感H5和流感H7抗体。试验结果表明,A、B、C、D四组疫苗的免疫效果好,在二免后14 d至56 d(76日龄),免疫抗体合格率都达到90%以上,达到农业部免疫抗体合格率的要求(70%以上);禽流感H5免疫抗体平均滴度达7log2以上,流感H7免疫抗体平均滴度达6log2以上;但以C、D两组的免疫效果更好,在二免后14 d至56 d(76日龄),免疫抗体合格率都达100%,禽流感H5和流感H7免疫抗体平均滴度达7.8log2以上。因此,重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对鸡的免疫程序:10日龄颈部皮下首次注射0.1、0.2、0.3 mL;20日龄颈部皮下二次注射0.1、0.2、0.3、0.5 mL,适用于76日龄左右出栏的肉鸡。但推荐10日龄和20日龄鸡分别颈部皮下注射0.3m L/只,免疫程序会更好。     

高致病性禽流感疫苗不同免疫方式对水禽的免疫效果观察

对遵义市目前主要使用的2种不同禽流感疫苗进行了免疫效果的比对分析;对本地鸭、鹅群以不同免疫方式同种剂量进行接种,比较分析了不同免疫方式对禽流感免疫效果的影响;对比结果表明:2种禽流感疫苗,不同免疫方式,均能在一定时期内达到保护效果,最高抗体滴度在免后20~28 d达到峰值,后开始下降,两种疫苗在40d后降至8log2;免疫2次抗体保护效果显著高于免疫1次,H5N1加强组、H5+H9二联苗加强组、H5+H9二联苗、H5N1混免组,组间差异不明显,H5+H9二联苗、H5N1混免组,鸭平均抗体滴度显著高于鹅平均抗体滴度(P0.05);单免一次禽流感H5NI单苗抗体滴度显著高于H+H二联苗(0.05P0.01)。     

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗的鹅免疫试验

为探究重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗对鹅的免疫特性,将100只27日龄四季鹅,随机分成3组:一免组40只,接种剂量0.5 mL/只;二免组40只,二次接种剂量分别为0.5 mL/只、1.5 mL/只;对照组20只,不免疫。结果显示:一免后21 d H5(Re-8株)免疫抗体平均滴度为5.85 log2,抗体合格率为85%,28 d为7 log2,抗体合格率为100%,但60 d后平均滴度降为5.95 log2;二免后7 d为7.15 log2,39 d为7.95 log2,抗体合格率均保持100%。一免后21 d H7N9免疫抗体平均滴度为5.2 log2,抗体合格率为85%,28 d为6.6 log2,抗体合格率达到100%,60 d后降为3.15 log2;二免后7 d为6.8 log2,39 d为7.05 log2,抗体合格率均保持在100%。结果表明:该疫苗能够有效刺激鹅产生免疫保护抗体,适用于鹅的禽流感免疫;为增强免疫保护效果,建议进行二次免疫。     

H5亚型禽流感主要免疫程序及效果的现状调查报告

在东莞市随机抽取了15个免疫程序背景清晰的养殖场进行H5亚型禽流感H1抗体水平调查,其中鸡场5个,鸭场8个,鹅场2个.调查结果表明:东莞市H5亚型禽流感的免疫抗体水平参差不齐,但肉鸡、肉鸭、肉鹅实施2周龄首免、3周龄二次免疫可以获得良好的免疫效果,产生的H1抗体均值高且持续时间长.     

禽流感灭活疫苗（H5N2亚型，D7株）与同类产品对鸭和鸡免疫后血清学比较试验

为评价禽流感灭活疫苗（H5N2亚型,D7株）与同类产品对不同日龄鸭及SPF鸡的免疫效果,将该疫苗与国内两家禽流感生产企业的2批重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）分别免疫鸭和SPF鸡,免疫后14、21、28、42 d采血测定各免疫组的HI抗体效价。禽流感灭活疫苗（D7株）以0.25 mL剂量免疫鸭后14 d,所有免疫组鸭的HI抗体几何平均滴度（GMT）即能达到6㏒2以上,28 d HI抗体GMT达到峰值9.1㏒2,而两批重组禽流感灭活疫苗以0.5 mL剂量免疫鸭21 d后HI抗体GMT均没有达到6㏒2;两种疫苗分别免疫21日龄SPF鸡21 d后各免疫组的HI抗体GMT基本相似。试验结果表明,禽流感灭活疫苗（D7株）对鸭的免疫效果要明显优于重组禽流感灭活疫苗(Re-5株),而对鸡的免疫效果相似。     

H5亚型禽流感Re-4毒株疫苗免疫效果调查与分析

为了解H5亚型禽流感Re-4毒株疫苗免疫效果,采用血凝-血凝抑制试验(HA-HI)方法对16个县区102个规模场/散养户送检的1621份鸡血清,进行H5亚型禽流感Re-4毒株免疫抗体检测。结果:Re-4毒株免疫血清抗体合格率为72.9%(抗体滴度≥5log2),Re-4毒株免疫抗体合格率高于50%的蛋鸡场户占80.4%,免疫抗体滴度≥7log2的血清份数占合格数的76.2%;发生过H5亚型禽流感疫情和疑似H5亚型禽流感疫情地区的17个养鸡场户,鸡群抗体滴度≥7log2的血清比例占到免疫合格数90%以上。     

鸭H5N1亚型禽流感疫苗免疫抗体消长规律的比较

试验于江苏扬州地区9个规模鸭场进行,将每个鸭场的鸭群随机分为数量相等的2组,分别为对照组和加强免疫试验组。在冬季(12月初)分别随机采血检测抗体,同时对试验组鸭群加强免疫H5N1亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8株)。50d后对两组分别随机采血检测抗体。试验结果表明:加强免疫后,试验组免疫抗体合格率从93.38%提高到98.01%,免疫抗体滴度从6.04log_2提高到7.41log_2;对照组抗体合格率无明显变化,抗体滴度从6.09log_)2降低到5.98log_2。由此可见,在12月初加强免疫的免疫方案能显著提高鸭群免疫抗体合格率、免疫抗体滴度及鸭群抗体均匀度。本试验结论,在寒冬的长三角地区,应及时对鸭群进行H5N1亚型禽流感加强免疫,并建议用鸭群免疫抗体合格率大于80.00%和鸭群抗体滴度大于6.00log_2两个指标评估免疫效果。     

种鸡禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗免疫程序的研究

本研究设计不同的免疫程序,用禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗(H5N1 Re-1+H9N2 Re-2株)免疫黄羽种鸡,通过对H5亚型和H9亚型禽流感HI抗体滴度监测,探讨H5亚型和H9亚型禽流感HI抗体消长规律及禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗的免疫程序.结果表明,用禽流感二价灭活疫苗免疫黄羽种鸡后,H5亚型和H9亚型禽流感HI抗体的消长规律基本同步,其抗体滴度阶段性峰值出现在免疫后的第21~28天.根据试验结果,建议用禽流感二价灭活疫苗免疫黄羽种鸡的免疫程序设为:首免(14 d),0.3 mL/只;二免(56 d),0.5 mL/只;三免(119 d或开产前4周),0.5 mL/只.     

H5亚型禽流感疫苗对特禽及水禽的免疫效果观察

用H5N2亚型禽流感疫苗,分别免疫SPF鸡、乌鸡、珍珠鸡、贵妃鸡、火鸡、鸭及鹅,免疫后采血测定其HI抗体,观察我国现有的H5N2亚型禽流感疫苗对特禽及水禽的免疫效力.结果,免疫后3周,SPF鸡、乌鸡、珍珠鸡、贵妃鸡、火鸡、鸭及鹅的平均HI抗体滴度分别为2 7.2、2 7.6、2 4.3、2 4.83、2 4.6、2 6.2及2 5.3,乌鸡两次免疫,其中一次HI抗体为2 9.65.试验证明,SPF鸡、特禽及水禽用H5N2亚型禽流感疫苗免疫后,均能产生一定水平的HI抗体,但不同种类的家禽所产生的HI抗体滴度存在较大差异,以SPF鸡及乌鸡所产生的HI抗体滴度最高,而珍珠鸡、贵妃鸡及火鸡所产生的HI抗体滴度较低,水禽对H5N2亚型禽流感疫苗可产生一定水平的HI抗体.